《核酸的組成與結(jié)構(gòu)》ppt課件(文件)
【正文】 合環(huán)超螺旋變成閉合環(huán)松弛形 DNA時，經(jīng)堿變性或熱變性使其氫鍵斷裂，但兩條鏈無法分離，結(jié)果生成兩條鏈緊密纏結(jié)的分子；坍縮 DNA具有很高的沉降常數(shù)，相對沉降常數(shù)約 （單鏈環(huán)狀 DNA的相對沉降常數(shù)大約為 ；線性單鏈 DNA的相對沉降常數(shù)為 ）。 30 31 32 （ 7）超螺旋的意義 a. 超螺旋形式是 DNA分子復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的需要： 生物體內(nèi) DNA結(jié)構(gòu)是處于動態(tài)之中，超螺旋的引入就提高了DNA的能量水平，而超螺旋程度的改變介導(dǎo)了 DNA結(jié)構(gòu)的變化，即超螺旋多余的能量可能使 DNA雙股鏈分開，或局部熔解，這種結(jié)構(gòu)上的變化對 DNA分子復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等的啟動很重要。 33 34 35 第二節(jié)、 RNA的組成與結(jié)構(gòu) 一、 RNA的組成 RNA所含的戊糖為 D核糖，堿基為 A、 C、 G、 U。 5SrRNA和 16S rRNA分別構(gòu)成大亞基和小亞基。在翻譯過程中轉(zhuǎn)運各種氨基酸至核糖體，按 mRNA的密碼順序合成蛋白質(zhì)的作用。 38 2. 真核生物 mRNA結(jié)構(gòu)的特點 （ 1） 5 ′末端有帽子結(jié)構(gòu)。 非編碼區(qū)（ untranslated region UTR）位于編碼區(qū)的兩端；5 ′非編碼區(qū)有翻譯起始信號。 ２．核酶的發(fā)現(xiàn)意義 不僅拓寬了生物催化劑的領(lǐng)域，而且對 RNA的生物學(xué)功能開創(chuàng)了一種歷史性的新認(rèn)識： RNA不僅具有儲存和傳遞遺傳信息的功能，而且還具有生物催化劑的功能，在一定程度上可以說， RNA一身兼有 DNA和蛋白質(zhì)兩大類生物大分子的功能。 八、小分子核內(nèi) RNA（ snRNA） 真核細(xì)胞核內(nèi)一組小分子 RNA，含 70~300堿基 ,序列中尿嘧啶含量較高，因此又用 U命名。 ３．還可作為 DNA復(fù)制的抑制因子，與引物 RNA互補結(jié)合抑制 DNA復(fù)制，及在轉(zhuǎn)錄水平上與 mRNA5′端互補，阻止 RNA合成轉(zhuǎn)錄。 （２）氯仿還可加速有機相與水相的分層。 （２）醋酸鈉為沉淀 DNA、 RNA的最常用鹽類。制備高質(zhì)量真核細(xì)胞 RNA的關(guān)鍵是在抽提的最初步驟就需要抑制核糖核酸酶的活性，并避免所用玻璃器皿及液體污染微量核糖核酸酸酶。 DEPC： 焦碳酸二乙酯，是一種強烈但并不徹底的RNA酶抑制劑，通過和 RNA酶中 His結(jié)合使蛋白質(zhì)變性，抑制RNA酶活性。 Rnasin： 核糖核酸酶素，是 RNA酶的一種非競爭性抑制劑 。 。 2. 敘述 RNA種類及其組成結(jié)構(gòu)。 β巰基乙醇和異硫氰酸胍能使細(xì)胞內(nèi)各種 RNA酶失活。 （３）溶液配制： 加 %DEPC37℃ 12~16h，高壓除去殘留的 DEPC。 （４）溫度：冰水。 （４）標(biāo)準(zhǔn)程序：酚 ——酚 氯仿 ——氯仿。 ５．原核生物中也有一種 mRNA干擾互補 RNA（ Mrna interfering plementary RNA， micRNA），也可與特異 mRNA結(jié)合并阻止翻譯。常與多種特異的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成小分子核內(nèi)核蛋白顆粒（ small nuclear ribonucleoprotein particle， snRNP） 48 九、反義 RNA １．堿基序列正好與有意義 mRNA互補的 RNA，又稱為調(diào)節(jié) RNA。 Symons提出“錘頭”狀二級結(jié)構(gòu)，三個螺旋區(qū)， 13（或 11）個保守核苷酸序列。 41 五、 rRNA 原核生物 真核生物 核糖體 70S 80S 小亞基 30S 40S rRNA 16S(1542個核苷酸 ) 18S（ 1874個核苷酸） 蛋白質(zhì) 21種 (占總重量的 40%) 33種（占總重量 50%） 大亞基 50S 60S rRNA 23S(2940個核苷酸 ) 28S（ 4718個核苷酸） 5S(120個核苷酸 ) (160個核苷酸 ) 5S(120個核苷酸 ) 蛋白質(zhì) 31種 (占總重量的 30%) 49種 (占總重量的 35%) １．核糖體的組成 42 ２． rRN
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