【正文】 二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) O2 血紅素與氧結合后 ， 鐵原子半徑變小 ， 就能進入卟啉環(huán)的小孔中 ， 繼而引起肽鏈位臵的變動 。 這類疾病包括 ：人紋狀體脊髓變性病、老年癡呆癥、亨丁頓舞蹈病、瘋牛病等。 PrPc α螺旋 PrPsc β折疊 正常 瘋牛病 ?瘋牛病 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 三、蛋白質的化學修飾、相互作用可改變其功能 最初基因表達的產物 —— 蛋白質，并不一定為具有生物學功能的成熟蛋白質，新生蛋白質通常還需要進行蛋白質翻譯后的化學修飾（第十八章）。 ?蛋白質的等電點 ( isoelectric point, pI) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 二、蛋白質具有膠體性質 蛋白質屬于生物大分子之一 ， 分子量可自 1萬至 100萬之間 ， 其分子的直徑可達1～ 100nm， 為膠粒范圍之內 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) ? 應用舉例 ?臨床醫(yī)學上，變性因素常被應用來消毒及滅菌。 變性的蛋白質易于沉淀 ， 有時蛋白質發(fā)生沉淀 ， 但并不變性 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 五、蛋白質呈色反應可用于溶液蛋白質測定 （一）蛋白質經水解后產生茚三酮反應 蛋白質經水解后產生的氨基酸也可發(fā)生茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 。 應用正壓或離心力使蛋白質溶液透過有一定截留分子量的超濾膜，達到濃縮蛋白質溶液的目的。 ?鹽析 (salt precipitation)是將硫酸銨 、 硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質溶液 ， 使蛋白質表面電荷被中和以及水化膜被破壞 ， 導致蛋白質沉淀 。 這種通過蛋白質在電場中泳動而達到分離各種蛋白質的技術 , 稱為 電泳 (elctrophoresis) 。 ? 雙向凝膠電泳 ，蛋白質組學研究的重要技術。 ?蛋白質分離常用的層析方法 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 五 、利用蛋白質顆粒沉降行為不同可進行超速離心分離 ?超速離心法 (ultracentrifugation)既可以用來分離純化蛋白質也可以用作測定蛋白質的分子量 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 化學法 溶解法 二硝基氟苯法（ DNP法） 肼解法 二甲基氨基萘磺酰氯法（ Dansyl氯法）還原成氨基醇法 亮氨酸氨肽酶法 細胞外氨肽酶法 羧肽酶 A法 羧肽酶 B法 羧肽酶 C法 氨基酸和肽的末端測定法 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) ?通過核酸來推演蛋白質中的氨基酸序列： 按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列 分離編碼蛋白質的基因 測定 DNA序列 排列出 mRNA序列 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 七、應用物理學、生物信息學原理可進行蛋白質空間結構測定或預測 通常采用 圓二色光譜 (circular dichroism，CD)測定溶液狀態(tài)下的蛋白質二級結構含量 。 （ 三 ） 根據蛋白質的氨基酸序列預測三維空間 結構 * 通過對已知空間結構的蛋白質進行分析 ， 找出一級結構與空間結構的關系 ， 總結出規(guī)律 ， 用于新的蛋白質空間結構的預測 。而采用聚丙烯酰胺凝膠電泳 (PAGE)可將血漿蛋白分離出 100種以上。采用醋酸纖維素膜電泳，可將血漿蛋白質分為 5個組分。 （一）圓二色光譜可估算蛋白質二級結構比例 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) X射線衍射法 (Xray diffraction)和核磁共振技術 (nuclear magic resonance, NMR)是研究蛋白質三維空間結構最準確的方法 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 因為沉降系數 S大體上和分子量成正比關系 ，故可應用超速離心法測定蛋白質分子量 ， 但對分子形狀的高度不對稱的大多數纖維狀蛋白質不適用 。 ?層析 (chromatography) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) ? 離子交換層析： 利用各蛋白質的電荷量及性質不同進行分離。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) ? SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 ，常用于蛋白質分子量的測定。 利用特異抗體識別相應的抗原蛋白 ， 并形成抗原抗體復合物的性質 ， 可從蛋白質混合溶液中分離獲得抗原蛋白 。 蛋白質被丙酮沉淀后 ， 應立即分離 。 雙縮脲反應可用來檢測蛋白質水解程度。 ?蛋白質沉淀 ?蛋白質的凝固作用 (protein coagulation) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 四 、蛋白質在紫外光譜區(qū)有特征性吸收峰 由于蛋白質分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸 ， 因此在 280nm波長處有特征性吸收峰 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 若蛋白質變性程度較輕 ， 去除變性因素后 ， 蛋白質仍可恢復或部分恢復其原有的構象和功能 ， 稱為 復性 。 ?蛋白質的變性 (denaturation) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) ? 造成變性的因素 ? 變性的本質 —— 破壞非共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白質的一級結構。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 第四節(jié) 蛋白質的理化性質 Chemical and Physical Properties of Proteins 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 一、 蛋白質具有兩性電離性質 蛋白質分子除兩端的氨基和羧基可解離外 ，氨基酸殘基側鏈中某些基團 ， 在一定的溶液 pH條件下都可解離成帶負電荷或正電荷的基團 。 正常的 PrP富含 α螺旋，稱為 PrPc。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) （二）蛋白質構象改變可導致 構象病 蛋 白 質 構 象 疾 病 （ Protein Conformational Diseases） ： 若蛋白質的折疊發(fā)生錯誤 ， 盡管其一級結構不變 ， 但蛋白質的構象發(fā)生改變 ， 仍可影響其功能 ， 嚴重時可導致疾病發(fā)生 。 氧合 Hb占總 Hb的百分數 （ 稱 百分飽和度 ） 隨 O2濃度變化而改變 。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 血紅蛋白 (hemoglobin， Hb) 血紅蛋白具有 4個亞基組成的四級結構 。 glu leu glu his 胰島素受體： 由 4個亞基組成 (α2β2) ， α亞基與 β亞基形成單體 (monomer)， 2個單體形成二聚體 (dimer)。 三、 多亞基的蛋白質具有四級結構形式 蛋白質分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用 ， 稱為 蛋白質的四級結構 。 * 分子伴侶在蛋白質分子折疊過程中二硫鍵的正確形成起了重要的作用。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 纖連蛋白分子的結構域 （三） 三級結構可含有功能各異的 結構域 在二級結構或超二級結構的基礎上，多肽鏈可形成在三級結構層次上的局部折疊區(qū)，稱為 結構域 (domain)。 目 錄 第二節(jié) 第三節(jié) 第四節(jié) 第五節(jié) 第一節(jié) 第六節(jié) 二、 多肽鏈在二級結構基礎上進一步折疊形成蛋白質三級結構 蛋白質的三級結構 (tertiary