《細(xì)胞工程final》ppt課件(文件)
【正文】 ohler將產(chǎn)生抗體 的淋巴細(xì)胞同腫瘤細(xì)胞融合，成功建立了單克隆抗 體技術(shù)，而獲得 1984年諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎(jiǎng)。 細(xì)胞核移植與動(dòng)物克隆 48 細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的目的 細(xì)胞核移植與動(dòng)物克隆 ?細(xì)胞核遺傳全能性研究 ?異種細(xì)胞核質(zhì)之間的遺傳相互關(guān)系 ?體細(xì)胞是否具有全能性？ ?如果把體細(xì)胞核移植到另一個(gè)去核的卵子會(huì)怎樣？ Hans Spemann （ 18691941） 49 Robert Briggs (A。也許在發(fā)育的過程中， DNA以某種方法重新編排了，細(xì)胞越過了某個(gè)點(diǎn)失去了全能性。 51 細(xì)胞核移植與動(dòng)物克隆 異種細(xì)胞核質(zhì)互作 異種核移植（ interspecies nuclear transfer） ?突破了物種之間的生殖隔離限制 ?研究供體核在異種動(dòng)物胞質(zhì)內(nèi)的重塑和再程序化過程以及異種核移植胚胎的發(fā)育潛力，以期闡述核質(zhì)相互作用規(guī)律、細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化、細(xì)胞核發(fā)育程序重編和細(xì)胞核基因表達(dá)等 異種核移植是指把一種動(dòng)物的細(xì)胞核移植到另一種動(dòng)物的去核卵母細(xì)胞中，以使供體細(xì)胞獲得重新編程和開始發(fā)育的過程。 利用乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞克隆出綿羊多利 。 61 直接轉(zhuǎn)移法 ?注射針向細(xì)胞內(nèi)注射染色體懸液 ?染色體與細(xì)胞共培養(yǎng)，胞吞作用攝取 ?染色體與高濃度 CaCl2混勻滴加到受體細(xì)胞 ?脂質(zhì)體包裹染色體，再經(jīng) PEG與受體細(xì)胞融合 供體細(xì)胞 —秋水仙素處理 —低溫處理 —細(xì)胞破碎 —高速離心 —收集染色體 染色體工程 動(dòng)物細(xì)胞的染色體工程 62 應(yīng)用前景 尋找新基因：如 腫瘤抑制基因 哺乳動(dòng)物人工染色體研究 如：人工染色體 21ΔpqHAC 表觀遺傳學(xué)研究 染色體工程 動(dòng)物細(xì)胞的染色體工程 63 染色體工程 — 植物細(xì)胞的染色體工程 ?染色體的消除： ①單體植物 , 2n=41 ②缺對(duì)植物 , 2n=40 ?染色體的添加： ①同種染色體的添加 , 2n+1,2n+2 ②異種染色體的添加 ?染色體的替代：用同種或異種染色體來替代 某特定染色體的技術(shù) 小麥2n=42 64 1999年： “ 干細(xì)胞研究的新發(fā)現(xiàn) ” 列入十大科技進(jìn)展之首 2022年：再次入選年度十大科技進(jìn)展 2022年：列入值得關(guān)注的六大科技領(lǐng)域之一 干細(xì)胞工程 65 干細(xì)胞（ stem cell） 是具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細(xì)胞群體 這些細(xì)胞可通過 分裂 維持自身細(xì)胞的特性和大小，又可進(jìn)一步 分化 為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。 多能干細(xì)胞 67 干細(xì)胞工程 68 胚胎干細(xì)胞（ embryonic stem cell， ES） 是從早期胚胎內(nèi)分離出來，能在體外培養(yǎng)的一種高度未分化的多能干細(xì)胞。 全能干細(xì)胞 具有分化成多種細(xì)胞和組織的潛能，但卻失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。該技術(shù)稱為染色體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)，又稱為染色體 轉(zhuǎn)導(dǎo) . 59 染色體工程 動(dòng)物細(xì)胞的染色體工程 微細(xì)胞介導(dǎo)的染色體轉(zhuǎn)移技術(shù)（ MMCT） 通過 微細(xì)胞將一個(gè)細(xì)胞的部分染色體轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中 , 得到含有目的染色體的細(xì)胞克隆 , 從而最終完成目的染色體導(dǎo)入受體細(xì)胞中的過程。在 7尾克隆魚中， 6尾個(gè)體的脊椎骨數(shù)量是 2628個(gè)， 1尾是 31個(gè)。 腸道干細(xì)胞： % 克隆成功率： 2% 細(xì)胞核移植與動(dòng)物克隆 細(xì)胞核遺傳全能性研究 1970年，用青蛙腳蹼角質(zhì)化細(xì)胞進(jìn)行移核試驗(yàn)，蛙卵發(fā)育成了蝌蚪。 1921–2022). 1952年：美國費(fèi)城 Lankenau醫(yī)學(xué)研究所 Briggs和 King 開始用青蛙進(jìn)行克隆實(shí)驗(yàn) 。 單克隆抗體技術(shù)的最主要優(yōu)點(diǎn)是可以用不純的抗 原分子大量制備純一的單克隆抗體。 動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存 42 動(dòng)物細(xì)胞融合 195
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