【正文】 ，為什么必須使用鏡頭油？鏡檢標本時，為什么先用低倍鏡觀察，而不直接用高倍鏡或油鏡觀察？實驗二 培養(yǎng)基的配制一、實驗?zāi)康?1. 學習制備培養(yǎng)基的基本技術(shù)。 示范片：大腸桿菌（桿狀）、小球菌（球狀）、硫酸鹽還原菌（弧形）、枯草芽孢桿菌、放線菌、顫藻、魚腥藻或念珠藻等。降低聚光器，避免聚光器與物鏡相碰?？蓮膫?cè)面注視，小心地轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器將油鏡重新浸在香柏油中，但不能讓油鏡壓在標本上，更不能用力過猛，擊碎玻片，損壞鏡頭。 圖113 轉(zhuǎn)換物鏡中、高倍鏡觀察：依次用中、高倍鏡觀察低倍鏡下鎖定的部位，并隨著物鏡放大倍數(shù)的增加，逐步提升聚光器增強光線亮度。圖111 轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋 圖110 用壓片夾固定載玻片標本 圖19 將載玻片標本置于載物臺中央然后，一邊看目鏡內(nèi)的視野，一邊調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋緩慢升高鏡頭，至視野內(nèi)出現(xiàn)物像時，改用細調(diào)螺旋（圖112），繼續(xù)調(diào)節(jié)焦距和照明，以獲得清晰的物像，并將所需部位移到視野中央，再換中、高倍鏡觀察（圖113）。將低倍鏡旋轉(zhuǎn)到工作位置，用粗調(diào)螺旋提升鏡筒，使鏡頭距離載物臺10mm左右，降低聚光鏡的位置，完全打開虹彩光闌，一邊看目鏡，一邊調(diào)節(jié)反光鏡鏡面的角度（在正常情況下，一般用平面反光鏡；若自然光線較弱，則可用凹面反光鏡）。圖17 顯微鏡的搬動因此，在使用油鏡時需要細心調(diào)節(jié)，否則物像極易從視野中滑過而不能找到。常見物鏡（油鏡）的最高放大倍數(shù)為100倍，目鏡的最高放大倍數(shù)為15倍，因此一般顯微鏡的最高放大率是1500倍。因此，顯微鏡的放大率（V）是物鏡放大倍數(shù)（V1）和目鏡放大倍數(shù)（V2）的乘積，即：V=V1V2若用可見光作為光源（平均波長為550 nm）。普通光學顯微鏡所用的照明光源為可見光，其波長范圍為400～700nm。（12） 物鏡的鏡口角使用香柏油（）浸沒物鏡（即油鏡）；～。物鏡的性能與物鏡的數(shù)值孔徑密切相關(guān)，數(shù)值孔徑越大，物鏡的性能越好。反光鏡安裝在聚光器下方的鏡座上，可以在水平與垂直兩個方向上任意旋轉(zhuǎn)。聚光器上附有虹彩光闌（俗稱光圈），通過調(diào)整光闌孔徑的大小，可以調(diào)節(jié)進入物鏡光線的強弱（物鏡焦距、工作距離與光圈孔徑之間的關(guān)系見圖13）。圖12物鏡可分為低倍鏡（4或10）、中倍鏡（20）、高倍鏡（40～60）和油鏡（100）。在進行顯微測量時，目鏡測微尺被安裝在視野光闌上。上面一塊稱接目透鏡，下面一塊稱場鏡。 10. 目鏡 11. 物鏡 6. 壓片夾 7. 標本移動器2. 鏡臂粗調(diào)螺旋轉(zhuǎn)動一圈可使鏡筒升降約10mm。（5）載物臺：載物臺又稱鏡臺，是放置標本的地方，呈方形或圓形。（4）物鏡轉(zhuǎn)換器：它是一個用于安裝物鏡的圓盤，位于鏡筒下端，其上裝有3～5個不同放大倍數(shù)的物鏡。（3）鏡筒：它是連接接目鏡（簡稱目鏡）和接物鏡（簡稱物鏡）的金屬圓筒。二、基本原理（一）普通光學顯微鏡的構(gòu)造普通光學顯微鏡由機械系統(tǒng)和光學系統(tǒng)兩部分組成（圖11）。實驗一 光學顯微鏡的使用與微生物觀察第一節(jié) 普通光學顯微鏡的使用一、 實驗?zāi)康?了解普通光學顯微鏡的基本構(gòu)造和工作原理。機械系統(tǒng)機械系統(tǒng)包括鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、調(diào)節(jié)器等。鏡筒上端插入目鏡，下端與物鏡轉(zhuǎn)換器相接。為了使用方便，物鏡一般按由低倍到高倍的順序安裝。載物臺上裝有壓片夾，可以固定被檢標本；有標本移動器，轉(zhuǎn)動螺旋可以使標本前后和左右移動。圖11 12. 虹彩光闌（光圈）14. 反光鏡光學系統(tǒng)光學系統(tǒng)包括目鏡、物鏡、聚光器、反光鏡等。在兩塊透鏡之間或在場鏡下方有一光闌。目鏡上刻有120等放大倍數(shù)。一般油鏡上刻有“OI”（oil immersion）或HI（homogeneous immersion）字樣，有時刻有一圈紅線或黑線，以示區(qū)別。 XSPI6型顯微鏡物鏡的主要參數(shù)（3）聚光器：聚光器又稱聚光鏡，它的功能是把平行的光線聚焦于標本上，增強照明度。在觀察透明標本時，光圈宜調(diào)得相對小一些，這樣雖會降低分辨力，但可增強反差，便于看清標本。反光鏡的一面是凹面鏡，另一面是平面鏡。因為鏡口角a總是小于180?，所以sin的最大值不可能超過1?！　D15 介質(zhì)折射率對光線通路的影響分辨率分辨率是指分辨物像細微結(jié)構(gòu)的能力?？s短照明光源的波長可以降低D值，提高物鏡分辨率。放大率普通光學顯微鏡利用物鏡和目鏡兩組透鏡來放大成像，故又被稱為復式顯微鏡。圖16 普通光學顯微鏡的成像原理焦深一般將焦點所處的像面稱為焦平面。三、實驗器材 儀器 顯微鏡； 材料 ？標本片，香柏油，二甲苯，擦鏡紙。然后，調(diào)節(jié)聚光器的位置（酌予升降），直至視野內(nèi)得到均勻適宜的亮度。 圖112 轉(zhuǎn)動細調(diào)螺旋找出所需目標，將其移至視野中央。調(diào)換標本：觀察新標本片時，必須重新從第3步開始操作。使反光鏡垂直于鏡座，以防受損。二、試驗內(nèi)容和操作方法 嚴格按照光學顯微鏡操作方法，依低倍、高倍和油鏡的次序觀察桿狀、球狀、弧狀和絲狀的細菌示范片，用鉛筆分別繪出各種細菌的形態(tài)圖。2. 制備牛肉膏蛋白瓊脂培養(yǎng)基。所以培養(yǎng)基是培養(yǎng)微生物所必需的最主要材料。天然培養(yǎng)基：利用天然來源的有機物配制而成的。微生物最常用的凝固劑為瓊脂（其次為明膠），又叫洋菜、凍粉。牛肉膏蛋白培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細菌培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基中含有一般細菌生長繁殖所需要的最基本的營養(yǎng)物質(zhì)，可供作繁殖之用，制作固體培養(yǎng)基時須加2%瓊脂，培養(yǎng)細菌時，應(yīng)用稀酸或稀堿將PH調(diào)至中性或微堿性。四、實驗步驟 根據(jù)用量按比例依次稱取成分，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯，蛋白胨易吸濕，稱量時要迅速。3. 調(diào)PH 用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH調(diào)至所需范圍。2）固體分裝 分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，斜面長度不超過管長的1/2（圖1）。7. 包扎 棉塞頭上包一層牛皮紙，扎緊，即可進行滅菌。消毒是用物理或化學的方法殺死物體上絕大部分微生物(主要是病原微生物和有害微生物)。在本實驗中，介紹與培養(yǎng)基和玻璃器材滅菌有關(guān)的部份滅菌方法。、℃.15～30min可達到徹底滅菌,滅菌的溫度及維持的時間隨滅菌物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變.三、材料與儀器吸管、培養(yǎng)皿、試管、電熱干燥箱，手提試高壓蒸汽滅鍋，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、蒸餾水。2．接通電源，打開排氣孔，使箱內(nèi)濕空氣能逸出，旋動恒溫調(diào)節(jié)器，保持加熱升溫狀態(tài)，至箱內(nèi)達到100℃時關(guān)閉排氣孔。2．放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品（內(nèi)裝培養(yǎng)基或小的三角瓶），不要裝得太擠，以免妨礙汽流通影響滅菌效果，三角瓶口不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋溫包口的紙而透入棉塞。注意：當壓力不為零時，不能開蓋取物否則由于壓力突然下降，容器內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染而發(fā)生污染，甚