光學(xué)分析法與元素分析法(1)-wenkub
2023-05-11 13:55:23 本頁(yè)面
【正文】 ? 一、儀器測(cè)量條件 ? 由于光源不穩(wěn)定性、讀數(shù)不準(zhǔn)等帶來(lái)的誤差。產(chǎn)生交流信號(hào)。 自動(dòng)記錄，快速全波段掃描。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。發(fā)射 185～ 400nm的連續(xù)光譜。 ? 與波長(zhǎng)有關(guān) ， 因此 ，? 常以 ??表示 。 ?胡羅卜素 咖啡因 阿斯匹林 丙酮 幾種有機(jī)化合物的分子吸收光譜圖 。 ?Ev次之： eV。 ? UVVis涉及分子外層電子的能級(jí)躍遷；光譜區(qū)在 160~780nm. ? UVVis主要用于分子的定量分析，但紫外光譜(UV)為四大波譜之一，是鑒定許多化合物，尤其是有機(jī)化合物的重要定性工具之一。 紫外 可見(jiàn)吸收光譜原理 一 、 分子吸收光譜的形成 過(guò)程：運(yùn)動(dòng)的分子外層電子 吸收外來(lái)輻射 產(chǎn)生電子能級(jí)躍遷 分子吸收譜 。 ?Er最?。? eV ? 可見(jiàn)，電子能級(jí)間隔比振動(dòng)能級(jí)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)間隔大1~2個(gè)數(shù)量級(jí)，在發(fā)生電子能級(jí)躍遷時(shí)，伴有振 轉(zhuǎn)能級(jí)的躍遷，形成所謂的 帶狀光譜 。 吸收光譜的測(cè)量 LambertBeer 定律 當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí) ， 待測(cè)溶液的吸光度 A與其濃度和液層 厚度成正比 ， 即 k 為比例系數(shù) ， 與溶液性質(zhì) 、 溫度和入射波長(zhǎng)有關(guān) 。 k b cA ?abcA ?bcA ??紫外 可見(jiàn)光度計(jì)儀器組成 一、基本組成 general process 二、分光光度計(jì)的類(lèi)型 types of spectrometer 儀器 紫外 可見(jiàn)分光光度計(jì) 一、基本組成 general process 光源 單色器 樣品室 檢測(cè)器 顯示 1. 光源 在整個(gè)紫外光區(qū)或可見(jiàn)光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的使用壽命。 將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出任 一波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。在 紫外區(qū)須采用石英池 ， 可見(jiàn)區(qū)一般用玻璃池。可消除光源不穩(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。無(wú)需參比池。當(dāng)分析高濃度的樣品時(shí)，誤差更大。 3. 溶液酸度：配位數(shù)和水解等與 pH 有關(guān) 。 目前，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)已成為全世界歷史最悠久、使用最多、覆蓋面最廣的常規(guī)分析儀器。 用波長(zhǎng)位置判斷有機(jī)化合物的生色基團(tuán) 例如，若發(fā)現(xiàn)在 210250nm有強(qiáng)吸收峰，則可能有雙鍵并處在共扼狀態(tài)。 雙波長(zhǎng)或三波長(zhǎng)核酸（ DNA、 RNA）的測(cè)定時(shí)，根據(jù) A260 / A280的比值可確定 DNA或 RNA的純度。二硫化碳在紫外區(qū)的 318nm處有一個(gè)很強(qiáng)的吸收峰。 4. 多組分定量方法 由于吸光度具有加合性 ， 因此可以在同一試樣中測(cè)定多個(gè)組份 。 yyxxyxyyxxyxlclcAlclcA222111????????????????四、固體樣品的分析 固體樣品分析的配件主要有：積分球、鏡面反射裝置、固體樣品支架、凝膠掃描裝置及凝膠薄膜支架等。 積分球、鏡面反射裝置是利用光的反射原理進(jìn)行定性、定量測(cè)定。還可以利用光的干涉原理測(cè)定膜的厚度。 定性或定量分析 。在一般的有機(jī)物和生物化學(xué)物質(zhì)方面包括 100多類(lèi)物質(zhì)分析，例如，腺嘌呤、氨茴酸、芳香多環(huán)碳?xì)浠衔?、半光氨酸、胍、吲哚、萘酚、蛋白質(zhì)、水楊酸及尿酸等；在醫(yī)藥試劑分析方面，有 50多類(lèi)可用熒光方法進(jìn)行
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