上海師范大學(xué)植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)-wenkub
2023-05-22 04:26:49 本頁(yè)面
【正文】 糖溶液（ 、 、 、 、 、 mol/L）各 30 mL，分別注入編好號(hào)的各培養(yǎng)皿中。這種滲透勢(shì)相等的溶液為等滲溶液。該溶液的濃度稱為等滲濃度。 – 取帶有色素的洋蔥鱗莖或紫鴨跖草下表皮，迅速分別投入各蔗糖溶液中，使其完全浸入，約5～ 10 min。MPa/mol若兩者相等，水分交換保持動(dòng)態(tài)平衡。 – 另取 7 個(gè)青霉素小瓶對(duì)應(yīng)試管編號(hào)，從對(duì)照管中分別吸 2 mL 溶液入相同編號(hào)的試驗(yàn)組小瓶中。 – 根據(jù)公式計(jì)算葉片細(xì)胞的水勢(shì) ψw = icRT ? i 為解離系數(shù)，蔗糖為 1； c 為小液滴在其中基本不動(dòng)的溶液的濃度，單位為 mol/L； R 為摩爾氣體常數(shù)，R = L 植物的元素缺乏癥 ? 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 – 實(shí)驗(yàn)儀器 ? 分析天平，培養(yǎng)缸，燒杯，移液管 – 實(shí)驗(yàn)材料 ? 玉米（或番茄、蓖麻、小麥）種子 植物的元素缺乏癥 ? 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 – 實(shí)驗(yàn)試劑 ? 按下表配制貯備液 藥品名稱 用量 /（ g?L－ 1） 藥品名稱 用量 /（ g?L－ 1） Ca(NO3)2 CaCl2 KNO3 KCl MgSO47H2O ， H2MoO4 NaNO3 MgCl2 Na2SO4 植物的元素缺乏癥 ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 材料準(zhǔn)備 ? 種子用漂白粉溶液滅菌 30 min，用無(wú)菌水沖洗數(shù)次，然后放在洗凈的石英砂中發(fā)芽，加蒸餾水，等幼苗長(zhǎng)出第一真葉時(shí)待用。 植物的元素缺乏癥 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 硝酸還原酶活性的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)原理 – 硝酸還原酶是植物氮素代謝作用中的關(guān)鍵性酶，與作物吸收和利用氮肥有關(guān)。反應(yīng)液的酸度大，則增加重氮化作用的速度，但降低偶聯(lián)作用的速度，顏色比較穩(wěn)定。 硝酸還原酶活性的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 – 實(shí)驗(yàn)儀器 ? 分光光度計(jì)，注射器，溫箱，天平，鉆孔器，三角燒瓶，移液管，燒杯，試管 – 實(shí)驗(yàn)試劑 ? mol/L 磷酸緩沖液（ ）， mol/L KNO3，磺胺試劑， α萘胺試劑， NaNO2 標(biāo)準(zhǔn)溶液 – 實(shí)驗(yàn)材料 ? 蓖麻、向日葵、油菜、小麥或棉花的葉子 硝酸還原酶活性的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 將新鮮取回的葉片水洗，用吸水紙吸干，然后用鉆孔器打葉圓片，用蒸餾水洗滌 2～ 3 次，吸干水分，于分析天平上稱取等重的葉圓片兩份。 硝酸還原酶活性的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 分別吸取反應(yīng)液 1 mL 于試管中，加入磺胺試劑 2 mL 及 α萘胺試劑 2 mL，混合搖勻，靜置 30 min，用分光光度計(jì)（ 520 nm）進(jìn)行測(cè)定，記下 OD 值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出 NO2－ 含量，再計(jì)算酶的活性。 單鹽毒害及離子拮抗 ? 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 – 實(shí)驗(yàn)儀器 ? 燒杯，紗布，石蠟 – 實(shí)驗(yàn)試劑 ? mol/L KCl， mol/L CaCl2， mol/L NaCl（所用藥品均需用分析純） – 實(shí)驗(yàn)材料 ? 小麥種子 單鹽毒害及離子拮抗 ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 實(shí)驗(yàn)前 3～ 4 天選擇飽滿的小麥種子 100 粒浸種，在室溫下萌發(fā)，待根長(zhǎng) 1 cm 時(shí)可用作材料。 單鹽毒害及離子拮抗 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 – 在單鹽溶液中小麥幼苗生長(zhǎng)受阻，特別是根部出現(xiàn)畸形。 葉綠體色素的提取分離及理化性質(zhì)的鑒定 ? 實(shí)驗(yàn)原理 – 葉綠素是一種雙羧酸的酯，可與堿發(fā)生皂化反應(yīng)，產(chǎn)生的鹽能溶于水，可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開。 葉綠體色素的提取分離及理化性質(zhì)的鑒定 ? 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 – 實(shí)驗(yàn)儀器 ? 大試管，臺(tái)天平，研缽，量筒，漏斗，橡皮塞，新華濾紙，毛細(xì)管，剪刀，分液漏斗，燒杯 – 實(shí)驗(yàn)試劑 ? 丙酮，碳酸鈣， 石英砂，無(wú)水硫酸鈉，四氯化碳，乙醚，甲醇，氫氧化鉀，鹽酸，醋酸銅 – 實(shí)驗(yàn)材料 ? 新鮮菠菜葉片 葉綠體色素的提取分離及理化性質(zhì)的鑒定 ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 葉綠體色素的提取分離 ? 稱取新鮮葉片 2 g，放入研缽中加丙酮 5 mL，少許碳酸鈣和石英砂，研磨成均漿，再加丙酮 10 mL，以漏斗過(guò)濾之，即為色素提取液。然后將濾紙條固定于軟木塞上，插入試管內(nèi)，使窄條浸入溶劑中（色素點(diǎn)要略高于液面），蓋緊軟木塞，直立于陰暗處進(jìn)行層析。然后加醋酸銅晶體少許，慢慢加熱溶液，則又產(chǎn)生鮮亮的綠色。 葉綠體色素的提取分離及理化性質(zhì)的鑒定 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 – 葉綠體色素的提取分離 ? 濾紙條自上而下的色素帶分別是 橙色的胡蘿卜素 黃色的葉黃素 藍(lán)綠色的葉綠素 a 黃綠色的葉綠素 b 葉綠體色素的提取分離及理化性質(zhì)的鑒定 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 – 葉綠體色素 的理化性質(zhì) ? 葉綠素的熒光現(xiàn)象 ? 銅代反應(yīng) ? 黃色素與綠色素的分離 葉綠體色素的吸收光譜及葉綠素 a、b含量的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)原理 – 葉綠素和類胡蘿卜素都有光學(xué)特性，表現(xiàn)出一定的吸收光譜，可用分光光度計(jì)精確測(cè)定。k a1 + C bL－ 1）， Cb為組分 b的濃度（ g 葉綠體色素的吸收光譜及葉綠素 a、b含量的測(cè)定 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 – 吸收光譜 – 葉綠素 a和 b含量計(jì)算 波長(zhǎng) /nm 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 520 540 光密度 波長(zhǎng) /nm 560 580 600 610 620 630 640 650 660 670 680 690 700 光密度 波長(zhǎng) /nm 645 663 光密度 離體葉綠體光還原反應(yīng) （希爾反應(yīng)） ? 實(shí)驗(yàn)原理 – 在低溫下以等滲溶液制備完整的葉綠體，將其懸浮于適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)介質(zhì)中，并有氧化劑如 2，6二氯酚靛酚（簡(jiǎn)稱 DCIP）存在時(shí)，在光照下會(huì)放出 O2，同時(shí)將染料還原，這就是葉綠體中進(jìn)行的光還原反應(yīng)。用 15 mL 提取介質(zhì)使葉綠體懸浮，置冰浴中備用。由于光合作用放出的 O2 在水中溶解度很小，而在細(xì)胞間積累，結(jié)果使原來(lái)下沉的葉片上浮，根據(jù)上浮所需時(shí)間長(zhǎng)短，即能比較光合作用的強(qiáng)弱。 杯號(hào) 光強(qiáng) 光質(zhì) CO2 1 強(qiáng) 白光 飽和 2 強(qiáng) 紅光 飽和 3 強(qiáng) 藍(lán)光 飽和 4 強(qiáng) 綠光 飽和 5 強(qiáng) 白光 微量 6 弱 白光 飽和 環(huán)境因素對(duì)光合作用的影響 （葉圓片上浮法） ? 實(shí)驗(yàn)步驟 – 記錄各燒杯中每一葉圓片上浮所需的時(shí)間，計(jì)算各處理中葉圓片上浮所需的平均時(shí)間或一定時(shí)間內(nèi)上浮的葉圓片數(shù)。 – 在廣口瓶中加
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