植物基因組dna的提取和定性、定量分析報(bào)告(文件)
【正文】 平衡酚/氯仿/異戊醇再抽提除去蛋白質(zhì)或用氯仿或乙醚抽提去除殘留酚，再用無水乙醇沉淀，TE溶解后再測定。（如下圖所示）C2：濃度:OD260/OD280：表明:C2接種DNA質(zhì)量良好。【實(shí)驗(yàn)原理】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一種體外核酸擴(kuò)增系統(tǒng)，其原理類似DNA分子的天然復(fù)制過程，是將待擴(kuò)增的DNA片段與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩個(gè)寡聚核苷酸引物，經(jīng)變性、退火和延伸若干個(gè)循環(huán)后，DNA擴(kuò)增2n倍。完成以上三步為一個(gè)循環(huán)，每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，樣本中的DNA量就增加一倍，新形成的DNA鏈又成為下一輪循環(huán)的模板。二、試劑1. 10 緩沖液2. DNA 模板 1 ng/μL（以實(shí)驗(yàn)一 提取的擬南芥基因組DNA為模板）3. dNTP Mix (Takara)4．引物 P3： 5′CGG GTA CCG GTG AAT TAA GAG GAG AGA GGA GG3′P5： 5′ACT CTA GAT GAG TAA AAC AGA GGA GGG TCT CAC3′引物溶液濃度：2 μM 5. rTaq 酶 5 U/μL6. 低熔點(diǎn)瓊脂糖7. 去離子水或TE（）【7】【實(shí)驗(yàn)步驟】 1．在200 μL PCR 管內(nèi)配制20 μL 反應(yīng)體系：反應(yīng)物 體積/μLddH2O 10PCR 緩沖液 dNTP （終濃度20—200 μM） 引物1 （ μM）引物2 （ μM）模板DNA rTag 酶 Total 20 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 ② 94 ℃ 變性 30 sec。⑥ 16℃ pause反應(yīng)結(jié)束后短暫離心，置4℃ 保存?zhèn)溆?。【?shí)驗(yàn)結(jié)果】 本實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增片段長652 bp。 實(shí)驗(yàn)二的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示，有DNA條帶，約600 bp；或者無DNA條帶。用一些事情，總會(huì)看清一些人。4. 歲月是無情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。學(xué)習(xí)參考。你必須努力，當(dāng)有一天驀然回
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