植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的組成、儀器設(shè)備及基本操作(精要)(文件)
【正文】 。 （六）有機(jī)附加物： 椰子汁： 用量為 100～ 200g/L。 抗生素：常用青霉素、鏈霉素、慶大霉素等，用量在 5～ 20mg/L。 適用于木本植物的培養(yǎng)。5H2O MgSO42H2O 鹽酸硫銨等 CoCl25H2O MgSO42H2O 2,4－ D － CoCl27H2O 185 蔗糖 50 KH2PO4 400 pH (NH4)2SO4 463 煙酸 KI 鹽酸吡哆醇 H3BO3 甘氨酸 MnSO4 玻璃器皿用前清洗干凈。 （ 2） MS培養(yǎng)基母液的配制： MS培養(yǎng)基母液根據(jù)試劑特性通常配成四種母液，即 大量元素母液 （ 10或 20倍）、 微量元素母液 （ 100或 1000倍）、 Fe鹽 （ 100倍）、 有機(jī)物 （ 100倍）。 通常激素母液濃度生長素類為 ~ mg/ml, 細(xì)胞分裂素母液濃度為 ~ mg/ml. 四、培養(yǎng)基的配制： 1. 量取母液：營養(yǎng)元素和激素。 2. 稱量蔗糖、瓊脂，放入 600ml左右蒸餾水的鍋內(nèi)，電路上加熱，使瓊脂溶化。 五、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）： 加熱 ： 滅菌前檢查滅菌鍋內(nèi)水量是否充足，然后將培養(yǎng)基放于滅菌鍋內(nèi)，改好蓋，關(guān)閉放氣閥，打開電源，加熱升溫。 出鍋： 當(dāng)滅菌鍋?zhàn)匀焕鋮s后，取出培養(yǎng)基，放置于接種室備用。然后關(guān)閉放氣閥，促使壓力繼續(xù)上升。 ? 封口：用 4－ 6層稱量紙或瓶蓋封口，之后滅菌備用。 3. 加入母液，混合均勻，調(diào)整 pH值。 （ 3）激素母液的配制： 根據(jù)各種激素的使用濃度配制適宜的母液，用萬分之一天平稱取激素，溶劑溶解后加水定容。 水利用蒸餾水或去離子水。7H2O 三、培養(yǎng)基母液及激素母液的配制： 由于培養(yǎng)基中元素用量少，種類多，因此每次稱量繁瑣，因此通常將各種營養(yǎng)成分配制成母液保存。2H2O 166 FeSO44H2O 10 鹽酸吡哆醇 ZnSO47H2O CaCl24H2O 鹽酸吡哆醇 ZnSO47H2O CaCl2 適用于多數(shù)營養(yǎng)需求量較大的植物。 蘋果汁、番茄汁等。 （五）瓊脂： 瓊脂作為固化劑用于組織培養(yǎng)中，起支持植物的作用，不提供營養(yǎng)，為海藻中提取的一種高分子化合物，僅溶于熱水（ 90 oC以上），成為凝膠，冷卻后（ 40 oC以下）即凝固為凝膠。組織培養(yǎng)中較少使用，主要用于種質(zhì)資源的離體保存 。 如 TDZ， CPPU， 4－ PU等。 常用的有 NAA、 IAA、 IBA、 2,4－ D等。 （三）植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)： 植物激素是植物代謝中產(chǎn)生的天然化合物，它能直接影響植物細(xì)胞的分化、分裂以及影響植物的形態(tài)建成、開花、結(jié)實(shí)、成熟、衰老脫落、休眠、萌發(fā)等生理活動(dòng)。 常用的氨基酸：甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、絲氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。
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