dna的生物合成復(fù)制-wenkub
2023-01-21 14:23:03 本頁面
【正文】 C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 親代 DNA 復(fù)制叉 子代 DNA (Basic Rules and System of DNA Replication ) 第一節(jié) 復(fù)制基本規(guī)律與體系 復(fù)制的方式 —— 半保留復(fù)制 固定起始點(diǎn) 雙向復(fù)制 半不連續(xù)復(fù)制 復(fù)制的高保真性 基本規(guī)律 一、復(fù)制的基本規(guī)律 (一 )半保留復(fù)制 DNA合成時(shí) ， 以親代 DNA解開的兩股單鏈為模板 ， 按堿基配對規(guī)律 ， 合成子代 DNA的過程 。子代 DNA， 一股單鏈來源于親代 ， 另一股單鏈為新合成 。 含重氮 DNA的細(xì)菌 培養(yǎng)于普通培養(yǎng)液 第一代 繼續(xù)培養(yǎng)于普通培養(yǎng)液 第二代 梯度離心結(jié)果 (2)子鏈繼承母鏈遺傳信息的幾種可能方式 全保留式 (混合式 ) 半保留式 按半保留復(fù)制方式 ， 子代 DNA與親代 DNA的 堿基序列一致 ， 即子代保留了親代的全部遺傳信息 ， 體現(xiàn)了遺傳的 保守性 。原核生物 (一個(gè)起始點(diǎn) )，真核生物 (多個(gè)起始點(diǎn) )。 5’ 3’ ori ori ori ori 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 復(fù)制子 3’ (四 )復(fù)制的半不連續(xù)性 3? 5? 3? 5? 解鏈方向 領(lǐng)頭鏈 (leading strand) 隨從鏈 (lagging strand) 順解鏈方向生成的子鏈，復(fù)制為連續(xù)進(jìn)行，稱為 領(lǐng)頭鏈 。 A： DNApol的外切酶活性切除錯(cuò)配堿基；并用其聚合活性摻入正確配對的底物。 a) 遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律。 (二 ) 模板 (template) 解開成單鏈的 DNA母鏈。 5180。 ? 大腸桿菌 DNA聚合酶 分類 DNA聚合酶 I DNA聚合酶 II DNA聚合酶 III 分子量 (KD) 109 120 900 聚合速率 (核苷酸 /分 ) 1 000 — 60 000 5ˊ → 3 ˊ 聚合酶活性 + + + 3ˊ → 5 ˊ 外切酶活性 + + + 5ˊ → 3 ˊ 外切酶活性 + — — 生物學(xué)功能 切除引物 延長岡崎片段 DNA損傷修復(fù) 延長子鏈 校讀作用 校讀作用 DNA損傷修復(fù) (2)原核生物的 DNA聚合酶 DNApol Ⅰ DNApol Ⅱ DNApol Ⅲ ① DNApolⅠ (109kD) 小片段 5? ? ??核酸外切酶活性 大片段 /Klenow 片段 DNA聚合酶活性 ， ?? ? 5? 核酸外切酶活性 N 端 C 端 木瓜蛋白酶 DNApol Ⅰ Klenow片段是實(shí)驗(yàn)室合成 DNA的常用工具酶。 功能： 是原核生物復(fù)制延長中真正起催化作用的酶 。 穩(wěn)定已解開的單鏈 單鏈 DNA 結(jié)合蛋白 SSB 催化 RNA 引物生成 引物酶 DnaG ( dnaG ) 運(yùn)送和協(xié)同 DnaB DnaC ( dnaC ) 解開 DNA 雙鏈 解
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