【正文】 從產(chǎn)量和消費(fèi)上已成為食用菌產(chǎn)業(yè)大國(guó)，但由于受小農(nóng)生產(chǎn)方式和習(xí)慣影響，還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不是食用菌強(qiáng)國(guó)。采用杏鮑菇液體菌種進(jìn)行生產(chǎn)具有菌種流動(dòng)性好、接種后易于分散、污染幾率小、菌絲萌發(fā)快、發(fā)菌點(diǎn)多、出菇時(shí)間整齊等特點(diǎn)。營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，即發(fā)菌養(yǎng)菌階段。通過對(duì)菌球直徑的測(cè)定得出第六天菌球直徑最小，最小為 ；通過對(duì)菌球密度的測(cè)定得出第六天菌球密度最大，最大為 128 個(gè)/ml；通過對(duì)培養(yǎng)基 pH 的測(cè)定得出前七天內(nèi)較適合菌種生長(zhǎng)；通過對(duì)四種胞外酶活性的測(cè)定得出第六天酶活性均較高。也就是說，在利用液體菌種生產(chǎn)杏鮑菇的過程中，液體菌種的菌球直徑越小、密度越大、活性越強(qiáng)，則菌種的品質(zhì)越好，越有利于生產(chǎn)。對(duì)于杏鮑菇液體菌種來講，胞外酶活性越大，說明菌種的活性越強(qiáng)，接種后菌絲萌發(fā)越快 [22]。菌球溶解后多酚氧化酶被釋放出來，所以前期活性很低，后期較高。河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）1303 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values0 0圖 6 杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線Figure 6 Pleurotus eryngii polyphenol oxidase activity curve由圖 6 可知：杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線呈 S 型。至于第九天又出現(xiàn)上升趨勢(shì)，可能與半纖維素有關(guān)。在前四天內(nèi)羧甲基纖維素酶活性很低，到第五天急劇分泌，第六天達(dá)到最大，最大為 ，之后又迅速下降。在培養(yǎng)初期菌種淀粉酶分泌較少，之后在豐富的多糖誘導(dǎo)下大量分泌淀粉酶。河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）1103 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values 0 0圖 4 杏鮑菇淀粉酶活性變化曲線Figure 4 Pleurotus eryngii amylase activity curve由圖 4 可知：杏鮑菇淀粉酶活性變化曲線呈拋物線型。這可能與杏鮑菇液體菌種消耗有機(jī)氮源產(chǎn)生酸性代謝廢物有關(guān)。0204060801001201403 4 5 6 7 8 9Trianing daysFungus ball density圖 2 杏鮑菇液體菌種菌球密度變化曲線Figure 2 Pleurotus eryngii liquid bacteria bacteria density curve ball 不同培養(yǎng)時(shí)間下的液體培養(yǎng)基 pH 變化從液體菌種培養(yǎng)第三天起每天上午用精密 pH 試紙測(cè)量液體培養(yǎng)基 pH。菌球直徑越小，菌球密度越大，菌種干重越大，則液體菌種流動(dòng)性越強(qiáng)，越易分散，發(fā)菌點(diǎn)越多，萌發(fā)越快。另外有些小菌球聚合成大菌球也使菌球直徑變大。菌球直徑大小反應(yīng)了菌種分裂生長(zhǎng)能力的強(qiáng)弱。 數(shù)據(jù)處理采用 Excel 等統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，漆酶 OD 值為縱坐標(biāo)，繪制曲線。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，羧甲基纖維素酶（CMC 酶）活性O(shè)D 值為縱坐標(biāo)，繪制曲線。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，菌球密度（個(gè)）為縱坐標(biāo)，繪制曲線。且配置過程中，溶液加熱溫度不宜超過 50℃。二級(jí)菌種的制備：將一級(jí)菌種按試驗(yàn)要求接種于裝有二級(jí)培養(yǎng)基的250ml 三角瓶中，恒溫振蕩培養(yǎng)，溫度25℃、轉(zhuǎn)速120r／min。配制方法如下：將黃豆粉加水煮沸 30min 后，用 80 目的篩網(wǎng)過濾，取其濾液，加入其他成分，補(bǔ)足水分，分裝在 250ml 的三角瓶中， 121℃濕熱滅菌 30min。試管培養(yǎng)基：采用 PDA 培養(yǎng)基，馬鈴薯 200 克，葡萄糖 20 克，瓊脂 15 克，自來水 1000 毫升，自然 pH。河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）5 設(shè)備儀器電熱鼓風(fēng)干燥箱， 霉菌培養(yǎng)箱，立式電，熱壓力蒸汽滅菌器， 雙數(shù)顯汽浴恒溫振蕩器，離心機(jī)，分光光度計(jì)。據(jù)報(bào)道，把杏鮑菇的液體菌種接到固體培養(yǎng)料中，由于液體菌種具有流動(dòng)性，因而接入的菌種可流散在不同的部位萌發(fā)生長(zhǎng) [15]。 研究目的與意義杏鮑菇的栽培，是以收獲子實(shí)體為目的的，并通過市場(chǎng)渠道而獲得經(jīng)濟(jì)效益，菌種雖然不是最終目的，但是重要的中間手段。2．液體菌種生產(chǎn)技術(shù)要求較高，需要專業(yè)的技術(shù)人員管理，才能保證菌種不受污染。但對(duì)于液體菌種存在的保存期短，易失活，易污染，不便運(yùn)輸?shù)葐栴}，還未見提出有效的解決辦法。 國(guó)內(nèi)杏鮑菇液體菌種研究現(xiàn)狀我國(guó)較早從事食用菌液體深層發(fā)酵研究的是上海植物生理研究所孫美聿等人。此外，采用液體菌種的栽培袋菌齡短，出菇整齊一致，適合出口要求，在價(jià)格上占優(yōu)勢(shì)。河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）3六、操作更簡(jiǎn)便。四、成本更低。二、菌種更純。液體指的是培養(yǎng)基物理狀態(tài)，液體深層培養(yǎng)就是發(fā)酵工程技術(shù) [12]。目前，食用菌多糖已廣泛應(yīng)用于免疫性缺陷疾病、自身免疫病和腫瘤等疾病的臨床治療及醫(yī)藥領(lǐng)域的其它用途，如制備醫(yī)用透析膜、藥物緩釋劑、血漿代用品及疫苗等 [8]。鉀、磷人體必需元素在杏鮑菇子實(shí)體內(nèi)含量也相當(dāng)高。新鮮杏鮑菇粗蛋白含量為 20％，粗脂肪為 ％，粗纖維為 ％，灰分為％，礦物質(zhì)含量較高 [3]，人體中必需的微量元素鈣、鎂含量是猴頭菇鈣含量20ug/g 的 倍，姬松茸鈣含量 [4]。 杏鮑菇的作用和價(jià)值 杏鮑菇的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值杏鮑菇菌肉肥厚，質(zhì)地脆嫩，特別是菌柄組織致密、結(jié)實(shí)、乳白，可全部食用，且菌柄比菌蓋更脆滑、爽口，被稱為“平菇王” 、 “干貝菇” ，具有杏仁香味和如鮑魚的口感，適合保鮮、加工，深得人們的喜愛。 liquid spawn目 錄摘要Abstract1 前言 ..............................................................1 杏鮑菇的分類地位 .................................................1 杏鮑菇的作用和價(jià)值 ...............................................1 杏鮑菇的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值 ...............................................1杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 杏鮑菇的藥用價(jià)值 ...............................................1 杏鮑菇的經(jīng)濟(jì)價(jià)值 ...............................................2 國(guó)內(nèi)外杏鮑菇液體菌種的研究現(xiàn)狀 ...................................2 液體菌種優(yōu)勢(shì) ...................................................2 國(guó)外杏鮑菇液體菌種研究現(xiàn)狀 .....................................3 國(guó)內(nèi)杏鮑菇液體菌種研究現(xiàn)狀 .....................................3 杏鮑菇液體菌種生產(chǎn)中存在的問題 ...................................4 研究目的與意義 ...................................................42 試驗(yàn)材料與方法 ....................................................5 試驗(yàn)材料 .........................................................5 供試菌種 .......................................................5 設(shè)備儀器 .......................................................5 所需藥品 .......................................................5 實(shí)驗(yàn)用具 .......................................................5 試驗(yàn)試劑及配制 ...................................................5 測(cè)定方法 .........................................................6 菌球直徑的測(cè)定 .................................................6 菌球密度的測(cè)定 .................................................7 淀粉酶活性的測(cè)定 ...............................................7 羧甲基纖維素酶（CMC 酶）活性的測(cè)定 ..........