第十二章免疫檢測原理及方法(文件)
【正文】 胞用 FITC標(biāo)記的兔抗免疫球蛋白作直接免疫熒光染色 ， 顯熒光的細(xì)胞為 SmIg+細(xì)胞 ， 即 B細(xì)胞 。這種轉(zhuǎn)化在一定的程度上代表著機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài) 。 細(xì)胞毒性 T細(xì)胞試驗一下兩種方法： (1)形態(tài)學(xué)檢查法：根據(jù)體外貼壁生長的靶細(xì)胞被CTL殺傷后失去貼壁的能力 ， 所以從貼壁細(xì)胞數(shù)目減少情況可判斷 CTL殺靶細(xì)胞的能力 。 用生物學(xué)方法測定細(xì)胞因子 ， 使用最早 ， 也最普及 。 。 ,有 RNA印跡怯 、 核酸酶保護(hù)分析 、 原位雜交和 PCR等 。 四、細(xì)胞毒性細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的檢測 第三節(jié) 細(xì)胞因子的檢測 細(xì)胞因子檢測包括生物學(xué) 、 免疫學(xué)和分子生物學(xué)測定三大類方法 。 主要有兩種方法：一是形態(tài)學(xué)檢查法 ， 即將加有 PHA培養(yǎng)淋巴細(xì)胞后涂片 、 染色 、 鏡檢以觀察形態(tài)學(xué)變化 ，計算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率；另一種是同位素標(biāo)記物摻入法 ，即當(dāng)淋巴細(xì)胞受分裂原刺激發(fā)生轉(zhuǎn)化時 ， 將具有放射性的 3HTdR(胸腺嘧啶核苷 )加到培養(yǎng)液內(nèi) ， 被 DNA的原料攝入轉(zhuǎn)化中的細(xì)胞內(nèi) ， 測定細(xì)胞內(nèi)放射性物質(zhì)的相對數(shù)量(以脈沖數(shù)表示 )， 進(jìn)而測定淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化程度 。 每個空斑表示一個抗體形成細(xì)胞 ， 空斑大小表示抗體生成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少 。 可在熒光顯微鏡下或用流式細(xì)胞儀觀察結(jié)果 。 T細(xì)胞 、 B細(xì)胞表面具有特異性抗原和多種受體 ， 據(jù)此建立了相應(yīng)的檢測方法 ， 以鑒定和計數(shù)動物外周血液和淋巴樣組織中的 T細(xì)胞 、 B細(xì)胞及其功能 。 待測抗原是動物內(nèi)的某種微量
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1