《超臨界色譜》ppt課件(文件)
【正文】 High Performance capillary electrophoresis， HPCE），它不同于經(jīng)典的區(qū)帶電泳，有如下特點(diǎn)： （ 1） 它是在內(nèi)徑 （ 1O～ 200） μm的石英毛細(xì)管中進(jìn)行的 ，在毛細(xì)管中的散熱較好 ， 沿著管截面的溫度梯度很小 ， 因此 ， 可以提高加在毛細(xì)管兩端的電壓 ， 所加電壓可高達(dá)幾十千伏 。 （ 5） 分辨率高 ， 理論塔板數(shù)為幾十萬至幾百萬／米 。 在電場(chǎng)的影響下 ， 帶電荷的質(zhì)點(diǎn)受到的力 Fe， 等于其凈電荷 q與電場(chǎng)強(qiáng)度 E的乘積 ， 即 Fe = q E。 即摩擦阻力正比于溶液的粘度 、 質(zhì)點(diǎn)大小和其電泳速度 。表示式 ， 則 μep＝ υep／ E＝ q士／ 6πηr 電泳遷移率定義為：一種質(zhì)點(diǎn)在每單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的穩(wěn)態(tài)速度 。Kα是一個(gè)常數(shù)；其值在 1～ 1． 5之間 ， 取決于遷移質(zhì)點(diǎn)的形狀 。 由于表面帶負(fù)電 ， 因此 ， 帶負(fù)電荷的離子被表面排斥 ， 而帶正電均離子則被毛細(xì)管壁吸引 ， 如圖 20－ 1所示 在毛細(xì)管壁的陰離子 ， 與來自主體溶液中的陽離子在石英一溶液界面上形成雙電層 。 在雙電層內(nèi) ， EOF總是向雙電層內(nèi)抗衡離子方向遷移 ， 穿過雙電層的電勢(shì)下降的程度受電滲流速度所控制 。 μeo） U/Lt 式中 ， Ld是毛細(xì)管總長度； U是外加電壓 。 分離效率 n可表示為 DUn eo2)( ?? ??式中 ， D為溶質(zhì)的平均擴(kuò)散系數(shù) 。 在許多情況下 ， 電滲流速度比許多質(zhì)點(diǎn)的電泳速度要快 ， 因此 ， 在毛細(xì)管中的所有溶質(zhì)將朝一個(gè)方向遷移 ， 不管它們帶多少正電荷 ， 都將先被檢出 ， 繼之中性質(zhì)點(diǎn)被檢出 ， 最后帶負(fù)電荷的質(zhì)點(diǎn)被檢出 。待測(cè)組分從毛細(xì)管的一端引人，在電場(chǎng)作用下，由于離子遷移速度有差別，而在整個(gè)毛細(xì)管內(nèi)形成不同的樣品區(qū)帶，在毛細(xì)管的另一端放置檢測(cè)器，以便連續(xù)地檢測(cè)流過的每一個(gè)組分帶，分析信號(hào)通過檢狽 u器接收后。 203 HPCE儀器的基本結(jié)構(gòu) HPCE儀器的基本結(jié)構(gòu)如圖 20－ 3所示。 按 Gidding方程 [5]， 分辨率 R只可定義為 )/)(4/( 21???? NR式中， Δυ／ υ是兩溶質(zhì)的區(qū)帶間的相對(duì)速度差。 μeo） Zeta電勢(shì)可表示為： ξ=4πδρ/ε 式中 ， ρ是毛細(xì)管表面電荷密度； δ為雙電層厚度 。 由于熱運(yùn)動(dòng)關(guān)系 ， 離表面遠(yuǎn)的離子構(gòu)成可遷移層或擴(kuò)散層 ， 因?yàn)樵陔p電層內(nèi)離子的立體分布 ，就形成一種電勢(shì)梯度 . 當(dāng)在毛細(xì)管兩端加有電場(chǎng)時(shí)；擴(kuò)散層內(nèi)可遷移的陽離子向陰極移動(dòng) 。 石英毛細(xì)管表面含有許多硅酸基
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