熒光標(biāo)記蛋白的發(fā)展-wenkub
2023-05-18 18:45:38 本頁面
【正文】 ay, May 28, 2022 如左圖所示，當(dāng)體內(nèi)物質(zhì)融合了熒光蛋白后會發(fā)出熒光，用顯微鏡、熒光計、熒光激活細胞分選儀等就可以看見，若在靠近體表處且光源強烈則肉眼可視。LOGO 熒光標(biāo)記蛋白的發(fā)展 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 工商管理 0901 李佳佳 Saturday, May 28, 2022 熒光標(biāo)記蛋白技術(shù)實際上是也是一種標(biāo)記技術(shù)。 例如，要研究細胞內(nèi)某蛋白質(zhì)的游走狀態(tài)，則用熒光蛋白標(biāo)記后，其所處位置清晰可見。受到 Ca2+或紫外線激活時 , 水母中的發(fā)光蛋白 Aequorin 被激活 , 產(chǎn)生藍光 , GFP 能夠吸收藍光 ( 395nm 處有最大光吸收 ) , 發(fā)射綠色 ( 或黃綠色 ) 熒光 Saturday, May 28, 2022 2， GFP發(fā)光原理 GFP控制光的部位是其自身的一部分，僅由氨基酸構(gòu)建而成，該部位含有一段三個氨基酸組成的特殊序列：絲氨酸－酪氨酸－甘氨酸（有時絲氨酸會被相似的蘇氨酸取代）。這種保護對于發(fā)射熒光是必需的。其熒光機制是自身含有的 , 綠色熒光的發(fā)射僅需分子氧的存在 , 而 無需其他外源輔因子 ② GFP 的表達 無種屬特異性 。 ④ 對細胞內(nèi) GFP 的 檢測非常簡單 , 用顯微鏡、熒光計、熒光激活細胞分選儀等就可實現(xiàn) 4， GFP目前存在的 不足 ( 1) 檢測靈敏度還有待提高 , 而且其熒光信號強度方面的非線性性質(zhì)使得定量非常困難。 Saturd
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