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正文內(nèi)容

ch09遺傳重組(文件)

 

【正文】 單鏈 與其對(duì)應(yīng)的 雙螺旋 發(fā)生作用,配對(duì)區(qū)間擴(kuò)展, 重組中間體 形成直到核酸內(nèi)切酶解離此 兩個(gè)雙螺旋分子 。 ? RecBCD酶是一種多功能酶,具有幾種不同的活性。 。 Ruv A 蛋白可以識(shí)別 Holliday連接體的結(jié)構(gòu), Ruv B是一個(gè)腺苷三磷酸酶并可能提供支鏈遷移的動(dòng)力。 ? 一個(gè)含 4個(gè)堿基的序列提供了 Ruv C拆分Holliday連接體的熱點(diǎn) 。 兩種類型間的轉(zhuǎn)換是通過位點(diǎn)特異性重組實(shí)現(xiàn)的 。 突變后可以阻止 λDNA的整合。 Int是一種 DNA結(jié)合蛋白,對(duì) POP ’ 序列有強(qiáng)的親和力。催化切除反應(yīng)的除了 Int和 IHF外,還需要一種叫做 切除酶 ( exicisionase, Xis)的蛋白參加,該酶由 λ噬菌體的 xis基因 編碼。因此位點(diǎn)特異性重組的方向性特征由 重組位點(diǎn)的特征所控制。 5’單鏈區(qū)全長(zhǎng) 7個(gè)堿基。 ? 斷裂和重新結(jié)合反應(yīng)與 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I催化的反應(yīng)機(jī)制相類似,不同的是相互連接的兩條鏈不是來自于同一雙螺旋,而是來自于不同的雙螺旋 。 ? 在整合反應(yīng)中,互補(bǔ)的 單鏈末端交互雜和 ,連接 并完成整合過程。 λ噬菌體 DNA的整合機(jī)制 ? λDNA的整合涉及到 attB 和 attP的 核心序列DNA鏈的割裂和重接。 ? 整合和切除反應(yīng)所需要識(shí)別的序列對(duì)不相同 。 ? Int和 IHF可以在體外進(jìn)行位點(diǎn)特異性重組。 ? 其中 O 序列是 attB 和 attP 所共有的,序列完全一致,稱核心序列 ( core sequence) .是位點(diǎn)特異性重組發(fā)生的地方。 ? 整合和切除均通過細(xì)菌 DNA 和 λDNA上 特定位點(diǎn) — 附著點(diǎn)( attachment site, att)之間的重組 而實(shí)現(xiàn)。 第四節(jié) 位點(diǎn)特異性重組 ? 位點(diǎn)特異性重組發(fā)生在 特殊序列對(duì) 之間,這一重組型式最早是在 λ噬菌體的遺傳學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的。 ? RuvAB蛋白復(fù)合體可以使支鏈以 10~ 20 bp的速度遷移。 三、 Ruv蛋白和 Holliday連接體的拆分 ? 大腸桿菌有一組由
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