【正文】 浴中加熱并不斷 用玻璃棒 攪拌 。 （ 6）待 溶液 在室溫下 冷卻后 加 5mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù) 20% KI 溶液和 1mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù) %的淀粉溶液 。 （ 2）分別 加入 10mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù) 80%的硝酸鈣溶液 ， 置 于 電爐上加熱 ， 小火煮沸 5 min。 （ 6） 將沉淀沖洗 ， 洗滌液并入容量瓶中 。 （ 9）分別 取 2mL 濾液 加入不同比色管 中并加入 DNS 試劑 ，做好標(biāo)記， 于沸水浴中加熱 5min， 冷卻 ， 加水稀釋至 25mL， 并 540nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 ， 并對(duì)照葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行分析 。 （ 4） 然后向沉淀中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) 72 %的硫酸 3mL，用玻棒攪勻后室溫下靜置 16 h，使全部纖維素溶解。 （ 8） 然后向燒杯中加入 5mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù) 20% KI 溶液和 1mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù) %淀粉液，用 代硫酸鈉滴定。 （ 1） 取 粉末 約 g (精確到 mg )。 （ 5） 以同樣操作進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn) 。 （ 2） 準(zhǔn)備被測(cè) 液體，選擇直徑 大于等于 70mm 的燒杯。 （三） 酶解研究 取 5ml適當(dāng)稀釋酶液，用一次性注射器加入配制好的 。水浴后加入 3ml DNS 顯色液，沸水浴 10min。在 50℃ 水浴震蕩培養(yǎng)箱中反應(yīng) 50h。過后用清水洗至洗出液呈中性，使用一次性注射器加入 120ml緩沖液，并分別加入 10mg酶粉，用兩層保鮮膜封口后用棉線扎緊。 三、結(jié)果與分析 （一） 纖維素含量的測(cè)定結(jié)果 將各組實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)在柱形圖中進(jìn)行比較（圖 1）。如圖 2 所示。其中衛(wèi)生紙的半纖維素含量最高，為%；而海報(bào)紙的半纖維素含量最低，為 %；其他各類廢紙的半纖維素含量約在 1%~2%之間。 （四） 碘吸附值和結(jié)晶度 根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)出的碘吸附值計(jì)算結(jié)晶度，所得結(jié)果的比較如圖 5 所示。數(shù)值比較如圖 6 所示。產(chǎn)量較低的其他四種紙類為紙箱、無碳復(fù)寫紙、報(bào)紙和衛(wèi)生紙。 四、結(jié)果討論 （一） 纖維素含量 對(duì)廢紙酶水解率的影響 紙類制品中所含的纖維素非常豐富，幾乎所含物質(zhì)的一半以上都是纖維素，被測(cè)的七種紙類的纖維素含量也幾乎都在 50%以上， 而稻殼，秸稈等材料中所含有的纖維素只達(dá)到 30— 40%，所以廢紙 非常適合做為燃料乙醇發(fā)酵的原料。在纖維素結(jié)構(gòu)中，木質(zhì)素起到了纖維素與半纖維素橋聯(lián)的作用，同樣限制了酶作用的可及表面積，所以木質(zhì)素含量越高，酶解效率越低。在實(shí)驗(yàn) 4中發(fā)現(xiàn)，紙類制品的纖維素結(jié)晶度相差不大而且數(shù)值很高。這與各類廢紙結(jié)晶度的情況正好相反，即造成了水解率差 異的增大。但從 未經(jīng)過預(yù)處理的酶解實(shí)驗(yàn) 和 經(jīng)過預(yù)處理的酶解實(shí)驗(yàn) 可以看出，水解效率最高的是 A4紙，其次是海報(bào)紙，與推測(cè)不符。溶液吸光度在 10h 后開始下降的原因可能是由于溶液中所含微生物對(duì)其中的還原糖產(chǎn)生降解作用，分解了大量的還原糖后導(dǎo)致溶液的吸光度下降。但經(jīng)過處理的材料在 10h 以后產(chǎn)物量趨于平緩，說明木質(zhì)素的減少降低了對(duì)纖維素酶的毒性，并且減少了產(chǎn)物的降解。產(chǎn)量最高的三種紙類從高到低依次是 A4 紙 ， 海報(bào)紙和稿紙。酶解產(chǎn)物的產(chǎn)量 最高的三種廢紙為 A4 紙 ， 海報(bào)紙 和 稿紙 。12(4):7～ 12. [4]Insu Park,Ilsup Kim,Kyunghee Kang, ethanol production from waste newsprint by simultaneoussac charification and fermentation using Saccharomyces cerevisiae KNU5377[J].Process ,45:487~492 [5]栗薇 ,吳正舜 .木屑纖維素酶水解條件的試驗(yàn)研究 [J].可再生能源 ,2020。(4): 21～ 23. [11]張木明 , 徐振林 , 張興秀 ,等 .預(yù)處理對(duì)稻草秸桿纖維素酶解產(chǎn)糖及纖維素木質(zhì)素含量的影響 [J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工 , 2020。76(13): 65～ 77. [16]李穩(wěn)宏 ,吳大雄 ,高新 ,等 .麥秸纖維素酶解法產(chǎn)糖預(yù)處理過程工藝條件 [J].西北大學(xué)學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版 ).1997,27(3):227~230 [17]Alvira technologies for an efficient bioethanol production process based on enzymatic hydrolysis :A review[J]. Bioresource 。39:1843–8. [21] Gaspar M, Kalman G, Reczey K. Corn fiber as a raw material for hemicelluloses and ethanol production. Process Biochem 2020。 在實(shí)驗(yàn) 期間，莊巖老師給于我極大的幫助，他以淵博的知識(shí)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目?學(xué)態(tài)度不斷地指導(dǎo)和教誨我，并且為我提供了便利的實(shí)驗(yàn)條件，我的研究和論文才得以順利的完成，此番細(xì)心照顧和耐心指導(dǎo) 深深地感染和激勵(lì)著我。 最后，感謝 和我互相幫助的同學(xué) ，沒有他們的支持和幫助，本 論文也不可能完成，在此獻(xiàn)上我最真誠的謝意。這段時(shí)間以來，莊老師不僅在學(xué)業(yè)上給我以精心指導(dǎo)，同時(shí)還在思想、生活上給我以無微不至的關(guān)懷， 并將永遠(yuǎn)激勵(lì)我在今后的學(xué)習(xí)和工作中奮勇向前， 在此謹(jǐn)向莊老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意。15:478–84. [23] Mandel M, Hontz L, Mary M, Loyd H, John N. Enzymatic hydrolysis of waste wood. Biotechnol Bioeng 1974。21(3): 816～ 822. [19] Alan EW, Basso LC, Alves DMG, Amorim HV. Fuel ethanol after 25 years. Trends Biotechnol 1999。29(1):94～ 95 [14]YE SUN, JAY J acid pretreatment of ryestraw and bermudagrass for ethanol production [J].Bioresourec Technolugy,2020。買買提 ,努爾買買提 ,吾滿江 12 參考文獻(xiàn) [1]凌慧珊 .國(guó)內(nèi)外垃圾處理技術(shù)現(xiàn)狀掃描 [J].廣東科技 ,2020。 通過 H2O2預(yù)處理脫除木質(zhì)素后 同樣在 10h后產(chǎn)物產(chǎn)量達(dá)到最大。纖維素聚合度與木質(zhì)素含量對(duì)各類廢紙的酶水解差異有較大影響，而纖維素結(jié)晶度和半纖維素含量對(duì)各類廢紙的酶水解差異影響不大。由于木質(zhì)素脫除的并不完全，所以部分曲線仍然有下降趨勢(shì)，但與未處理材料的實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比差別仍然很明顯。這說明除了木質(zhì)素含量和纖 維素的聚合度兩大因素以外還有其他的重要影響因素在影響纖維素的水解，這可能和這兩種紙所含的其他成分以及造紙工藝流程有關(guān)。所以纖維素的聚合度是影響纖維素水解的又一個(gè)主要因素，而結(jié)晶度的大小對(duì)不同紙類酶解數(shù)據(jù)的差異影響不大。但 各類廢紙間結(jié)晶度較小的差異導(dǎo)致了它們更小的水解率差異，所以 這并不是影響纖維素酶解的主要因素。 所以木質(zhì)素含量是影響纖維素水解的一個(gè)主要因素。根 據(jù) 半纖維素的測(cè)定結(jié)果 可以發(fā)現(xiàn)， 各類廢紙的半纖維素含量很低，最高只達(dá)到 %，這表明半纖維素含量對(duì)廢紙的水解率影響很低；而且 不同紙類所含的半纖維素差別并不大， 所以也不會(huì)對(duì)各類廢紙的水解率差異造成太大影響。 10h后曲線有所下降，最終趨于 平緩。 （六） 酶解數(shù)據(jù)的分析 未經(jīng)過處理的廢紙酶解過程的數(shù)據(jù) 折線圖如下（圖 7） : 10 圖 （未處理） 如圖 7 所示，各類廢紙?jiān)?10h 后酶解產(chǎn)物的產(chǎn)量達(dá)到最高，此后糖含量逐漸下降。其中結(jié)晶度最大的紙為衛(wèi)生紙，結(jié)晶度平均值達(dá)到 %，最 小的紙類為紙箱，平均值為 %。 圖 同紙類木質(zhì)素含量的比較 圖 4表明， 種廢紙的木質(zhì)素含量變化較大，變化范圍 11%35%之間。繪制柱形圖，如圖 3 所示。 其中無碳復(fù)寫紙的纖維素含量高達(dá) 70%，衛(wèi)生紙和紙箱中纖維素含量約在 60%左右，而海報(bào)、報(bào)紙和 A4 紙中纖維素含量在 50%左右。反應(yīng)期間每 10h取各三角瓶中的上清液 1ml，放入比色管，加入 3ml 新配的 DNS 試劑，沸水浴 45min 后冷卻定容，使用紫外可見分光光度 計(jì)在 450nm 波長(zhǎng)下進(jìn)行比色，記錄吸光度。實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。濾紙酶活的計(jì)算根據(jù)下式代入數(shù)據(jù)即可 ： 濾紙酶活性 FPUI/ml= 樣品體積反應(yīng)時(shí)間 酶稀釋倍數(shù)葡萄糖 ? ?? 1 0 0 0C C 葡萄糖 為葡萄糖濃度，通過上一步得到的葡萄糖標(biāo)