植物細胞轉基因技術(文件)
【正文】 需要復雜昂貴的儀器設備。 利用此方法獲得水稻、煙草、甘藍、小麥等植物的 轉基因植株。 優(yōu)點： ?PEG法操作簡單、成本低、結果較穩(wěn)定、重復性 好、無需昂貴的基因轉化儀器，且嵌合轉化體很 少產生。 DNA ?該方法是 Pena等 1987年首創(chuàng)的 ,在用此方法進行 基因導入時 ,通常需要把原生質體或培養(yǎng)的細胞固 定在瓊脂或低熔點的瓊脂糖上 ,或用聚賴氨酸處理 使原生質體附著在玻璃平板上 ,也可以通過一固著的毛細管將原生質體吸著在管口 ,再進行操作。 缺點： ?在包裝 DNA時必須有短時間的超聲處理 ,會使相當 多的 DNA斷裂； ?所用材料必使用具有全能性的原生質體作為受體 細胞； ?轉化效率較低。 轉化體常出現(xiàn)“嵌合”現(xiàn)象，需在嚴格條件下加以選擇以淘汰未轉化細胞 DNA直接轉化法 化法 無宿主限制 ，適用于各種單、雙子葉植物，操作簡單 轉化 效率低 ，需要 專門設備 （電擊儀、顯微操作儀或基因槍），多數(shù)需要 原生質體 與愈傷組織，周期太長（電擊法） 謝謝 ！ 。 幾種植物轉基因方法比較 轉基因方法 轉化的優(yōu)點 轉化的缺點 DNA間接轉化法 農桿菌介導基因轉移 受體種類，可以在原生質體、和細胞團、組織器官或整株等多級水平上進行，方法成熟可靠，簡便易行，周期短，轉化率高； 轉化 雙子葉植物 為主。 ?脂質體法是 Dellaporta等在 1981年創(chuàng)造的 ,就是將 包含外源基因的脂質體與植物原生質體融合 ,從而 達到轉基因目的一種轉化方法。 應用 這種方法已成功的獲得大麥、柑桔、胡 椒等植物的轉基因植株。 常用的轉化細胞的化學物質有 PEG(聚乙二醇 )、 PLO(多聚鳥氨酸 )、 PVA(聚乙烯醇 )等 ,其中 PEG法應用較多 ,效果較好。 ?在自然田間進行操
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