《遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)》ppt課件(文件)
【正文】 真核生物 DNA聚合酶 α 具有引發(fā)酶活性 。 （ 六 ） 單鏈結(jié)合蛋白 —— 保護 DNA不被水解 ， 不回復(fù)成雙鏈 。 真核生物線性 DNA的復(fù)制泡 （ 二 ） 復(fù)制方式 θ 型復(fù)制 滾環(huán)式復(fù)制 D環(huán)復(fù)制 （ 三 ） 真核生物染色體末端 DNA的復(fù)制 基因組復(fù)制與細(xì)胞分裂 ? 有絲分裂期（ M） —— 細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)發(fā)生分裂 ? 間期 1（ G1） —— 細(xì)胞內(nèi)發(fā)生活躍的轉(zhuǎn)錄 ? 合成期（ S） —— 基因組復(fù)制 ? 間期 2（ G2） —— 第二個間隔期 復(fù)制過程中發(fā)生的變異與修復(fù) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR) Invented by K. Mullis in the 1980s (Nobel Prize) PCR反應(yīng)基本條件 —— 與體內(nèi)復(fù)制的對比 1. DNA of Interest 2. Primers 3. Taq Polymerase 4. ATP， GTP, CTP, TTP 第二節(jié) 基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 DNA mRNA Transcription Cell Polypeptide (protein) Translation Ribosome 轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的相同點 ：都在酶的催化作用下，以 DNA為模板，按堿基互補配對的原則，沿 5’ 3’方向合成與模板互補的新鏈。 DNA復(fù)制時 ， 兩條鏈都用作模板 。 5. RNA的合成依賴于 RNA聚合酶的催化作用 ， 而 DNA復(fù)制需要 DNA聚合酶 ， 兩種聚合酶系不同 。 （ σ70， σ32 ） 真核生物 RNA聚合酶 真核生物細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄的 RNA聚合酶有三類：即 RNA聚合酶I， II和 III， 它們在細(xì)胞中處于不同的部位 。 強終止子的結(jié)構(gòu) ρ 因子不依賴轉(zhuǎn)錄終止機制 轉(zhuǎn)錄的終止子 弱終止子 也存在回文序列，易形成發(fā)夾二級結(jié)構(gòu)，但其發(fā)夾結(jié)構(gòu)中的 GC含量少。 細(xì)胞內(nèi)的 RNA組分 ? 細(xì)菌細(xì)胞 RNA占細(xì)胞總重量的 6％ ? 哺乳動物細(xì)胞 RNA占細(xì)胞總重量的 1％ Coding RNA amp。 真核生物的帽子有三種類型： 0型帽子 ， 1型帽子和 2型帽子 。 ? 轉(zhuǎn)錄并不是從頭合成轉(zhuǎn)錄物，而是通過替換已經(jīng)被降解的 mRNA來維持轉(zhuǎn)錄物組，并通過開啟和關(guān)閉不同基因的表達引起轉(zhuǎn)錄物組的變化。 無乳糖誘導(dǎo)物 ， 阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合 ， 阻止 RNA聚合酶與啟動子結(jié)合 ， 結(jié)構(gòu)基因不轉(zhuǎn)錄表達 。 （增強子、啟動子、沉默子及應(yīng)答元件等） ? 反式作用元件：轉(zhuǎn)錄因子。 轉(zhuǎn)錄因子的二聚化域 1． RNA編輯 —— mRNA在轉(zhuǎn)錄后因插入 、 缺失或替換堿基而改變了 DNA模板原來的遺傳信息 ， 從而表達出不同的蛋白質(zhì) 。 一、遺傳密碼 64個三聯(lián)體 —— 3個相鄰核苷酸構(gòu)成一個三聯(lián)體密碼 3個終止密碼子 —— UAA、 UAG、 UGA不編碼氨基酸 ， 沒有對應(yīng)的tRNA 1個起始密碼子 —— AUG， 也是甲硫氨酸的密碼子 共 61個有義密碼子 。 ? 擺動假說 —— 簡并密碼子前兩個核苷酸相同，是嚴(yán)格的；第三個核苷酸是變動的。 P位點 —— 攜帶肽鏈的肽基 tRNA和起始 tRNA— 甲酰甲硫氨酸 tRNA的結(jié)合位點。 ? 額外環(huán) (extra arm)，其功能是在 tRNA的 L型三維結(jié)構(gòu)中負(fù)責(zé)連接兩個區(qū)域（ D環(huán)－反密碼子環(huán)和 Tψ C受體臂）。 ? 在細(xì)胞處于有絲分裂階段，蛋白質(zhì)合成收到抑制。 ? 翻譯后的加工修飾 ? 多肽的切割加工，如信號肽的切割 例：前胰島素原 有活性的胰島素 ? 多肽的化學(xué)修飾 ? 磷酸化 —— 常?？梢蕴岣呙傅鞍椎幕钚裕灿械拿富钚越档? ? 糖基化 —— 蛋白構(gòu)型改變，抵御蛋白酶的降解作用，提高蛋白質(zhì)的可溶性，可使蛋白質(zhì)準(zhǔn)確地進入各自的細(xì)胞器 ? 多肽的剪接 —— 切除肽，顯現(xiàn)肽 （梁棟材，1987年） 突 變 ? 外顯子： 移碼突變、同義突變，錯義突變，無義突變 ? 內(nèi)含子： 剪切位點的變異 ? 側(cè)翼區(qū)： 順式作用元件，轉(zhuǎn)錄因子 血 色 素 ? 共含有 4條鏈 – 2 alpha chains with 141 amino acids – 2 beta chains with 146 amino acids 正常血色素的肽鏈 First six amino acids CTC Valine Histidine Thre.. Leucine Glutamic acid Proline CAC Valine Histidine Thre.. Leucine Valine Proline 非正常血色素的肽鏈 First six amino acids One nucleotide has changed 鐮刀型貧血病 ? 基因突變導(dǎo)致鐮刀型貧血病 MyoD 11bp deletion disrupting the MSTN function Dw 性連鎖矮小雞生長激素受體基因編碼受體蛋白胞內(nèi)區(qū)的第 10個外顯子發(fā)生了 1775個核苷酸的缺失突變 RYR1 PSEpale, soft, and exudative C1843 to T,Arg615 to Cys. Hha1 GCG C to HgiA1 GTGCT C 遺傳信息的傳遞 中 心 法 則 思考題 ? 動物遺傳學(xué)， 76－ 77頁， 1－ 19題 ? 實驗指導(dǎo)， 9－ 11頁， 15－ 20頁（瓊脂糖電泳部分） 。 蛋白質(zhì)合成受抑制， eIF4F出現(xiàn)去磷酸化作用。 原核生物蛋白合成的起始因子 ? IF3—— 阻止 30S亞基與 50S亞基結(jié)合；促進 30S亞基與 mRNA結(jié)合 ? IF2—— 參與起始 tRNA與 30S亞基的結(jié)合 ? IF1—— 穩(wěn)定 IF3和 30S亞基的結(jié)合作用 原核生物蛋白質(zhì)合成的起始過程 1） 30S亞基與 mRNA結(jié)合 2）三元復(fù)合物進入 P位 3） 70S復(fù)合物形成，起始因子解離 真核生物蛋白質(zhì)合成的起始過程 1） 80S亞基解離，游離出 43S亞基 2） 43S前起始復(fù)合物形成 3） 43S前起始復(fù)合物與 mRNA結(jié)合 4） 43S前起始復(fù)合物由帽子結(jié)構(gòu)沿 5’非翻譯區(qū)移動， MettRNA與 AUG結(jié)合，起始因子解離，形成 40S其實復(fù)合物 5）形成 80S起始復(fù)合物 真核生物的起始過程與 tRNA結(jié)合在前，與 mRNA的結(jié)合在后。 ? Tψ C臂 ，此臂負(fù)責(zé)和核糖體上的rRNA識別結(jié)合； ? 反密碼子臂 (anticodon arm)，它負(fù)責(zé)對密碼子的識別與配對。 原核生物核糖體
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