【正文】 輸血科要定期向臨床各科室發(fā)送輸血信息反饋單??同時(shí)??備有反饋登記本。 對臨床科室因疾病診治需要的特殊輸血要求??應(yīng)結(jié)合實(shí)際??盡力配合。 室內(nèi)空氣、操作臺面、地面消毒??每日早晚兩次用含有效氯2000mg/L 的消毒液擦拭操作臺面、地面進(jìn)行消毒??紫外線燈每日照射一次。28. 控制輸血感染方案 積極配合市獻(xiàn)血辦施行無償獻(xiàn)血制度。 嚴(yán)格掌握輸血適應(yīng)征——避免不必要的輸血。 嚴(yán)格執(zhí)行查對制度??保證血液質(zhì)量。 做好用血計(jì)劃??庫存血量是上一年同期全月用血總量的1/4~1/8??血型按O、A、B、AB 大約3:3:3:1 比例貯血??庫存量??。 根據(jù)患者病情需要選擇適宜的成份??決不可千篇一律都輸全血??對可輸可不輸?shù)募膊?jiān)決不輸??禁止輸安慰血。 醫(yī)院定期對成份輸血工作進(jìn)行監(jiān)督檢查??對濫用全血??造成血液浪費(fèi)的行為進(jìn)行批評教育??對成份輸血做得好的科室和個(gè)人給予表彰 按山東省要求“三級醫(yī)院”成份輸血率90%??“二級醫(yī)院”成份輸血率70%。* 送血時(shí)??嚴(yán)格雙方核對制度??不合格血液退回血站。血液的發(fā)放操作規(guī)程發(fā)血者須憑臨床科提血單或病歷發(fā)血。(4)從冰箱內(nèi)取出全血和血液成份??需輕拿輕放??對光檢查上層血漿或懸液外觀??須澄明、無溶血、分界線清晰??血袋完整無污損??袋簽清楚。和取血者共同查對后??雙方簽字。(9)血液及血液成份發(fā)出后不得退回輸血科。* 記錄病人出入量??嚴(yán)密觀察尿色變化??盡早檢測血常規(guī)、尿常規(guī)及尿血紅蛋白??* 必要時(shí)??溶血反應(yīng)發(fā)生后5??7 小時(shí)測血清間接膽紅素含量。并將輸血申請單上有病人姓名、床號、聯(lián)號、抽血者的標(biāo)簽粘貼于采血試管。用于鑒定血型的紅細(xì)胞??在使用前應(yīng)用生理鹽水洗滌1—3次??以除掉附著于細(xì)胞表面的血型物質(zhì)、血漿蛋白等成份??在抗人球蛋白試驗(yàn)中??被抗體致敏的紅細(xì)胞一般至少洗滌3次??壓積紅細(xì)胞用生理鹽水稀釋??配成3—5??紅細(xì)胞懸液??2 、紅細(xì)胞血型鑒定2??1 ABO血型鑒定ABO血型鑒定必須包括??用已知抗體型特異性的試劑血清檢查紅細(xì)胞的抗原(正向定型??紅細(xì)胞定型)??以及用已知血型的紅細(xì)胞檢查血清中的抗體(反向定型??血清定型)。另外3支用于反向定型??分別注明A細(xì)胞、B細(xì)胞和O細(xì)胞??正向定型試管分別加入相應(yīng)試劑血清2清??再加待檢者5??紅細(xì)胞懸液2 滴,混勻??置室溫5min??反向定型試管中分別加入待檢者血清2滴??再加相應(yīng)5??紅細(xì)胞懸液2滴??混勻??置室溫5min??將6支試管以3000r??min??離心15s??取出試管輕輕擺動(dòng)??先用肉眼觀察紅細(xì)胞有無凝集??再用顯微鏡觀察結(jié)果??再次核對后填寫登記本及報(bào)告單或輸入計(jì)算機(jī)??試劑血清、紅細(xì)胞血型鑒定 正向定型反向定型待檢者血型抗A 抗B 抗A，BA細(xì)胞 B細(xì)胞?。霞?xì)胞－　　　— 　　　—+ 　　　—　　　　+－　　　+ 　　　　++ 　　　+ 　　　　++ + 　——　　　+ 　　 —+ 　　　—　　 ——　　　— 　　—OABAB【平板法】取潔凈平板(白磁板或玻板等)??用記號筆劃出反應(yīng)小格??于正向定型側(cè)注明抗A、抗B、抗A??B??反向定型側(cè)注明A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞。操作者必須認(rèn)真細(xì)致??嚴(yán)格查對??準(zhǔn)確報(bào)告血型結(jié)果。紅細(xì)胞上H物質(zhì)活性的強(qiáng)弱。2??3 Rh血型鑒定與臨床密切相關(guān)的主要有D、C、E、c、e抗原以及相應(yīng)的特異性抗體。pH5??5磷酸鹽緩沖液。將待檢者紅細(xì)胞及對照紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌1次(有溶血的紅細(xì)胞除外)??配成5??的紅細(xì)胞懸液?；靹??置37℃水浴箱中1h??觀察結(jié)果??若無凝集??應(yīng)查找原因?？筊h(D)陰性者??應(yīng)作間接抗人球蛋白試驗(yàn)??以免遺漏Du型。取出輕輕擺動(dòng)??觀察有無凝集??結(jié)果判讀陽性:抗D試管凝集。于抗D、陽性對照和陰性對照小格內(nèi)分別加入待檢者5??紅細(xì)胞懸液、陽性紅細(xì)胞和陰性對照紅細(xì)胞懸液各1滴??用干凈玻棒將二者充分混合??連續(xù)輕輕傾斜轉(zhuǎn)動(dòng)平板??一般在2min內(nèi)觀察結(jié)果??或按試劑說明書規(guī)定的時(shí)間觀察結(jié)果。這種抗原稱為Du??常被誤定為Rh陰性。同時(shí)作陰、陽性對照??結(jié)果均符合??而受檢紅細(xì)胞與數(shù)種抗血清的作用結(jié)果不一致??陰、陽性均有??則受檢者為Du型。(1)材料??抗M和抗N試劑血清??待檢者5??紅細(xì)胞懸液??已知M和N陰、陽性對照5??紅細(xì)胞懸液。按標(biāo)記各加待檢者、已知M陽性及陰性和N陽性及陰性5??紅細(xì)胞懸液1滴。對照??陰、陽對照正確凝集待檢者??左側(cè)凝集為M型??右側(cè)凝集為N型??兩側(cè)均凝集為MN型?？筆1也很少引起體內(nèi)溶血。(3)結(jié)果判讀??對照??P1對照凝集??P2對照不凝集待檢者??凝集為P1型??反之為P2型(罕見型例外)。Lewis抗體常見于從未接受過輸血或任何已知抗原刺激的人??因此認(rèn)為是天然產(chǎn)生的?；靹??3000r??min離心15s。待檢者??1排試管凝集??為Le(a+b)型2排試管凝集??為Le( ab+)型2排試管均凝集為Le (a+b+)型2排試管均不凝集者Le( ab)型若出現(xiàn)弱反應(yīng)??應(yīng)作間接抗人球蛋白試驗(yàn)。2??8血型物質(zhì)檢測A、B、H抗原不僅存在于人的紅細(xì)胞上??而且廣泛分布在組織及體液中??Lewis血型抗原存在亍唾液和血漿中??這些物質(zhì)稱為血型物質(zhì)??它們?yōu)槎嗵穷愐话肟乖?2)操作方法??1)唾液的留取??將自然流出的唾液5—10ml??盛入干燥清潔的容器(小燒杯、三角瓶或粗口試管等)內(nèi)??在水浴中煮沸10min(以滅活能使血型物質(zhì)不活化的唾液酶??同時(shí)也破壞常見存在于唾液中的抗A及抗B)。第1—4排的第1和第2管分別加抗A、抗B、抗H、及抗Lea血清0??1ml??從第2管開始倍量稀釋。3)唾液中血型物質(zhì)的檢測??準(zhǔn)備唾液做陽性或陰性對照。陽性對照應(yīng)該有Le( a+b)的紅細(xì)胞??陰性對照應(yīng)該有Le( ab)的紅細(xì)胞??試劑對照用生理鹽水。在相應(yīng)的試管中加入唾液1滴??在對照管中加入生理鹽水1滴。結(jié)果判讀??對照??分泌型不凝集??非分泌型凝集待檢者??不凝集為分泌型??凝集為非分泌型Lewis試驗(yàn)??對照??陽性不凝集??陰性凝集待檢者??不凝集為Lea陽性??凝集者為Lea陰性4)血型物質(zhì)效價(jià)測定:取小試管10支??依次編號?；靹蚝??置室溫(20℃)30min。(3)注意事項(xiàng)??漱口后留取唾液??以免食物殘?jiān)烊??為增加唾液分泌??待檢者可嚼蠟、石蠟?zāi)せ蛳鹌l??但不能嚼口香糖或其它含糖或蛋白質(zhì)的食品??如果當(dāng)日試驗(yàn)用??血型物質(zhì)可置4℃冰箱保存??若暫時(shí)不用??可置低溫冰箱保存??可保留其活性幾年??每次試驗(yàn)最好備有分泌型和非分泌型唾液作對照。亍次管中加入供血者血清(DS)2滴和受血者5??紅細(xì)胞懸液(PC)2滴??混勻??作交叉配合。c??如果是天然凝集素??其效價(jià)高凝集力強(qiáng)也最好不輸??以防破壞受血者的紅細(xì)胞。次側(cè)加供血者血清2滴和受血者5??紅細(xì)胞1滴。若還有反應(yīng)??用吸收抑制試驗(yàn)、吸收放散試驗(yàn)??明確抗體后輸血??若為白細(xì)胞、血小板抗體??可試輸除去白細(xì)胞、血小板的血液。(4)主管加受血者血清2滴??供血者紅細(xì)胞LISS懸液2滴。(8)置于37℃孵育15—30min??即刻離心??觀察有無凝集??記錄結(jié)果。3??3蛋白水解酶法交叉配合試驗(yàn)蛋白水解酶包括木瓜酶、菠蘿酶、無花果酶、胰蛋白酶等。置37℃水浴中3060min后??觀察結(jié)果。3??4抗人球蛋白法交叉配合試驗(yàn)(1)材料?? ??受血者與供血者血清和洗滌3次的5??紅細(xì)胞懸液。各試管加入抗人球蛋白試劑1滴。(3)注意事項(xiàng)??抗人球蛋白交叉配合試驗(yàn)用受血者血清??不用血漿?！炯訇幮浴??1??診斷試劑放置室溫或使用過久??凝集效價(jià)降低??以致誤將A2型定為O型??A2B型定為B型。??4??觀察時(shí)間不夠15min。??3??多凝集??少數(shù)人的紅細(xì)胞??可被部分正常人的血清凝集 .但又非屬配合禁忌 .可用吸收抑制試驗(yàn)或吸收放散試驗(yàn)明確血型后 .再做交叉配合 .4??紅細(xì)胞懸液過濃或形成緡錢狀。(2)一般天然抗體選用鹽水介質(zhì)配血??方法簡單??時(shí)間短。(5)冷凝集造成的假凝集??可把配血管放入37℃水浴箱3分鐘??取出立即觀察結(jié)果。(9)配血人員精力要高度集中??嚴(yán)防出現(xiàn)差錯(cuò)??配血標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)血清用完及時(shí)放入冰箱內(nèi)保存??以防細(xì)菌繁殖。按下表進(jìn)行操作??同時(shí)做兩份??一份放置37℃水浴??一份放置20℃室溫??1h后看結(jié)果。4??1完全抗體檢查法(1)材料??受檢者血清及5??紅細(xì)胞生理鹽水懸液對象(供血者或孕婦的丈夫)5??紅細(xì)胞生理鹽水懸液(2)操作方法??取小試管4支??分成2排??每排2管??分別標(biāo)明“受血者”和。(7)若獻(xiàn)血者血液造成的假凝集??可用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞三次。(3)緊急用血??來不及查血型和配血??可復(fù)查庫存“O”型血的血型??確為“O”型可不配血直接發(fā)給臨床搶救用??留有時(shí)間查清病人血型交叉配血 后繼續(xù)輸血。??6??胎盤血內(nèi)含有的華通膠、輸過右旋糖酐、試驗(yàn)時(shí)所用的器皿不潔??均易產(chǎn)生假陽性??可洗滌紅細(xì)胞后配血?！炯訇栃浴??1??室內(nèi)溫度過高、過低??樣本干燥均可影響結(jié)果??室溫低于15℃以下??又易出現(xiàn)冷凝集。??3??嚴(yán)重貧血、老人、小兒患者凝集效價(jià)較低。自身免疫性溶血性貧血者??有時(shí)血清中有非特異性抗體??則對供血者均可出現(xiàn)凝集??須參照自身對照管??若PS+DC管反應(yīng)較弱??受血者急需輸血??可以試輸。結(jié)果判讀??先看陰性、陽性對照是否符合??再看PS+DC、PC+DS管是否凝集??無凝集的可以輸用。(2)操作方法?? ??取小試管5支??分別標(biāo)明PS+DC、DS+PC、陽性、陰性及自身對照??并按下表加入反應(yīng)物。以抗Rho(D)試劑加O型Rho(D)陽性紅細(xì)胞作陽性對照。(1)操作方法??取試管4支??分別標(biāo)明主、次管和陰性、陽性對照。(10)陰性試驗(yàn)??加1滴IgG致敏的紅細(xì)胞??離心并觀察有無凝集??如果沒有凝集??重做試驗(yàn)全過程。(6)混勻??即刻離心??以3000r??min離心15s。(2)用LISS將受血者、供血者紅細(xì)胞洗滌1次。④搖動(dòng)玻片??觀察凝集結(jié)果??(2)注意事項(xiàng)??長期反復(fù)多次輸血的患者??不但交叉配合困難??且易發(fā)生輸血反應(yīng)?！静Ｆā?無離心機(jī)的情況下可采用)取玻片1塊??主測標(biāo)明PS+DC??次側(cè)標(biāo)明DS+PC。取出先用肉眼觀察??再以鏡檢判斷結(jié)果a??凡主測有凝集現(xiàn)象時(shí)不能輸用。分離受血者和供血者血清??配置5??紅細(xì)胞懸液?；旌虾??放置室溫(20℃)lh??觀察結(jié)果。第2管各加入待檢者唾液0??1ml??自第2管起作倍量稀釋??第10管為對照管。各加入5??洗滌并與抗體相對應(yīng)的紅細(xì)胞懸液1滴。對Lewis試驗(yàn)分別標(biāo)明待檢者、Lewis陽性、Lewis陰性和生理鹽水。對Lewis分泌者??使用Lea陽性和Lea陰性人的唾液。振搖試管架使之混勻??置室溫1h后??觀察結(jié)果。2)試劑血清修正液的制備??取小試管分成4排??每排5管??第1排分別標(biāo)明A1一A5??第2排B1B5??第3排H1H5??第4排Le a 1—Leb5。因此??檢測唾液中各種血型物質(zhì)??可作為判定血型的一個(gè)輔助證據(jù)。Lewis抗體在鹽水中凝集紅細(xì)胞時(shí)凝集塊易碎??取出試管不宜搖動(dòng)??以免出現(xiàn)假陰性。(3)結(jié)果判讀。(1)材料??抗Lea、抗Leb試劑血清待檢者5??紅細(xì)胞懸液已知Le( a+b)Le(ab+)的5??紅細(xì)胞懸液其它材料同ABO血型鑒定??(2)操作方法??取6支小試管排成2排??每排試管分別標(biāo)明待檢者、Lea和Leb對照??于第2排試管中分別加入抗Le a 血清和抗Leb血清各l滴。貯存的紅細(xì)胞反應(yīng)能力減弱??使紅細(xì)胞定型造成困難??所以作P血型定型時(shí),要求血樣本較新鮮。如需要時(shí)可作此項(xiàng)檢查。由于抗M和抗N血清系動(dòng)物免疫所得??因此陰性對照常顯示弱陽性反應(yīng)??如果陰性對照的結(jié)果比弱反應(yīng)強(qiáng)??則試驗(yàn)結(jié)果無效。轉(zhuǎn)動(dòng)平板數(shù)次??室溫下準(zhǔn)確放置15min后??觀察結(jié)果。3排分別標(biāo)明待檢者、陽性對照、陰性對照??每排左側(cè)標(biāo)明M??右側(cè)標(biāo)明N。2??5 MN血型鑒定免疫抗M和抗N抗體能引起早產(chǎn)、死胎、新生兒溶血病及配血不合等。(1)酶介質(zhì)凝集試驗(yàn)法??用三份來自不同個(gè)體或不同批號的抗血清重新鑒定疑為Rh陰性的受檢者紅細(xì)胞。2??4 Du型鑒定某些Rh(D)抗原很弱??對某些抗Rh(D)血清顯陽性??對另一些抗Rh(D)血清則顯陰性。2)平板法??取潔凈平板1塊??用記號筆劃出反應(yīng)小格??分別于左、中、右注明抗D、陰性對照和陽性對照。需要時(shí)??一方面動(dòng)員捐出血液??另一方面須提高警惕??以免接受不相合的血液而發(fā)生意外。傾斜試管肉眼觀察??如肉眼觀察有疑問者再作鏡檢。第3排各管分別加入待檢者紅細(xì)胞懸液、陽性對照、陰性對照紅細(xì)胞懸液各1滴。37℃水浴箱??待檢者紅細(xì)胞??陰性、陽性對照紅細(xì)胞??其它材料同ABO血型鑒定??(2)操作方法??【蛋白水解酶法】(包括菠蘿酶、木瓜酶、無花果酶、胰蛋白酶等)1)以菠蘿酶介質(zhì)法為例??取菠蘿酶1g加pH 5??5磷酸鹽緩沖液100ml??充分振搖??混勻??置37℃水浴30min??離心沉淀