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實驗六質粒dna的制備-wenkub

2023-05-23 08:35:08 本頁面
 

【正文】 雙鏈 DNA分子,能在宿主細胞內獨立自主的進行復制。 The constructed E. coli plasmid pBR322. ? 質粒的復制和轉錄要依賴于宿主細胞編碼的某些酶和蛋白質,如離開宿主細胞則不能存活,而 宿主 即使沒有它們也可以正常存活。 嚴緊型質粒的復制受到嚴格控制,其拷貝數(shù)通常很低,每個細胞內只含有 1 個或幾個質粒分子 。 四個載體酶切圖 分離質粒 DNA方法 從大腸桿菌中分離質粒 DNA方法眾多,目前常用的有: ? 堿變性法; ? 煮沸法; ? 羥基磷灰石層析法等 各方法分離是依據(jù)宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成及結構等特點加以選擇的,其中堿變性法既經(jīng)濟且收得率較高 ,提取的質粒 DNA可用于酶切 ,連接與轉化。 ? 可將大小相差懸殊的細胞器初步分離,常需進一步通過密度梯度離心再行分離純化。
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