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全面組織培養(yǎng)實驗室及操作技術(文件)

2025-06-03 00:26 上一頁面

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【正文】 取下接種器械,在火焰上消毒。 第二節(jié) 植物組織培養(yǎng)所需的環(huán)境 條件及營養(yǎng)成分 一 、所需環(huán)境條件 與自然條件一樣,組織培養(yǎng)中的材料的生長要受到溫度、光照、濕度等各種物理條件,不同氣體、培養(yǎng)基的組成、 pH值和滲透壓等各種化學條件,以及外植體部位、大小、細胞密度等各種生物條件等環(huán)境條件的影響。 Arnon和 Stout( 1939)提出的確定植物必需營養(yǎng)元素的 3個標準 A、缺乏該元素,植物生育發(fā)生障礙,不能完成其生活史 B、缺乏該元素,就表現(xiàn)為專一的病癥,且這種缺素癥可以用補充改元素來預防和恢復 C、改元素在植物營養(yǎng)生理上表現(xiàn)直接的效果,而不是由于土壤的物理、化學、微生物條件的改進而產(chǎn)生的間接效果。培養(yǎng)基中常用 KH2PO4 NaH2PO4等。 微量元素 在微量元素中, 鐵 的使用最大 : ◆ 一些氧化酶的組成成分 ◆ 葉綠素形成的必要條件 ◆ 使用乙二胺四乙酸鐵( EDTAFe)鰲合物防止鐵的沉淀 硼 與蛋白質(zhì)合成、糖類運輸有著密切的關系 銅 是某些氧化酶的成分,能夠促進離體根的生長 錳 參與植物的光合、呼吸代謝 鉬 參與氮素的代謝 氯 是光合作用水光解的活化劑 微量元素的主要作用是作為 酶的輔助因子或激活劑 參與代謝的調(diào)節(jié)。 桃樹 缺銅癥狀: 新梢頂端葉片的葉尖失綠變黃,葉片出現(xiàn)褐色斑點至擴大變成深褐色,引起落葉。 十字花科植物缺鉬時葉片卷曲畸形,老葉變厚且枯焦。 活性炭 ◆ 吸附培養(yǎng)基及培養(yǎng)物分泌物中的抑制物質(zhì) ◆ 抑制外植體褐變 {氧化 } ◆ 防止玻璃苗的產(chǎn)生 ◆ 促進培養(yǎng)物生長和分化 ◆ 促進生根 缺點: ◆ 沒有選擇性 抗生素 ◆ 防止外植體內(nèi)生菌造成的污染 活性炭 1生長素類 ◆ 促進細胞伸長和分裂 ◆ 促進生根、抑制器官脫落、性別控制、延長休眠、頂端優(yōu)勢、單性結(jié)實 ◆ 誘導愈傷組織形成 ◆ 溶于 95%酒精或 ,后者的溶解效果更好 ◆ 常用的生長素: IAA(吲哆乙酸 ) NAA (奈乙酸 ) 2,4D(二氯苯氧乙酸 ) IBA(吲哆丁酸 ) 促進細胞分裂分化 1細胞分裂素類 ◆ 促進細胞分裂和分化 ◆ 誘導胚狀體和不定芽的形成 ◆ 延緩組織的衰老并增強蛋白質(zhì)的合成 ◆ 用于離體成花的調(diào)控 ◆ 溶于 — ◆ 常用的細胞分裂素: KT (激動素 ) BA(6卞基腺嘌呤 ) 2ip(異戊烯氨基嘌呤 )玉米素 1赤霉素類和脫落酸 A、赤霉素類 ◆ 組織培養(yǎng)中不常使用 ◆ 加速細胞的伸長生長 ◆ 促進細胞的分裂 ◆ 主要是 GA3 B、脫落酸 ◆ 抑制細胞分裂和伸長 ◆ 促進脫落和衰老 ◆ 促進休眠和提高抗逆能力 ◆ 培養(yǎng)基形態(tài)不同:固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 ◆ 培養(yǎng)過程不同:初代培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基 ◆ 其作用不同:誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基 ◆ 營養(yǎng)水平不同:基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基 一 、培養(yǎng)基的種類 第三節(jié) 培養(yǎng)基的配制、滅菌與保存 MS培養(yǎng)基 ◆ 無機鹽濃度高 ◆ 高含量的氮、鉀,尤其是硝酸鹽 ◆ 含有一定數(shù)量的銨鹽 ◆
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