高粱木質(zhì)素突變株b743生物學(xué)特性分析-wenkub
2022-09-12 18:33:09 本頁(yè)面
【正文】 白質(zhì)含量的測(cè)定 ……… ……………………………………………………………4 種子的蛋白質(zhì)組分分析 ……………………………………………………………… 5 淀粉含量的測(cè)定 ……………………………………………………………………… 5 葉綠素含量的測(cè)定 …………… …… ………………………………………… 6 2 結(jié)果與分析 … …………………………………… …………………… ………… 6 2. 1 種子外觀 ………………………………………………………… …………… 6 形 態(tài) 指標(biāo) ………………………………………………… …………… 7 生理指標(biāo) …………………………………………………………………… 7 可溶性糖測(cè)定 ……………………… ……………………………………………… 7 蛋白質(zhì)含量測(cè)定 ……………… ………………… ………………………………… 8 蛋白質(zhì)組分分析 …………………………………………………………………… 8 淀粉含量 …………… ……………………………………………………………… 8 ………………………………………… … ……………………… 8 3 討論與結(jié)論 …………………………………………………………………… … 8 形態(tài)特征分析 ………………………………………………………………………… 8 生理特征 分析 …………… …… ………………………………………………………… 8 3 . 3 總結(jié) ……………………………………………………………………… …… 9 致謝 …………………………………………………………………………………… 10 參考文獻(xiàn) ……………………………………………………………………………… 10 英文摘要 …………………………………………… … …………………… …… …………1 1 1 高粱木質(zhì)素突變株 B743 生物學(xué)特性分析 09 生物工程（ 1）班 ：鄧?yán)? 指導(dǎo)老師：黃守程 摘要： 本試驗(yàn)初步研究了高粱木質(zhì)素突變株 B743 的部分生物學(xué)特性，重點(diǎn)考察了種子的外觀、百粒重等形態(tài)指標(biāo)，測(cè)定了 B743 種子的可溶性糖含量、淀粉含量、總蛋白含量以及種子中的清蛋白、球蛋白、醇蛋白和谷蛋白等組分的含量和比例，同時(shí)測(cè)定了幼苗株高、根長(zhǎng)、鮮重、干重、葉面積和葉綠 素含量等指標(biāo)。 高粱具有廣 泛的適應(yīng)性和較強(qiáng)的抗逆能力，無(wú)論平原肥地，還是干旱丘陵、瘠薄山區(qū)，均可種植 ，是全球農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中重要的糧食、飼料和生物質(zhì)能源作物。 目前， 在能源植物研發(fā)中 ， 降低木質(zhì) 素含量可以提高生物質(zhì)燃料的產(chǎn)量 ， 因?yàn)槟举|(zhì)素 可以 吸收了使木質(zhì)纖維素轉(zhuǎn)化為單糖的水解酶 ， 從而 導(dǎo)致 纖維素的水解效率降低 ， 并且木質(zhì)素的降解產(chǎn)物也阻止了 接下來(lái) 的乙醇發(fā)酵反應(yīng)。 1 材料與方法 材料 高粱 木質(zhì)素突變株 B743 種子 由 基礎(chǔ)生物 實(shí)驗(yàn)室提供 。 KOH 稱取 KOH用蒸餾水定容至 1000mL。L1) Ca(NO3)2 KNO3 MgSO47H2O 使用時(shí)取 Ca(NO3) KNO MgSO4將盆栽好的高粱置于不低于 15℃ 環(huán)境中，用 Hoagland 營(yíng)養(yǎng)液澆灌培養(yǎng)。 根系長(zhǎng)度的測(cè)定 根據(jù)毛善國(guó)的實(shí)驗(yàn)方法 [4]測(cè)定根系長(zhǎng)度，取長(zhǎng)勢(shì)接近的幼苗 由 基部至根的最末端為標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)量最長(zhǎng)的一段為所需數(shù)據(jù)，同樣每只盆中取 5 株分別用直尺測(cè)量并記錄數(shù)據(jù)。 地上部分重量與根重的測(cè)定 用刀片將 洗滌干凈并擦干的植株 沿基部 切斷，分別稱量根系重量 和地上部分重量 ，記錄數(shù)據(jù)。該物質(zhì)在 波長(zhǎng) 620nm處有最大吸收，在 10~100ug范圍內(nèi)，其顏色的深淺與可溶性糖含量成正比。在 620nm波長(zhǎng)下一第一管為空白參比，迅速測(cè) 得余各管吸光值。核酸對(duì)紫外也有吸收，但其最大吸收 峰在 260nm波長(zhǎng)處，故可通過(guò)校正加以消除。吸取離心后的上清液 25mL容量瓶中，用 60%堿性乙醇溶液定容，搖勻后即可用于測(cè)定。 清蛋白的提取 [7] 取 1g烘干的高粱種子，研磨成細(xì)分，放入 25mL具塞磨口三角燒瓶，加 10mL蒸餾水放入 THZC恒溫振蕩器提取 2h后靜置 ， 4000r/min，取其上清液，將殘?jiān)喜⒂谠瞧恐校?再 分別用 50mL和 30mL蒸餾水重復(fù)振蕩 后 離心，合并上清液， 合并 剩余殘?jiān)谠瞧恐小?用蒸餾水 將上述四組離心后的上清液定容至 250mL，用各自 提取液作對(duì)照 用 TU1810紫外可見光光度計(jì) ，分別在 280nm和 260nm波長(zhǎng) 下測(cè)定其吸收值。 試劑配制： 52％高氯酸溶液； 80％乙醇溶液；蒽酮試劑 （ 將 100mL 88％硫酸溶液中，現(xiàn)用現(xiàn)配 ） ；淀粉標(biāo)準(zhǔn)液 （ 將 200mg淀粉倒入 100mL燒杯中，加入 5mL蒸餾水，加入 65 mL52％高氯酸溶液，攪拌溶解，加水定容 至 100mL，濃度 2mg／ mL；取上述標(biāo)準(zhǔn)淀粉溶液 250mL， 即 為 80ug／ mL） 。 以吸光度為橫坐標(biāo)，淀粉濃度為縱坐標(biāo)，繪制 標(biāo)準(zhǔn) 曲線，進(jìn)行曲線擬合 。 y = R2 = 01020304050607080900 吸光度 OD濃度（ug/ml） 圖 2， 淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線 , Standard curve of starch 葉綠素（ Chl）含量測(cè)定 本實(shí)驗(yàn)采用丙酮提取分光光度法測(cè)定 [7]。 取 一張 濾紙，置于漏斗中，用丙酮潤(rùn)濕，沿著玻璃棒把提取液倒入漏斗中，過(guò)濾到25mL棕色容量瓶中，用少量 80%丙酮沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小? 分批提取葉綠素，把葉綠體色素提取液倒入光徑 1cm的比色杯內(nèi)。 形態(tài)指標(biāo) 表 1， 高粱 B743 部分形態(tài)學(xué)特征 Table 1. Some morphological characteristics of shum 形態(tài)指標(biāo) 1 2 3 4 5 6 平均 百粒重 (g) 株高 (cm) 根長(zhǎng) (cm) 鮮重 (g) 地上部分重量 (g) 根重 (g) 干重 (g) 葉面積 (cm2) 生理指標(biāo) 表 2， 種子 部分 生理指標(biāo) Table 2. Part of shum seed physiological 品 系 可溶性糖含量 % 蛋白 含量 % 淀粉含量 % 葉綠素含 量mg/g 蛋白組分
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