第六章檢疫性細(xì)菌病害-wenkub
2022-08-29 13:25:04 本頁(yè)面
【正文】 Citrus Yellow shoot 椰子致死黃化病 Coconut Lethal Yellowing 復(fù)習(xí)思考題 植物病原細(xì)菌檢疫檢驗(yàn)技術(shù) ? 直接檢測(cè)：直觀檢驗(yàn)和生長(zhǎng)檢驗(yàn) ? 間接檢測(cè) 活菌檢測(cè) 免疫吸附分離法 噬菌體檢驗(yàn) 非活菌檢測(cè) 血清學(xué)檢測(cè) 活菌檢測(cè) ? 分離培養(yǎng)法：營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基分離純化得到的細(xì)菌 ? 濃縮接種及離體葉檢測(cè)：提取液濃縮接種感病植物，觀測(cè)發(fā)病情況。 ? 方法：平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法和免疫吸附稀釋培養(yǎng)法 平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法簡(jiǎn)略流程如下： 常用溶入丙酮的硝酸纖維素或指甲油作包被 洗滌液使用包被緩沖液 ? 原理：噬菌體侵染細(xì)菌，裂解寄主細(xì)胞，在液體培養(yǎng)時(shí)，會(huì)使渾濁的細(xì)菌懸浮液變清，在固體平板上培養(yǎng)，則出現(xiàn)許多邊緣整齊、透明光亮的噬菌斑。 ? 原理： ? 方法：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ ELISA）、免疫熒光抗體法 ? 免疫熒光抗體法：將熒光染料（異硫氫酸熒光黃或羅丹明）與抗體以化學(xué)方法接合，再與抗體反應(yīng)，形成有熒光標(biāo)記的抗體 — 抗原復(fù)合物，在熒光顯微鏡下，可觀察到黃綠色熒光。 梨火疫病的地理分布 ?寄主： 梨火疫病菌寄主范圍很廣，能為害梨、蘋果、山楂、木旬子、李等４０多個(gè)屬 220多種植物，大部分屬薔薇科 Pomoideae亞科。 ② 葉片 :從葉緣沿葉脈擴(kuò)展，先呈水浸狀，后黑褐色。 ⑥ 傷口：初期水浸狀，后下陷，呈潰瘍斑，病健交界處產(chǎn)生龜裂紋，韌皮部紅褐色，有黏液狀菌膿。 （ 1）花枯萎：侵染開放的花引起花枯萎。 （ 2）潰瘍枯萎：是指前一季越冬潰瘍邊緣的病菌重新復(fù)活的結(jié)果。初癥是枝尖萎蔫，但萎蔫前不褪色，象拐杖狀。隨著病菌不斷深入，并侵染主干，皮層收縮，下陷，形成潰瘍斑。通常是由感病的接穗在這些砧木上發(fā)病后引起，最終成潰瘍帶而殺死樹體。 ?生物學(xué)特性： 兼性厭氧，過氧化物酶陽性，氧化酶陰性，好氣條件下利用葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，厭氧條件產(chǎn)酸緩慢。氯化鈉濃度高于 2％以上時(shí)生長(zhǎng)延緩，至 6％－ 7%時(shí)則完全抑制。除蛋白酶外，病菌不產(chǎn)任何有助于侵入寄主的酶，主要是在環(huán)境條件適宜時(shí)，通過胞間組織侵入薄壁組織的病菌產(chǎn)生胞外多糖。病菌亦通過傷口、自然孔口（氣孔、蜜腺、水孔）、花侵入寄主組織，有一定損傷的花、葉、幼果和茂盛的嫩枝最易感病。 ② 遠(yuǎn)距離傳播：主要是感病寄主繁殖材料，包括種苗、接穗、砧木、水果、被污染的運(yùn)輸工具、候鳥等。 ?檢驗(yàn)方法： ： ：梨火疫病的癥狀很典型，是鑒定的重要方法，但必須與其他癥狀相似的梨梢枯病區(qū)分開。次氮基三乙酸 ，硫酸十七烷基鈉 ， %溴麝香草酚蘭水溶液 9ml，%中性紅 ，蒸餾水 970ml， 1%放線菌酮 5ml， 1%硝酸銫水溶液 。 NA上培養(yǎng) 48小時(shí)的細(xì)菌配成 108 cells /ml的懸液，注入煙草葉片或接種于 1cm厚梨片、或針刺接種于１丈長(zhǎng)的巴黎枝條，28℃ 下培養(yǎng)，一般 10~12小時(shí)后，煙草注射區(qū)出現(xiàn)白色壞死斑。 ： 120mg/kg鏈霉素噴霧，或花期用波爾多液噴霧防治，效果很好。 玉米細(xì)菌性枯萎病 Stewart’s bacterial wilt of corn ?分布 ： 1889年紐約首先報(bào)道，現(xiàn)已 20多個(gè)國(guó)家。 ?癥狀 ：整個(gè)生育期都可危害，以開花期癥狀最明顯。果穗的菌膿可通過內(nèi)層包葉的氣孔滲出，籽粒表面沾滿細(xì)菌菌膿，病籽粒變形、皺縮和變色。 Apalnobacter stewartii (Smith) McCulloch。 Pseudobacterium stewartii (Smith) Hrasil’nikov,1949。 細(xì)菌生長(zhǎng)溫度最低溫度 8～ 9℃ ，最適溫度30℃ ，最高溫度 39℃ ，致死溫度 53℃ 10min，適宜 ～ ，最適 ～ 。越冬后現(xiàn)在早播玉米苗上取食，引起初侵染，并產(chǎn)卵發(fā)育成新一代成蟲，繼續(xù)向其它植株傳病。此外 有利于發(fā)病的條件包括土壤氮肥水平偏高，鉀肥水平偏低，高溫高濕等。 ：用專化性噬菌體，如 ZP ZP82等檢驗(yàn)。 （ 4）抗菌素溫浸法： ： ： 柑橘黃龍病 Citrus Yellow shoot ? 分布： 1939年在中國(guó)廣東發(fā)現(xiàn)該病，現(xiàn)已擴(kuò)展到亞洲和非洲 37個(gè)國(guó)家和地區(qū)，中國(guó)主要發(fā)生在廣東、廣西、福建、臺(tái)灣、海南、云南、貴州、四川、浙江、湖南、江西等省。 ? 癥狀： 典型癥狀是在濃綠的樹冠中出現(xiàn) 1－2條或多條的發(fā)黃枝梢，有兩種類型：一種是整張葉片均勻黃化 ，另一種是葉片呈黃綠相間的斑駁狀 。根據(jù)其對(duì)熱的反應(yīng)和傳病木虱的不同，分為兩個(gè)株系：在亞洲，其發(fā)病的最適溫度為 27－ 32℃ ，傳播介體為亞洲木虱（ Diaphorina citri）， 病原為柑桔黃龍病原亞洲株系 （ L. asiaticum）；
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