【正文】 GB19489 –2023《 實驗室生物安全通用要求》培訓(xùn)班 中國 CDC傳染病所 什么是生物危險 ? 生物危險是指由生物因子形成潛在的危險，當(dāng)在實驗室中處理致病微生物時，或處理基因重組過程中產(chǎn)生的可能具有潛在生物危害的新未知基因時，或在處理致病因子的產(chǎn)物時，這些病原體有可能對實驗室的工作人員造成危害。當(dāng)實驗室硬件條件缺失、管理制度不完善以及不規(guī)范的操作程序，導(dǎo)致實驗室致病因子泄漏和逃逸。則可能造成災(zāi)難性的后果。 什么是生物安全 ? 生物安全是指避免危險生物因子造成實驗室人員暴露、向?qū)嶒炇彝鈹U(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。 什么是生物安全實驗室 生物安全實驗室是指在研究傳染性疾病或微生物時能夠避免病原體意外傷害的實驗室 氣溶膠感染主要途徑 1. 吸球（即吸管）操作。吸球是微生物學(xué)方面最基本的器具，用吸球操作時，能導(dǎo)致氣溶膠發(fā)生，例如由吸管中向外排液，用力過猛則會使液滴飛濺，彈離液體或固體培養(yǎng)基表面，釋放出大量微粒；或者，當(dāng)吸管末端含有物快排盡時，可能產(chǎn)生氣泡，尤其是富于蛋白性懸液更易形成氣泡，而氣泡破裂就成為氣溶膠。 2. 離心沉淀時，沉淀管裝量太滿，管蓋未蓋或不嚴(yán)，以及離心操作過操作過程中離心管破裂，都可導(dǎo)致氣溶膠散播。 氣溶膠感染主要途徑 3. 注射器操作時，當(dāng)抽吸后或者撥出時，注射器針頭由于顫動而散發(fā)出液體微粒。 4. 用接種針去粘沾液體時，液柱斷裂。 5. 鏡檢涂片時，液絲斷裂。 6. 傳染性材料傾注出來。 7. 打開培養(yǎng)皿蓋時，蓋內(nèi)壁往往有傳染性的凝結(jié)水薄膜，因破裂而散播氣溶膠。 氣溶膠感染主要途徑 8. 開安瓿時，如瓿內(nèi)為液體，則當(dāng)銼刀銼斷瓿頸后，即可能發(fā)生氣溶膠；如瓿內(nèi)為干燥的活菌或菌種，特別是用真空熔封的，更易產(chǎn)生溶膠。 9. 機(jī)械振蕩和超聲振蕩，或者研磨、浸解，撥出研磨柱時，都可形成氣溶膠。 10. 裝有液體容器的破損或液體益出。 11. 用超聲波清洗機(jī)清洗污染器具時，也可能發(fā)生大量氣溶膠。 12. 在粗糙的培養(yǎng)基表面涂布菌液時。 13. 高壓滅菌器在滅菌前的排氣。 14. 從玻璃或離心管上撥出棉塞時。 15. 處理關(guān)過受感染動物的籠子。 各種操作的氣溶膠飛散系數(shù) 操作 飛散系數(shù) 超聲波處理 5 107~9105 混合器（開口） 1 106（開始 1min關(guān)閉，然后打開） ~2 103（從開始即打開） 混合器（閉鎖） 9 109（螺口罩） ~2 108*（塑料罩） 液體下滴 2 106（ 90cm高） 由吸管混合 2 106（無吹出） ~1 104（有吹出） 離心作用產(chǎn)生的飛沫 2 106 瓶子的振蕩 7 109~2 103 各種操作的氣溶膠飛散系數(shù) 操作 飛散系數(shù) 干燥后安瓿的開封 肉湯 2 109 半血清 4 1099 從試管上取下棉塞 6 109~2 107 白金耳放在火焰上加熱 3 109~3 107 把凍結(jié)干燥的粉末狀物倒入別的試管 2 1011 各種操作的氣溶膠飛散系數(shù) 操作 飛散系數(shù) 把凍結(jié)干燥的安瓿的斷 以牛奶肉汁懸浮液作原料時 3 109 以加營養(yǎng)的肉汁作原料時 3 109 以羊的血清作原料時 4 10 –10 用浸酒精紗布覆蓋時 0 用干燥滅菌紗布覆蓋時 6 1011 各種操作的氣溶膠飛散系數(shù) 操作 飛散系數(shù) 搗碎器 開放式 2 103 運(yùn)動中擰緊蓋，停轉(zhuǎn)后 1min打開 1 106 用塑料罩罩著進(jìn)行 2 108 擰緊蓋進(jìn)行 9 109 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 皮下注射針頭 意外的注射 ．不要修剪針頭 使用針頭可鎖定式注射器以防止針頭和針管的脫肉，或使用針頭或針管為一體的一次性注射器． ．運(yùn)用良好的實驗技術(shù)，如： 一小心地將液體注入針管以盡可能地減少氣泡或使培養(yǎng)液起泡 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 皮下注射針頭 意外的注射 一避免用注射罪攪拌傳染性液體；否則，應(yīng)保證針尖在藥管內(nèi)液體表層下，避免用力過度。 一當(dāng)從有橡皮塞的瓶子上取下針頭時，應(yīng)用經(jīng)適當(dāng)?shù)南緞┙萘说拿迗F(tuán)包住針頭和瓶塞． 一垂直地將注射器內(nèi)的多余的液體和氣泡排人浸有適當(dāng)?shù)南緞┑拿迗F(tuán)或裝有棉花的小瓶中 . 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 皮下注射針頭 。處理傳染性物質(zhì)時，所有的操作應(yīng)在生物安全操作箱內(nèi)進(jìn)行。 。給動物注射時應(yīng)對動物加以控制。進(jìn)行鼻口注射時，使用鈍頭針頭或套管。使用生物安全操作箱。 用后進(jìn)行高壓滅菌處理并保證使用正確的廢物處理方法。 離心機(jī) 會產(chǎn)生煙霧， 噴濺和試管 破裂 使用封閉式甩桶（安全杯） 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 離心機(jī) 會產(chǎn)生煙霧， 噴濺和試管 破裂 使用封閉式甩桶（安全杯） 超速離心機(jī) 會產(chǎn)生霧， 噴濺和試管 破裂 在離心機(jī)和真空泵之間安 HEPA過濾器。 對每臺馬達(dá)的盍?xí)r間進(jìn)行措施以減少機(jī)械故障 在生物安全操作箱內(nèi)拆卸甩干桶。 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 厭氧罐 爆傳染性 物質(zhì)的噴濺 確保催化劑周圍的金屬線外殼的完完整 烘干箱 內(nèi)爆、玻璃碎 渣和傳染性 物質(zhì)的噴濺 放在堅固的線圈內(nèi) 均化呂， 組織碾磨機(jī) 產(chǎn)生煙霧 和泄漏 在生物安全操作箱內(nèi)操作。 使用特制的型號以防止馬達(dá)軸承和 0形墊圈的泄漏或使用stomacher. 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 近距離聲波 定位器， 超聲波清洗器 聽力損害和 皮膚發(fā)炎 確保操作時保持距離以避免次諧波的危害。 戴上保護(hù)手套，防止高頻以及洗滌劑的危害。 培養(yǎng)基攪拌器， 搖動器， 產(chǎn)生煙霧 溢出和泄漏 在生物安全操作箱內(nèi)或特制的嚴(yán)格密封的容器內(nèi)操作。 攪拌器 用強(qiáng)力帶螺旋塞的培養(yǎng)基玻璃瓶，如果需要，安裝有過濾保護(hù)咀的出口并蓋嚴(yán)。 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 冷凍箱 產(chǎn)生煙霧和 直接接觸 污染源 使用 0型連接器，封閉整個冷凍箱。 使用空氣過濾器以保護(hù)真空管。 使用有效的消毒方法，如 化學(xué)藥劑 家用冰箱 有易燃物品 （如自動溫度調(diào)整器，電燈開關(guān)，加熱管等），這些可導(dǎo)致箱內(nèi)儲存的易燃溶劑發(fā)出的蒸汽的燃燒 在家用冰箱上放上警告標(biāo)志：“在此冰箱內(nèi)嚴(yán)禁存放易燃溶劑”。 在冰箱的外部安裝人工溫度控制器并在冰箱箱體上電線經(jīng)過的位置加以封閉。 注意：自動除霜不能這樣改造。 可能產(chǎn)生危險的設(shè)備和操作方法 設(shè)備 危險 如何防止和減少危險 水浴器具 微生物的滋生，某些金屬接觸疊氮化鈉后可產(chǎn)生易爆炸的混合物 進(jìn)行定期的洗滌和消毒。 不能用疊氮化鈉防止微生物的滋生 生物安全實驗室微生物操作技術(shù)規(guī)范 ? 實驗室事故、傷害以及與工作有關(guān)的感染主要是由于人為失誤、不良實驗技術(shù)以及儀器使用不當(dāng)造成的，實驗室樣品的收集以及內(nèi)部傳遞和接收不當(dāng)時，都能夠帶來使相關(guān)人員感染的危險。應(yīng)建立完善的管理制度與操作細(xì)則，避免或盡量減少這類問題的發(fā)生 。 生物安全實驗室微生物操作技術(shù)規(guī)范 ? 樣品容器 ? 樣品容器可以是玻璃的 ， 但最好使用塑料制品 。 樣品容器應(yīng)當(dāng)堅固 ， 正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無泄漏 。 在容器外部不能有殘留物 。 容器上應(yīng)當(dāng)正確地張貼標(biāo)簽以便于識別 。 樣品的要求或說明書不能夠卷在容器外面 ， 而是要分開放置 ， 最好放置在防水的袋子里 。 樣品在設(shè)施內(nèi)的傳遞為了避免意外泄漏或溢出 ， 應(yīng)當(dāng)使用盒子等二級容器 ， 并將其固定在架子上使裝有樣品的容器保持直立 。 二級容器可以是金屬或塑料制品 ， 應(yīng)該可以耐高壓滅菌或耐受