酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)ppt課件-wenkub
2023-03-08 15:39:58 本頁(yè)面
【正文】 pproached as substrate is increased 米氏方程的雙重性 ? 當(dāng)?shù)孜餄舛群艿偷那闆r下，即 [S]Km，米氏方程可轉(zhuǎn)變?yōu)椋? ? 這時(shí)反應(yīng)速度與底物濃度成正比，符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)； ? 當(dāng)?shù)孜餄舛群芨叩那闆r下，即 [S]Km，米氏方程可轉(zhuǎn)變?yōu)椋? ? 這時(shí)酶反應(yīng)速度接近最大值，如果繼續(xù)增加底物的濃度， v不可能繼續(xù)增加，反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)。 2) Initial velocity assumption。 ? 米氏方程成立的需要滿(mǎn)足三個(gè)條件：（ 1）反應(yīng)速度為初速度，因?yàn)榇藭r(shí)反應(yīng)速度與酶濃度呈正比關(guān)系，避免了反應(yīng)產(chǎn)物以及其它因素的干擾；（ 2）酶底物復(fù)合物處于 穩(wěn)態(tài) 即 ES濃度不發(fā)生變化；（ 3）符合質(zhì)量作用定律。 （ 4）已分離得到某些酶與底物相互作用生成 Es復(fù)合物的結(jié)晶。 ? 影響酶促反應(yīng)速率的因素 影響酶促反應(yīng)速度的主要因素包括：酶濃度、底物濃度、反應(yīng)溫度、反應(yīng)介質(zhì)的 pH和離子強(qiáng)度以及有無(wú)抑制劑的存在等。 底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響 酶和底物形成 中間物的學(xué)說(shuō) ，已得到許多實(shí)驗(yàn)證明： （ 1） ES復(fù)合物已被電子顯微鏡和 X射線晶體結(jié)構(gòu)分析直接觀察到。 （ 5）超離心沉降過(guò)程中，可觀察到酶和底物共沉降現(xiàn)象。 Leonor Michaelis (18751949) Maud Menten (18791960) 所謂 穩(wěn)態(tài) 是指反應(yīng)進(jìn)行一段時(shí)間后，系 統(tǒng)的復(fù)合物 ES濃度，由零逐漸增加到一定數(shù) 值，在一定時(shí)間內(nèi)，盡管底物濃度和產(chǎn)物濃 度不斷地變化，復(fù)合物 ES也在不斷的生成和 分解，但是當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)中 ES的生成速率和 ES 的分解速率相等時(shí)，絡(luò)合物 ES濃度保持不變 的這種反應(yīng)狀態(tài)稱(chēng)為穩(wěn)態(tài)。 3) Rate law. PEESSE ??k1 K1 k2 K2 Initial Velocity Assumption ? In the beginning of the reaction, there is very little product, or [P] is small. So the amount of [ES] contributed by E+P is negligible. ? Thus, the MM equation concerns the reaction rate that is measured during early reaction period. ? In which case, the enzyme catalyzed reaction can be modified to: ? K1 PEESSE ??k1 K1 k2 PEESSE ??k1 k2 K2 Rate Law in Enzyme Catalyzed Reactions ? Rate law still applies in enzyme catalyzed reactions. ? The forward velocity, or rate, vf is, ? The reverse velocity or rate, or the rate of disappearance vd is, ? At steady state, there is no accumulation of [ES], thus: PEESSE ??k1 K1 k2 ? ?? ?SEkv f 1?? ? ? ? ? ?ESkkESkESkv d )( 2121 ???? ??df vv ?Derivation of MichaelisMenten Equation ? We need one more condition, that is, the total enzyme concentration, [Et] is the sum of that of enzymesubstrate plex, [ES], and that of free enzyme, [E]: ? At steady state, the forward rate should equal to t
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