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正文內(nèi)容

堿性磷酸酶km值的測(cè)定(文件)

 

【正文】 Vmax?[S] V= Km + [S] 其中 Km為米氏常數(shù), Vmax為最大反應(yīng)速度, 當(dāng) V=Vmax/2時(shí),則 Km=[s]。 從加入酶液起計(jì)時(shí)至下一步 加入堿性溶液停止反應(yīng), 各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)準(zhǔn)確一致,為 15分鐘。 ?1/V=Km/ Vmax?[S] + 1/ Vmax ? 本實(shí)驗(yàn)以堿性磷酸酶為例,用 磷酸苯二鈉 為其底物,生成酚和磷酸,酚在堿性溶液中與 4一氨基安替比林作用,經(jīng)鐵氰化鉀氧化生成 紅色醌的衍生物,根據(jù)紅色的深淺可測(cè)出酶活力高低。 Km是酶的特征常數(shù),測(cè)定 Km是研究酶的一種方法 ?將米氏方程變形為雙倒數(shù)方程,以 l/ v- 1/ [s]作圖,將各點(diǎn)連線,在橫軸截距為 / km,據(jù)此
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