云南紅豆杉優(yōu)良品種選育及快速繁殖科技項目申報書(文件)
【正文】 （樹皮和小枝葉），其中樹皮含量高達 %,小枝葉中含量為 %，最高的 10DABⅢ含量為 %,BⅢ的最高 含量為%，根系中出現(xiàn)紫杉醇含量為 % %和 BⅢ含量為 %的高含樣品，均已達到世界著名紫杉醇原料樹種曼地亞（雜種）紅豆杉和歐洲紅豆杉中紫杉醇和巴卡亭的高含量水平。 （ 二 ）良種篩選概述： 生 產(chǎn)上，主要以就近或就地采集插穗的方式進行人工紅豆杉的種植，紫杉醇、 10DABⅢ和 BⅢ含量的高低已成為原料基地建設(shè)關(guān)注的焦點。蘇建榮從云南十二個地州采取云南紅豆杉樣品檢測，結(jié)果表明，景東種源樹皮含 量為 %,蘭坪種源 3年生小枝紫杉醇含量為 %，從藏東南 7 六個縣取樣檢測的結(jié)果來看，這三種成分的含量并不高，紫杉醇在樹皮、三年生小枝中的含量分別為： %和 %,10DABⅢ和 BⅢ的含量為： %和%。 云南紅豆杉樹形優(yōu)美，種子成熟時紅色奪目，還可做人行道和公園綠化樹種。這種方法沒有經(jīng)過優(yōu)良品種的篩選，各株差異較大，紫杉醇、 10DABⅢ和 BⅢ含量有高有低， 其次 根系不發(fā)達，造林成活率低 。 四、實施方案 （一）技術(shù)特點及關(guān)鍵技術(shù) （ 1）收集各地云南紅豆杉自然分布區(qū)內(nèi)的各種種源，取樣進行檢測分析，云南紅豆杉分布廣，遺傳多樣性水平較高，可供選擇的面大。 （二）實施的具體內(nèi)容和技術(shù)路線 實施內(nèi)容：利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，以經(jīng)良種選育的云南紅豆杉莖葉為外植體，誘導(dǎo)愈傷組織，愈傷組織在進一步分化為小苗， 從 2－ 3年生小苗上剪取枝葉，檢測 23 年生幼苗中紫杉醇、 10DABⅢ和 BIIl，確認無變異且是高含量植株后，進行快速繁殖。 （ 2）外植體消毒處理 9 植物組織培養(yǎng)的理論研究雖已相當(dāng)深入，但它的技術(shù)環(huán)節(jié)還存在不少問題。 對植物選材、酒精濃度、升汞濃度、升汞浸泡時間等影響因素進行篩選并以愈傷組織誘導(dǎo)率、污染率、死亡率以及培養(yǎng)基顏色變化作為指標(biāo)進行評定。確定誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基。目前常用的抗褐變劑有 EDTA、植酸（ PA）、水解酪蛋白、硫代硫酸鈉、活性炭（ AC）、聚乙烯吡咯烷酮（ PVP）、抗壞血酸（ Vc）等。對 NAA的濃度進行實驗，確定其最佳濃度。 。并檢測 23年生幼苗中紫杉醇、 10DABⅢ和巴卡亭 IIl。紅豆杉愈傷組織的褐變主要是在多酚氧化酶（ PPO）的催化下發(fā)生的， PPO 是一種含銅離子 的酶，上述抗褐變劑中 PA 能 10 夠絡(luò)合銅離子，水解酪蛋白可以與酶底物競爭性結(jié)合，而 AC 可以對酶進行吸附，因此考慮此三者可能存在協(xié)同抗褐變作用，故本項目將其聯(lián)合應(yīng)用，以篩選抗褐變較好的抑制劑。 （ 4）褐變抑制劑的篩選 紅豆杉愈傷組織的褐變與材料的基因型和生理 狀態(tài)、培養(yǎng)基成分和激素配比等因素有關(guān)。對正交試驗中愈傷組織誘導(dǎo)率、污染率和死亡率的結(jié)果進行直觀分 析，確定出南方紅豆杉外植體的最佳消毒方案。因此，控制污染成了組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵技術(shù)之一。樣品陰干后進行紫杉醇、10DABⅢ和巴卡亭 IIl 的含量測定，從選取的樣品中選擇最高含量的植株（或者是紫杉醇 含量最高、或者是 10DABⅢ含量最高或者是巴卡亭 IIl 含量最高，或者是二種以上物質(zhì)含量都高的植株）作為組織培養(yǎng)材料。 （ 3）建立規(guī)?；?、優(yōu)質(zhì)化的云南紅豆杉組織培養(yǎng)基地，進行人工育苗， （ 4）開展快繁研究，為基地化、規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化種植提供組培苗木保證。 （二）該項目的研究成果既有重要的理論價值又有潛在的應(yīng)用價值。 三、本項目的先進性、創(chuàng)新性 （一）本項目所用的材料均為經(jīng)篩選的良種云南紅豆杉，在很大程度上確保了母本的遺傳優(yōu)越性。 （ 三 ）遺傳多樣性高 云南紅豆杉天然群體的 遺傳多樣性水平比較高，主要是因為云南紅豆杉壽命長，世代重疊，由于選擇壓的作用，林分中各林級在建立時保留下各自適宜的基因，因此積累較多的基因，形成較廣的遺傳基礎(chǔ)。篩 選高含量紫杉醇、 10DABⅢ和 BⅢ云南紅豆杉種源是培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)紫杉醇原料林的基礎(chǔ)。而云南省林業(yè)科學(xué)院送昆明植物研究所檢測的云南紅豆杉樣品中， 10DAB含量高達%,BⅢ含量為 %,紫杉醇含量也達到 %。該項目通過對云南紅豆杉品種選優(yōu)，再通過無性繁殖 － 組織培養(yǎng)的方式保持優(yōu)良母本植株的性狀，最后
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