(精品課件)s1-1dna重組技術(shù)的基本工具-wenkub
2023-03-27 01:36:43 本頁面
【正文】 的遺傳特性，從而創(chuàng)造 出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn) 品。 作用部位： 原核生物很容易受到自然界中外源 DNA的入侵， 但是長期的進(jìn)化過程中，這些原核生物卻沒有因為 外源 DNA的入侵而滅絕。 （ 2） T4 DNA連接酶（來源：噬菌體） ?兩種酶的區(qū)別： （ ） E〃coli DNA連接酶（來源：大腸桿菌） （ ） 連接酶都能連接 黏性末端和 平末端， 但連接平末端之間的效率比較低。DNA連接酶是連接 兩個雙鏈 DNA片段 的末端，形成磷酸二酯鍵 ,不需要摸板。 ②能夠在宿主細(xì)胞中 自我復(fù)制，或整合到染色體 DNA 上后隨染色體 DNA復(fù)制 。 ⑤載體 DNA分子大小應(yīng)合適，以便提取和在體外進(jìn)行 操作。 如 抗生素抗性 基因、產(chǎn)物具有 顏色反應(yīng) 的基因等。 ② 利用運載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量的復(fù)制 作為運載體必須具備哪些條件？ ①具 多個限制酶切點 ，以便與外源基因連接。那么恢復(fù)它們的連接時，所用 DNA連接酶是否一樣呢？ ：只連接黏性末端 T4DNA連接酶：連接黏性末端和 平末端 DNA連接酶的分類 （來源：大腸桿菌） （來源： T4噬菌體） 效率較低 二、 “分子縫合針” — DNA連接酶 作用部位： 磷酸二酯鍵 DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的 DNA分子就形成了。 G A A T T C C T T A A G 中軸線 C T T A A G A A T T C G C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C 黏性末端 平
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