動(dòng)物胚胎移植技術(shù)及體外受精(1)-wenkub
2023-05-27 18:02:31 本頁(yè)面
【正文】 體狀況中上的適繁未孕個(gè)體，無(wú)生殖道疾病和難產(chǎn)病史 ? 繁殖狀況正常，有正常的發(fā)情周期 ? 母性良好：泌乳性能、護(hù)仔性能 ?供、受體的管理 ? 防疫、記錄 ? 飼養(yǎng)管理等 2）同期發(fā)情（ synchronization of eatrus） ?采用激素或類(lèi)激素的藥物處理，使這一群母畜在特定時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情和排卵 ?即將母畜的黃體期延長(zhǎng)或縮短，使母畜擺脫內(nèi)、外孕激素對(duì)卵巢的控制，在同一時(shí)間內(nèi)引起全部母畜的卵泡發(fā)育，從而達(dá)到同期發(fā)情的目的 ?延長(zhǎng)黃體期：孕激素 控制卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育和發(fā)情表現(xiàn) ?縮短黃體期：前列腺素 加速黃體退化，使卵巢提前擺脫體內(nèi)孕激素的控制 ?促進(jìn)卵泡發(fā)育、排卵：促性腺激素 3）超數(shù)排卵 ?超排 ：以各種外源性促性腺激素誘發(fā)動(dòng)物卵巢的許多卵泡發(fā)育并排出具有受精能力的卵子 ?孕母馬促性腺激素、促卵泡素、 前列腺素、促排卵類(lèi)藥物、孕激素 ?超數(shù)排卵處理的時(shí)期應(yīng)選擇在發(fā)情周期的后期，即黃體消退時(shí)期 ?個(gè)體對(duì)超排處理的反應(yīng)效果難以預(yù)測(cè) ?產(chǎn)生不良的后果：胚胎死亡 ?卵母細(xì)胞蛋白質(zhì)合成過(guò)程發(fā)生改變 ?生殖道機(jī)能產(chǎn)生影響 4）胚胎回收 ?利用沖胚液從供體的生殖道中沖洗出來(lái)，提供移植或其它胚胎工程用 ?手術(shù)法 ?非手術(shù)法 胚胎質(zhì)量評(píng)價(jià)： ?透明帶的形態(tài)和完整性 ?胚胎的發(fā)育與胚齡是否一致 ?胚胎的形態(tài)與勻稱(chēng)性，胚內(nèi)細(xì)胞大小的變化 ?細(xì)胞質(zhì)的結(jié)構(gòu)及顏色，胚內(nèi)是否出現(xiàn)空泡，細(xì)胞碎片，有無(wú)游離細(xì)胞 ?如 A級(jí)： 為優(yōu)良胚胎，形態(tài)典型，卵裂球輪廓清晰，緊密充實(shí)，大小均一，細(xì)胞質(zhì)致密，色調(diào)和分布均一 6）胚胎的保存 ?胚胎的降溫：使胚胎停止發(fā)育，延長(zhǎng)其體外生存時(shí)間 ?體外培養(yǎng)：將胚胎置于體溫條件下，在培養(yǎng)液中，使其繼續(xù)發(fā)育 ?胚胎冷凍：通過(guò)一定的處理程序，將胚胎降溫冷凍后，保存于液氮中 ?胚胎冷凍的原理 ?胚胎冷凍實(shí)際是脫水的過(guò)程， 冷凍保存的關(guān)鍵是設(shè)法減少細(xì)胞內(nèi)冰晶對(duì)胚胎的損傷 ?冷凍過(guò)程中，水分形成冰晶造成細(xì)胞機(jī)械損傷，同時(shí)，導(dǎo)致未結(jié)冰的細(xì)胞內(nèi)溶液滲透壓急劇升高，造成蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致死胎 ?常規(guī)慢速冷凍法、玻璃化冷凍保持 ?受精卵移植 ?一般供體為良種或優(yōu)良個(gè)體，而受體為生產(chǎn)性能較差的個(gè)體或品種?？赡茏鳛?Zn離子融合劑引起 PLA2的表達(dá)，或者在獲能中去除精子膜上的膽固醇 體外受精 ?體外受精是以正常體內(nèi)受精的研究為基礎(chǔ)的，盡可能給精 — 卵提供一個(gè)適宜的共培養(yǎng)體系是研究體外受精的目的 ?受精成功的標(biāo)志是看受精卵是否可發(fā)育至囊胚期階段 ?多精子受精一直是體外受精的一個(gè)難點(diǎn) 受精卵的體外培養(yǎng) 受精卵要在體外條件下培養(yǎng)發(fā)育一段時(shí)間，再移植到受體子宮內(nèi)，因此， “ 試管動(dòng)物”實(shí)際上要在體外進(jìn)行三個(gè)階段的培養(yǎng)： 第一階段 是卵子成熟培養(yǎng)和精子獲能培養(yǎng) 第二階段 是受精培養(yǎng) 第三階段 才是受精卵早期發(fā)育培養(yǎng) 存在的問(wèn)題 ?體外受精的效率有待提高 ?體外培養(yǎng)體系有待進(jìn)一步完善 ?基礎(chǔ)理論研究有待加強(qiáng) 。若分割時(shí)不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，會(huì)出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問(wèn)題 ② 胚胎分割技術(shù)也是動(dòng)物克隆的方法之一 ③ 胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會(huì)越大，移植的成功率也越低 ? 早期胚胎的體積很小，只有在顯微鏡下才能看到
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