動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)-wenkub
2023-05-27 18:01:59 本頁面
【正文】 細胞的生長 、 繁殖以及產(chǎn)物的合成都必須從環(huán)境中攝取各種營養(yǎng)物質(zhì) ， 以合成細胞物質(zhì)及在新陳代謝中起調(diào)節(jié)作用 。 PH 值 合適的 PH值是細胞生存的必要的條件之一 。解離液含蛋白酶類，無鈣、鎂離子 低速離心洗滌細胞后，將目的細胞吸移培養(yǎng)瓶培養(yǎng) 一、 動物細胞培養(yǎng)基 動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境 動物細胞的生長、繁殖和代謝等生理性質(zhì)在很大程度上受到各種環(huán)境因素的影響。 有毒物質(zhì)或病原物侵入，即抗原 侵入 抗體 2 抗體 1 于是，人們認識到要把抗體應(yīng)用于臨床診斷或是治療，必須要制備單一類型的只對某一特定抗原決定簇的抗體分子，也就是單克隆抗體。 抗原 指誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體的物質(zhì)。隨著 雜交瘤技術(shù)、蛋白質(zhì)工程 和 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 等技術(shù)的發(fā)展，抗體已逐步在疾病治療等應(yīng)用領(lǐng)域顯示出越來越廣闊的應(yīng)用前景。 問題 表 111 動物細胞培養(yǎng)的產(chǎn)物 疫苗 人 小兒麻痹癥疫苗 、 狂犬疫苗 、 風疹疫苗 、 腦炎疫苗 、 皰疹疫苗等 動物 牛病毒性腹瀉疫苗 、 牛痢疾疫苗 、 犬傳染性肝炎疫苗 、 雞痘病疫苗 、 豬霍亂疫苗 、 牛疫狂犬疫苗 、 草魚出血熱疫苗 單克隆抗體 IgG、 IgM、 IgA等 免疫調(diào)節(jié)劑 β細胞生長因子 、 干擾素 、 白細胞活化因子 、 血清胸腺因子 、白細胞介素 、 胸腺素 、 巨噬細胞毒力因子等 酶 尿激酶 、 天門冬氨酰胺酶 、 膠原酶 、 細胞色素 P、 450、 纖維蛋白溶酶原激活劑 、 胃蛋白酶 、 胰蛋白酶 、 酷氨酸脫羥酶等 激素 絨膜促性腺激素 、 促紅細胞生成素 、 促濾泡激素 、 生長激素 、促間質(zhì)細胞激素 、 促黃體激素等 補充內(nèi)容（一） 單克隆抗體 哺乳動物細胞中有一套復(fù)雜的 防御系統(tǒng) 保護自己不受 有毒物質(zhì) 和 病原物 的侵害，其中一部分防御反應(yīng)就是 淋巴細胞經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的蛋白 ， 這些蛋白可以在其他免疫系統(tǒng)蛋白的幫助下與外來物質(zhì)結(jié)合，并抵消其生物學功能。然而，許多有重要價值的蛋白質(zhì)等生物物質(zhì)，必須借助于動物細胞的培養(yǎng)來獲得，例如 病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 等，如表 111所示的是一些已實現(xiàn)工業(yè)化和正在研究開發(fā)的產(chǎn)品。 大規(guī)模的動物細胞培養(yǎng)開始于本世紀 50年代，經(jīng)過多年來的研究，人類對動物細胞培養(yǎng)技術(shù)進行了大量的研究開發(fā)，取得了很大的進展。這些特異的蛋白，就是抗體；相對于抗體，誘發(fā)產(chǎn)生抗體的外來物質(zhì)即稱為 抗原 。 抗體 由 B細胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，它能識別抗原的某一特定位點。 如前所述，抗體分子是免疫系統(tǒng)反應(yīng)的一個重要組分，因為抗體分子可以識別各種不同的外來抗原，同時可激活宿主的防衛(wèi)系統(tǒng)。 多克隆抗體 在一個血清樣品中包含了對同一抗原分子上不同抗原決定簇的多種抗體。為了使動物細胞的培養(yǎng)處于最佳狀態(tài)，了解環(huán)境因素對其影響無疑是很重要的，影響動物細胞生長、繁殖的環(huán)境因素很多，主要有溫度、 PH值、營養(yǎng)成分、溶氧、氣體環(huán)境、滲透壓以及其他因素。 動物細胞合適的 PH值一般在 ，低于 ， 嚴重時可導(dǎo)致細胞退變或死亡 。 這些營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源 、 氮源 、 氨基酸 、 無機鹽 、 微量元素 、 生長因子等 。 天然培養(yǎng)基的種類有很多 ， 包括生物性液體 （ 如血清 ） 、 組織浸出液 （ 如胚胎浸出液 ） 、 凝固劑 （ 如血漿 ） 等 。 最廣泛使用的血清是什么動物血清？它有何營養(yǎng)成分？ 血漿 組織浸出液 血清 組織細胞培養(yǎng)中最常用的天然培養(yǎng)基是血清 ， 這是因為血清中含有包括大分子的蛋白質(zhì)和核酸等豐富的營養(yǎng)物質(zhì) ， 對促進細胞生長繁殖 、 粘附及中和某些物質(zhì)的毒性起著一定的作用 。 一般使用的是禽類血漿 。 合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質(zhì)對細胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件的模擬，經(jīng)過反復(fù)實驗篩選、強化和重新組合后形成的培養(yǎng)基。 合成培養(yǎng)基中一般都有哪些營養(yǎng)成分？ 問題 常用的合成培養(yǎng)基 目前合成培養(yǎng)基的種類已有數(shù)十種，大多數(shù)培養(yǎng)基都是為適應(yīng)某種組織細胞的生長而在某種合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來的。 表 114，表 115是微生物細胞與動物細胞性質(zhì)和培養(yǎng)方法的比較。 在貼壁培養(yǎng)過程中，貼壁依賴性細胞需要附著 在帶適量正電荷或半固體的表面上 ，原來是圓形的細胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展開來，然后開始有絲分裂，并很快進入對數(shù)生長期。 固定化培養(yǎng) 固定化培養(yǎng)是既適用于貼壁依賴性細胞 ， 又適用于非貼壁依賴性細胞的包埋培養(yǎng)方式 ， 具有 細胞生長密度高 、 抗剪切力 和 抗污染能力強 等 優(yōu)點 。 根據(jù) 生物反應(yīng)器的不同用途 ， 有 懸浮培養(yǎng)用 、 貼壁培養(yǎng)用 、 包埋培養(yǎng)用生物反應(yīng)器 等 ， 其 種類大致上有 塑料增殖器 、 填充床
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