實體瘤組織單細胞懸液制備-wenkub
2024-10-03 09 本頁面
【正文】 抗癌藥物含量。10. 視細胞量加入l2 ml培養(yǎng)液，血球計數(shù)板計數(shù)。6. 靜置23 min，使未分散的組織塊下沉，將懸液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。2. 用Hank’s 液/PBS緩沖液洗滌三次，并剔除周圍脂肪、結(jié)締組織、血液等。2. 材料：腫瘤造模成功的大鼠3. 試劑：RPMI1640 培養(yǎng)基（含10%小牛血清），%胰酶，Hank’s液/PBS緩沖液，碘酒附：Hank’s液配方： KH2PO4 ：；NaCl：；NaHCO3：；KCl：；Glucose：； Na2HPO4H2O：；加H2O定容至 1000 ml注：Hank’s液可以高壓滅菌，4℃下保存。3. 用無菌眼科手術(shù)剪將腫瘤剪成小塊（12 mm），再用Hank’s 液/PBS緩沖液洗滌三次，轉(zhuǎn)移至50 ml 離心管中。7. 用200/300目尼龍網(wǎng)過濾懸液2次。11. 將細胞調(diào)整到5105 /ml左右，轉(zhuǎn)移至25 ml細胞培養(yǎng)瓶中，37℃下培養(yǎng)。2. B組組織按照上述步驟制成單細胞懸液，制備過程中，保留每一次的PBS洗液（12 ml），標記清楚，用于檢查含藥量。2. 每日觀察細胞生長增殖情況，待細胞貼壁密度大于90%時，可用胰酶消化，按1:5比例進行傳代到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板上，可根據(jù)需要適當調(diào)整接種比例，或者取適量消化后進行其他細胞實驗。1. 機械刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼
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