【正文】 免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？1）識(shí)別階段 2）活化和增值階段 3）免疫效應(yīng)中樞免疫器官和外周免疫器官有哪些器官組成？各有什么功能？1）中樞免疫器官：免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟的場(chǎng)所，如骨髓，胸腺2)外周免疫器官：免疫細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)答的場(chǎng)所。如脾臟，淋巴結(jié)，黏膜，扁桃體等。T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞的主要功能分別是什么？1）T細(xì)胞： 介導(dǎo)細(xì)胞免疫，輔助體液免疫。2）B細(xì)胞： 產(chǎn)生體液免疫3）NK細(xì)胞：介導(dǎo)天然免疫，發(fā)揮細(xì)胞毒作用。根據(jù)作用方式及其特點(diǎn)的不同，機(jī)體存在兩類免疫簡(jiǎn)述各自的概念和特征？1)先天性免疫或固有性免疫，是個(gè)體出生是就具有的天然免疫，可通過遺傳獲得，是機(jī)體在長期進(jìn)化過程中逐漸建立起來的主要針對(duì)入侵病原體的天然防御功能。其主要特征是反應(yīng)迅速，針對(duì)外來異物的范圍較廣，不針對(duì)某個(gè)特定異物抗原，也稱非特異性免疫。2)適應(yīng)性免疫，是個(gè)體出生后，接觸到生活環(huán)境中的多種異物抗原，并在不斷刺激中逐漸建立起來的后天免疫，也稱獲得性免疫。其主要特征是針對(duì)某個(gè)特定的異物抗原而產(chǎn)生免疫應(yīng)答，開始的應(yīng)答過程比較緩慢，一旦建立清除該抗原的效率很高，特異性很強(qiáng)，也稱特異性免疫。簡(jiǎn)述抗原抗體反應(yīng)的原理。答：抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原表位與抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的，它們之間的結(jié)合是抗原表位與抗體超變區(qū)溝槽分子表面的結(jié)合簡(jiǎn)述抗原抗體反應(yīng)的類型。答：抗原抗體反應(yīng)分為五種類型：①顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的凝集反應(yīng)；②可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的沉淀反應(yīng)；③抗原抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體所致的細(xì)胞溶解反應(yīng)；④細(xì)菌外毒素或病毒與相應(yīng)抗體結(jié)合所致的中和反應(yīng)；⑤免疫標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)等。什么是帶現(xiàn)象?答：在抗原抗體反應(yīng)等價(jià)帶前后，由于抗體或抗原過量(形成前帶或后帶)，上清液中可測(cè)出游離的抗體或抗原，形成的沉淀物少，不出現(xiàn)可見反應(yīng)，這種現(xiàn)象在做血清學(xué)試驗(yàn)時(shí)稱為帶現(xiàn)象。影響抗原抗體反應(yīng)的環(huán)境條件有哪些?在實(shí)驗(yàn)中如何控制這些條件因素?答：環(huán)境條件包括：電解質(zhì)，酸堿度和溫度。穩(wěn)定條件：①電解質(zhì)：常用O．85％氯化鈉或各種緩沖液作抗原及抗體的稀釋液及反應(yīng)液；②酸堿度：pH過高或過低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì)，抗原抗體反應(yīng)一般在pH為6～8時(shí)進(jìn)行；③溫度：一般以15，40℃為宜，最佳反應(yīng)溫度為37℃。簡(jiǎn)述單克隆抗體制備技術(shù)的主要步驟。單克隆抗體是應(yīng)用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)進(jìn)行制備的，其主要操作步驟包括抗原免疫、親本細(xì)胞的選擇和制備、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆化、雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)接種或體外增量培養(yǎng)、單克隆抗體的純化與鑒定。試述免疫血清應(yīng)如何進(jìn)行純化。免疫血清的純化主要是指提純免疫血清中的IgG并去除無關(guān)的雜抗體。提純IgG類抗體的方法有：硫酸胺鹽析法粗提、離子交換層析法和親和層析法，采用親和層析法提取IgG時(shí)，可使用純化抗原或葡萄球菌蛋白A交聯(lián)sephamse 4B制成層析柱。另外，還可通過吸附法獲得單價(jià)特異性抗血清。方法是將不含特異性抗原的雜抗原與戊二醛等雙功能試劑混合制成固相吸附劑，以吸附免疫血清中的雜抗體，或?qū)㈦s抗原交聯(lián)于sephamse 4B上，通過親和層析去除雜抗體。敘述雜交瘤技術(shù)的基本原理。雜交瘤技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。這種雜交瘤細(xì)胞具有兩種親本細(xì)胞的特性，即既能夠分泌抗體又能在體外長期繁殖，經(jīng)過克隆化后成為單個(gè)細(xì)胞克隆，分泌的抗體即為單克隆抗體。簡(jiǎn)述間接血凝試驗(yàn)的基本原理。間接血凝試驗(yàn)是將可溶性抗原(或抗體)吸附于人的0型紅細(xì)胞或綿羊、家兔的紅細(xì)胞制成抗原致敏的紅細(xì)胞，與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在有電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)過一定時(shí)間可出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，又稱被動(dòng)血凝試驗(yàn)簡(jiǎn)述抗人球蛋白試驗(yàn)的原理(又稱Coombs試驗(yàn))、類型及其在臨床上的應(yīng)用。Coombs試驗(yàn)又稱抗人球蛋白試驗(yàn)，其原理是不完全抗體多半是7S的IgG類抗體，能與相應(yīng)的抗原牢固結(jié)合，但在一般條件下不出現(xiàn)可見反應(yīng)，利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，可使紅細(xì)胞凝集。 Coombs試驗(yàn)有二種類型：(1)直接Coombs試驗(yàn)：用于檢測(cè)紅細(xì)胞結(jié)合的不完全抗體。(2)間接Coombs試驗(yàn)：用于檢測(cè)血清中游離的不完全抗體?？骨虻鞍自囼?yàn)主要應(yīng)用于那些方面？①輸血：對(duì)于“危險(xiǎn)”受體（指曾經(jīng)輸血、肌肉注射過血液制品或母子間血型不合的妊娠而可能產(chǎn)生免疫性血型抗體的人）的配血試驗(yàn)必須包括各種不完全抗體的檢查，以抗球蛋白法最為可靠。②血型抗原抗體的檢查：主要檢查Rh— 者，其體內(nèi)是否有抗D抗體，應(yīng)用抗球蛋白試驗(yàn)對(duì)外表為D 陰性的供體血液作常規(guī)檢查。最可靠和靈敏的方法是將待檢D 陰性的紅細(xì)胞與高效價(jià)的不完全抗D 血清混合，然后加抗球蛋白血清檢查細(xì)胞上有無致敏抗體。③對(duì)新生兒溶血性貧血性疾病的診斷：母體產(chǎn)生的最常見的免疫性抗體為Rh 抗體和ABO 抗體，一般為7S 的IgG，可通過胎盤屏障，作用于胎兒紅細(xì)胞，引起新生兒溶血性疾病，可借抗球蛋白試驗(yàn)檢出而采取預(yù)防性措施。④對(duì)溶血性貧血的研究：獲得性溶血性貧血患者大多數(shù)可借助該方法證實(shí)有自身紅細(xì)胞的抗體存在。⑤對(duì)細(xì)菌或立克次體的不完全抗體的檢查。Coombs 試驗(yàn)還可采用專一性特異性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗補(bǔ)體血清等，分析結(jié)合于紅細(xì)胞上的不完全抗體免疫球蛋白的亞類。什么是協(xié)同凝集試驗(yàn)？主要用于何種檢測(cè)？協(xié)同凝集試驗(yàn)與間接凝集反應(yīng)的原理相類似，但所用的載體為金黃色葡萄球菌。這種細(xì)菌的細(xì)胞壁中含有A蛋白（SPA），SPA 能與特異性抗體IgG 的Fc段結(jié)合（IgG3除外）?？贵w的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍保持與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的特性。當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí)，就成為抗體致敏的載體顆粒，若與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。可用于細(xì)菌、病毒、毒素及各種可溶性抗原的檢測(cè)。何謂間接凝集反應(yīng)？將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯(lián)于與免疫無關(guān)大小適當(dāng)?shù)念w粒表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜電解質(zhì)存在條件下，出現(xiàn)特異性的凝集現(xiàn)象，稱為間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)如何進(jìn)行分類？各試驗(yàn)的原理是什么根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體分為正向間接凝集試驗(yàn)和反向間接凝集試驗(yàn)；根據(jù)載體種類，分為間接血凝試驗(yàn)和膠乳間接凝集試驗(yàn)；根據(jù)反應(yīng)方式分為間接凝集試驗(yàn)、間接抑制凝集試驗(yàn)和協(xié)同凝集試驗(yàn)。間接凝集試驗(yàn)是用抗原致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體。將可溶性抗原與載體顆粒結(jié)合，再與標(biāo)本中的抗體反應(yīng)，通過抗體橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集顆粒或凝集塊，為陽性反應(yīng)。反向間接凝集試驗(yàn)選用已知特異性抗體致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原。用特異性抗體致敏顆粒，與樣品中的待檢抗原反應(yīng)，通過抗原橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集為陽性。臨床上用于檢測(cè)HbsAg、AFP 等。間接凝集抑制試驗(yàn)診斷試劑為已知抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體，用于檢測(cè)標(biāo)本中與致敏抗原相同的抗原。將標(biāo)本與抗體試劑相反應(yīng)，然后加入致敏抗原，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，說明標(biāo)本中不存在相應(yīng)抗原。如未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，則說明待檢標(biāo)本中含有相應(yīng)抗原，凝集反應(yīng)被抑制。同理，用抗體致敏載體顆粒及相應(yīng)抗原作為診斷試劑，檢測(cè)標(biāo)本中的抗體，稱為反向間接凝集試驗(yàn)。協(xié)同凝集試驗(yàn)與間接凝集反應(yīng)的原理相似，但所用載體為金黃色葡萄球菌，該菌細(xì)胞壁上的SPA 能與特異性抗體的IgG 的Fc 段結(jié)合（IgG3除外），抗體的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。當(dāng)這種葡萄球菌與IgG 抗體連接時(shí)，就成為抗體致敏的載體顆粒，若與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。間接血凝試驗(yàn)是以紅細(xì)胞作為載體的間接凝集試驗(yàn)，用已知的抗原或抗體致敏紅細(xì)胞，然后與樣品中的抗體或抗原在適宜條件下反應(yīng)，出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集者為陽性。根據(jù)紅細(xì)胞凝集的程度判斷陽性反應(yīng)的強(qiáng)弱。膠乳凝集試驗(yàn)是以聚苯乙烯膠乳微粒作為載體的間接凝集試驗(yàn)。HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞的機(jī)制是什么？答：：不能生長，5到7天死亡；：不能生長，5到7天死亡；HGPRT缺乏，可長期生長繁殖。利用淋巴細(xì)胞的HGRT將Ｈ合成為嘌呤堿并最終與Ｔ一起合成ＤＮＡ從淋巴細(xì)胞獲得產(chǎn)生某種抗體的遺傳信息，從骨髓瘤細(xì)胞獲得不斷繁殖的能力簡(jiǎn)述免疫系統(tǒng)的三個(gè)生理功能。答：免疫系統(tǒng)的三個(gè)生理功能為免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視　免疫防御：是機(jī)體排斥外來抗原性異物的一種免疫保護(hù)功能。該功能正常時(shí)，機(jī)體可抵御病原微生物及其毒性產(chǎn)物的感染和損害，即抗感染免疫；異常情況下，反應(yīng)過高會(huì)引起超敏反應(yīng)，反應(yīng)過低或缺失可發(fā)生免疫缺陷。免疫自穩(wěn)：是機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一種生理功能。該功能正常時(shí)，機(jī)體可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細(xì)胞和免疫復(fù)合物等異物，而對(duì)自身成分保持免疫耐受；該功能失調(diào)時(shí)，可發(fā)生生理功能紊亂或自身免疫性疾病。免疫監(jiān)視：是機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的一種生理功能。該功能失調(diào)時(shí)，有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，或因病毒不能清除而出現(xiàn)持續(xù)感染。決定抗原抗體最佳配比的方法有幾種?(1)抗原稀釋法：將可溶性抗原作一系列倍比稀釋，然后向各管中加入一定濃度的適量抗血清，37℃反應(yīng)后，產(chǎn)生的沉淀量隨抗原量變化而不同，以沉淀物最多的管為最適比例管。(2)抗體稀釋法：是將恒定量抗原與不同倍比稀釋的抗體反應(yīng)，出現(xiàn)沉淀物最多的管為抗體最適比例管。(3)棋盤格法：亦稱方陣法。抗原抗體同時(shí)稀釋，可一次完成抗原和抗體的滴定，并找出抗原、抗體的最適比。是前二法的結(jié)合簡(jiǎn)述單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)的基本原理和技術(shù)要點(diǎn)。(1)原理：待測(cè)抗原從局部含有定量抗體的凝膠內(nèi)自由向周圍擴(kuò)散，抗原抗體特異性結(jié)合，在兩者比例合適的部位，形成白色沉淀環(huán)，沉淀環(huán)的大小與抗原的濃度呈正相關(guān)。(2)技術(shù)要點(diǎn)：將抗體和熱融化瓊脂(約50％)混合，傾注成平板。待凝固后在瓊脂板上打孔，孔中加入已稀釋的抗原液，和不同濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品，置37~12溫箱，24～48h后觀察孔周圍沉淀環(huán)。量取沉淀環(huán)直徑，通過抗原標(biāo)準(zhǔn)品，計(jì)算待測(cè)抗原的濃度。在雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)中，如何判定結(jié)果?雙向免疫擴(kuò)散中，出現(xiàn)沉淀線，表明存在相應(yīng)的抗原、抗體，不出現(xiàn)沉淀線則表明缺乏抗原或抗體。沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致，沉淀線靠近抗原孔，提示抗體含量高；靠近抗體孔，提示抗原含量較多免疫電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是什么?免疫電泳有哪些用途?1)優(yōu)點(diǎn)：免疫電泳技術(shù)是將免疫擴(kuò)散和電泳相結(jié)合的一種免疫學(xué)分析技術(shù)，既有抗原抗體反應(yīng)的高度特異性，又有電泳分離技術(shù)的快速、靈敏和高分辨力，廣泛應(yīng)用于牛物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。(2)用途：①純化抗原或抗