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高一生物dna的粗提取(已修改)

2024-11-28 01:31 本頁面
 

【正文】 實驗 DNA的粗提取 1.實驗原理 (1)DNA提取的原理: DNA在 NaCl溶液中的溶解度,隨著 NaCl濃度的變化而改變。 DNA在物質的量濃度為 最低,利用這一原理,可以使溶解在 NaCl溶液中的 DNA析出。 【 實驗鏈接 】 雞血細胞中的 DNA主要位于雞血細胞核中,通常先向雞血細胞液中加入蒸餾水,并攪拌,使細胞膜和核膜漲破,將 DNA釋放出來,然后用較高濃度的 NaCl溶液溶解,再加入蒸餾水降低 NaCl溶液的濃度,使 DNA析出。 (2)DNA純化的原理: DNA不溶于酒精,而細胞中某些物質可溶于酒精,從而可提取出含雜質較少的 DNA。 (2)DNA純化的原理: DNA不溶于酒精,而細胞中某些物質可溶于酒精,從而可提取出含雜質較少的 DNA。 【 實驗鏈接 】 實驗中選用預冷的 95%的酒精效果更好,除上述提取方法以外,還可以用苯酚,使蛋白質變性,抑制核酸酶的活性,通過離心分層后, DNA溶于上層水中,蛋白質變性存在于苯酚層中,使二者分開。 (3 )D N A 鑒定的原理: DNA +二苯胺 ―― →沸水浴 藍色。 2.用品分析 (1)材料:雞血 實驗中用雞血作為實驗材料有三個原因:一是雞血中血細胞含量高, DNA含量豐富;二是材料易得;三是雞血細胞極易吸水漲破。 (2)器具 本實驗過程中最好使用塑料燒杯和試管。因為玻璃表面帶電荷, DNA中的磷酸基也帶電荷,因而易被吸附于玻璃表面,故實驗中用塑料燒杯和試管可減少 DNA的損失。 (3)試劑 在 DNA鑒定中所用的二苯胺是一種有毒性的試劑,在使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位,也不要近距離觀察。 3.實驗步驟 4.歸納提升 (1)加入抗凝劑的目的 制備雞血細胞液時要在取新鮮雞血的同時加入抗凝劑,防止血液凝固。 (2)實驗中幾次重復操作的目的 ① 實驗中有兩次使用蒸餾水 a.第一次在第 2步,目的是使血細胞吸水漲破; b.第二次在第 4步,目的是為了稀釋 NaCl溶液,析出 DNA。 ② 實驗中有三次過濾 過濾時使用紗布層數(shù)與取其濾液或絲狀物有關。第 3次要其濾液,使用紗布為 1~ 2層,第 2次是要濾出絲狀物,使用紗布為多層。目的都是為了獲取較多的實驗材料。 ③ 實驗中有三次
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