動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)-wenkub
2023-05-27 18:01:59 本頁(yè)面
【正文】 細(xì)胞的生長(zhǎng) 、 繁殖以及產(chǎn)物的合成都必須從環(huán)境中攝取各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ， 以合成細(xì)胞物質(zhì)及在新陳代謝中起調(diào)節(jié)作用 。 PH 值 合適的 PH值是細(xì)胞生存的必要的條件之一 。解離液含蛋白酶類，無(wú)鈣、鎂離子 低速離心洗滌細(xì)胞后，將目的細(xì)胞吸移培養(yǎng)瓶培養(yǎng) 一、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境 動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)、繁殖和代謝等生理性質(zhì)在很大程度上受到各種環(huán)境因素的影響。 有毒物質(zhì)或病原物侵入，即抗原 侵入 抗體 2 抗體 1 于是，人們認(rèn)識(shí)到要把抗體應(yīng)用于臨床診斷或是治療，必須要制備單一類型的只對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體分子，也就是單克隆抗體。 抗原 指誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體的物質(zhì)。隨著 雜交瘤技術(shù)、蛋白質(zhì)工程 和 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 等技術(shù)的發(fā)展，抗體已逐步在疾病治療等應(yīng)用領(lǐng)域顯示出越來(lái)越廣闊的應(yīng)用前景。 問(wèn)題 表 111 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的產(chǎn)物 疫苗 人 小兒麻痹癥疫苗 、 狂犬疫苗 、 風(fēng)疹疫苗 、 腦炎疫苗 、 皰疹疫苗等 動(dòng)物 牛病毒性腹瀉疫苗 、 牛痢疾疫苗 、 犬傳染性肝炎疫苗 、 雞痘病疫苗 、 豬霍亂疫苗 、 牛疫狂犬疫苗 、 草魚出血熱疫苗 單克隆抗體 IgG、 IgM、 IgA等 免疫調(diào)節(jié)劑 β細(xì)胞生長(zhǎng)因子 、 干擾素 、 白細(xì)胞活化因子 、 血清胸腺因子 、白細(xì)胞介素 、 胸腺素 、 巨噬細(xì)胞毒力因子等 酶 尿激酶 、 天門冬氨酰胺酶 、 膠原酶 、 細(xì)胞色素 P、 450、 纖維蛋白溶酶原激活劑 、 胃蛋白酶 、 胰蛋白酶 、 酷氨酸脫羥酶等 激素 絨膜促性腺激素 、 促紅細(xì)胞生成素 、 促濾泡激素 、 生長(zhǎng)激素 、促間質(zhì)細(xì)胞激素 、 促黃體激素等 補(bǔ)充內(nèi)容（一） 單克隆抗體 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中有一套復(fù)雜的 防御系統(tǒng) 保護(hù)自己不受 有毒物質(zhì) 和 病原物 的侵害，其中一部分防御反應(yīng)就是 淋巴細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的蛋白 ， 這些蛋白可以在其他免疫系統(tǒng)蛋白的幫助下與外來(lái)物質(zhì)結(jié)合，并抵消其生物學(xué)功能。然而，許多有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)等生物物質(zhì)，必須借助于動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)來(lái)獲得，例如 病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 等，如表 111所示的是一些已實(shí)現(xiàn)工業(yè)化和正在研究開發(fā)的產(chǎn)品。 大規(guī)模的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)開始于本世紀(jì) 50年代，經(jīng)過(guò)多年來(lái)的研究，人類對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行了大量的研究開發(fā)，取得了很大的進(jìn)展。這些特異的蛋白，就是抗體；相對(duì)于抗體，誘發(fā)產(chǎn)生抗體的外來(lái)物質(zhì)即稱為 抗原 。 抗體 由 B細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，它能識(shí)別抗原的某一特定位點(diǎn)。 如前所述，抗體分子是免疫系統(tǒng)反應(yīng)的一個(gè)重要組分，因?yàn)榭贵w分子可以識(shí)別各種不同的外來(lái)抗原，同時(shí)可激活宿主的防衛(wèi)系統(tǒng)。 多克隆抗體 在一個(gè)血清樣品中包含了對(duì)同一抗原分子上不同抗原決定簇的多種抗體。為了使動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)處于最佳狀態(tài)，了解環(huán)境因素對(duì)其影響無(wú)疑是很重要的，影響動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖的環(huán)境因素很多，主要有溫度、 PH值、營(yíng)養(yǎng)成分、溶氧、氣體環(huán)境、滲透壓以及其他因素。 動(dòng)物細(xì)胞合適的 PH值一般在 ，低于 ， 嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致細(xì)胞退變或死亡 。 這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源 、 氮源 、 氨基酸 、 無(wú)機(jī)鹽 、 微量元素 、 生長(zhǎng)因子等 。 天然培養(yǎng)基的種類有很多 ， 包括生物性液體 （ 如血清 ） 、 組織浸出液 （ 如胚胎浸出液 ） 、 凝固劑 （ 如血漿 ） 等 。 最廣泛使用的血清是什么動(dòng)物血清？它有何營(yíng)養(yǎng)成分？ 血漿 組織浸出液 血清 組織細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的天然培養(yǎng)基是血清 ， 這是因?yàn)檠逯泻邪ù蠓肿拥牡鞍踪|(zhì)和核酸等豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ， 對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖 、 粘附及中和某些物質(zhì)的毒性起著一定的作用 。 一般使用的是禽類血漿 。 合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件的模擬，經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)篩選、強(qiáng)化和重新組合后形成的培養(yǎng)基。 合成培養(yǎng)基中一般都有哪些營(yíng)養(yǎng)成分？ 問(wèn)題 常用的合成培養(yǎng)基 目前合成培養(yǎng)基的種類已有數(shù)十種，大多數(shù)培養(yǎng)基都是為適應(yīng)某種組織細(xì)胞的生長(zhǎng)而在某種合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來(lái)的。 表 114，表 115是微生物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞性質(zhì)和培養(yǎng)方法的比較。 在貼壁培養(yǎng)過(guò)程中，貼壁依賴性細(xì)胞需要附著 在帶適量正電荷或半固體的表面上 ，原來(lái)是圓形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展開來(lái)，然后開始有絲分裂，并很快進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。 固定化培養(yǎng) 固定化培養(yǎng)是既適用于貼壁依賴性細(xì)胞 ， 又適用于非貼壁依賴性細(xì)胞的包埋培養(yǎng)方式 ， 具有 細(xì)胞生長(zhǎng)密度高 、 抗剪切力 和 抗污染能力強(qiáng) 等 優(yōu)點(diǎn) 。 根據(jù) 生物反應(yīng)器的不同用途 ， 有 懸浮培養(yǎng)用 、 貼壁培養(yǎng)用 、 包埋培養(yǎng)用生物反應(yīng)器 等 ， 其 種類大致上有 塑料增殖器 、 填充床
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