全面組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室及操作技術(shù)(文件)
【正文】 取下接種器械，在火焰上消毒。 第二節(jié) 植物組織培養(yǎng)所需的環(huán)境 條件及營(yíng)養(yǎng)成分 一 、所需環(huán)境條件 與自然條件一樣，組織培養(yǎng)中的材料的生長(zhǎng)要受到溫度、光照、濕度等各種物理?xiàng)l件，不同氣體、培養(yǎng)基的組成、 pH值和滲透壓等各種化學(xué)條件，以及外植體部位、大小、細(xì)胞密度等各種生物條件等環(huán)境條件的影響。 Arnon和 Stout（ 1939）提出的確定植物必需營(yíng)養(yǎng)元素的 3個(gè)標(biāo)準(zhǔn) A、缺乏該元素，植物生育發(fā)生障礙，不能完成其生活史 B、缺乏該元素，就表現(xiàn)為專(zhuān)一的病癥，且這種缺素癥可以用補(bǔ)充改元素來(lái)預(yù)防和恢復(fù) C、改元素在植物營(yíng)養(yǎng)生理上表現(xiàn)直接的效果，而不是由于土壤的物理、化學(xué)、微生物條件的改進(jìn)而產(chǎn)生的間接效果。培養(yǎng)基中常用 KH2PO4 NaH2PO4等。 微量元素 在微量元素中， 鐵 的使用最大 ： ◆ 一些氧化酶的組成成分 ◆ 葉綠素形成的必要條件 ◆ 使用乙二胺四乙酸鐵（ EDTAFe）鰲合物防止鐵的沉淀 硼 與蛋白質(zhì)合成、糖類(lèi)運(yùn)輸有著密切的關(guān)系 銅 是某些氧化酶的成分，能夠促進(jìn)離體根的生長(zhǎng) 錳 參與植物的光合、呼吸代謝 鉬 參與氮素的代謝 氯 是光合作用水光解的活化劑 微量元素的主要作用是作為 酶的輔助因子或激活劑 參與代謝的調(diào)節(jié)。 桃樹(shù) 缺銅癥狀： 新梢頂端葉片的葉尖失綠變黃，葉片出現(xiàn)褐色斑點(diǎn)至擴(kuò)大變成深褐色，引起落葉。 十字花科植物缺鉬時(shí)葉片卷曲畸形，老葉變厚且枯焦。 活性炭 ◆ 吸附培養(yǎng)基及培養(yǎng)物分泌物中的抑制物質(zhì) ◆ 抑制外植體褐變 {氧化 } ◆ 防止玻璃苗的產(chǎn)生 ◆ 促進(jìn)培養(yǎng)物生長(zhǎng)和分化 ◆ 促進(jìn)生根 缺點(diǎn)： ◆ 沒(méi)有選擇性 抗生素 ◆ 防止外植體內(nèi)生菌造成的污染 活性炭 1生長(zhǎng)素類(lèi) ◆ 促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)和分裂 ◆ 促進(jìn)生根、抑制器官脫落、性別控制、延長(zhǎng)休眠、頂端優(yōu)勢(shì)、單性結(jié)實(shí) ◆ 誘導(dǎo)愈傷組織形成 ◆ 溶于 95%酒精或 ，后者的溶解效果更好 ◆ 常用的生長(zhǎng)素： IAA(吲哆乙酸 ) NAA (奈乙酸 ) 2,4D(二氯苯氧乙酸 ) IBA(吲哆丁酸 ) 促進(jìn)細(xì)胞分裂分化 1細(xì)胞分裂素類(lèi) ◆ 促進(jìn)細(xì)胞分裂和分化 ◆ 誘導(dǎo)胚狀體和不定芽的形成 ◆ 延緩組織的衰老并增強(qiáng)蛋白質(zhì)的合成 ◆ 用于離體成花的調(diào)控 ◆ 溶于 — ◆ 常用的細(xì)胞分裂素： KT (激動(dòng)素 ) BA(6卞基腺嘌呤 ) 2ip(異戊烯氨基嘌呤 )玉米素 1赤霉素類(lèi)和脫落酸 A、赤霉素類(lèi) ◆ 組織培養(yǎng)中不常使用 ◆ 加速細(xì)胞的伸長(zhǎng)生長(zhǎng) ◆ 促進(jìn)細(xì)胞的分裂 ◆ 主要是 GA3 B、脫落酸 ◆ 抑制細(xì)胞分裂和伸長(zhǎng) ◆ 促進(jìn)脫落和衰老 ◆ 促進(jìn)休眠和提高抗逆能力 ◆ 培養(yǎng)基形態(tài)不同：固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 ◆ 培養(yǎng)過(guò)程不同：初代培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基 ◆ 其作用不同：誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基 ◆ 營(yíng)養(yǎng)水平不同：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基 一 、培養(yǎng)基的種類(lèi) 第三節(jié) 培養(yǎng)基的配制、滅菌與保存 MS培養(yǎng)基 ◆ 無(wú)機(jī)鹽濃度高 ◆ 高含量的氮、鉀，尤其是硝酸鹽 ◆ 含有一定數(shù)量的銨鹽 ◆
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