分子生物學講座(8)(文件)
【正文】 蛋白質工程則是在基因工程基礎上綜合蛋白質化學、蛋白質晶體學、計算機學輔助設計等知識和技術發(fā)展起來的研究新領域，開創(chuàng)了按人類意愿設計和研制人類需要的蛋白質的新時期，被稱為第二代基因工程。分子生物學研究過程中發(fā)現(xiàn)的酶，許多都用作工具。最常見的是甲基化酶 ,能使細胞自身核酸特定的序列上堿基甲基化 ,從而避免受內切酶水解 ,外來核酸沒有這種特異的甲基化修飾 ,就會被細胞的核酸酶所水解 .這樣細胞就構成了限制 修飾體系。 例如：從流感嗜血桿菌 d 株（ Haemophilus influenzae d） 中先后分離到 3種限制酶 ， 則分別命名為 HindⅠ 、HindⅡ 和 HindⅢ 。 II類限制性核酸內切酶：只由一條肽鏈構成，僅需 Mg2+，切割 DNA特異性最強，且就在識別位點范圍內切斷 DNA。不同限制性核酸內切酶識別和切割的特異性不同。 影響酶切反應的因素 1）鹽濃度 2） pH值 3）甘油比例 4） DNA純度 5） DNA甲基化 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。如：Mbo I和 Sau3A I（ 5`?GATC? 3`） ? 來源不同，識別切割的序列也不同，但產(chǎn)生相同的粘性末端，稱為同尾酶。通常在重組 DNA技術提到的限制性核酸內切酶主要指 Ⅱ 類酶而言。 這類酶的作用需要 Mg2+， S腺苷甲硫氨酸及 ATP。這就是限制性核酸內切酶名稱中“限制”二字概念的由來。 一、工具酶種類 限制性內切酶：
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