免疫共沉淀中文使用說(shuō)明書(pierce26149)(已修改)
2025-08-01 09:27 本頁(yè)面
【正文】 Pierce174。 CoImmunoprecipitation (CoIP) Kit（26149）中文說(shuō)明書介紹：Thermo 公司的Pierce174。免疫共沉淀試劑盒，可通過(guò)將鉚釘抗體固定在瓊脂糖支撐物上，從裂解液中或其他復(fù)雜混合物中，分離出天然蛋白復(fù)合物。CoIP是一種研究蛋白與蛋白相互作用通用的方法，該方法使用一種誘餌蛋白與抗原進(jìn)行免疫沉淀反應(yīng)，然后可通過(guò)免疫共沉淀任何與誘餌蛋白具有相互作用的獵物蛋白。傳統(tǒng)的CoIP方法使用蛋白A或G共同洗脫抗體的重鏈和輕鏈，這很可能導(dǎo)致將相關(guān)的蛋白一起洗脫下來(lái)，掩蓋一些重要的結(jié)果。Pierce174。免疫共沉淀試劑盒通過(guò)將共價(jià)結(jié)合抗體固定在一個(gè)胺類活性反應(yīng)樹脂上解決了這一問題。該試劑盒包含足夠的用于蛋白結(jié)合和恢復(fù)的緩沖液，完成對(duì)照試驗(yàn)的高校離心柱和收集管，這些產(chǎn)品進(jìn)一步縮短了操作實(shí)驗(yàn)的時(shí)間。重要產(chǎn)品信息：略CoIP實(shí)驗(yàn)步驟：注意：以下試驗(yàn)步驟是針對(duì)用無(wú)胺和其他載體蛋白稀釋的1075μg親和純化抗體（參考重要產(chǎn)品信息一節(jié)）。根據(jù)實(shí)際使用比例參考這一協(xié)議步驟。參考重要產(chǎn)品信息節(jié)表1中的建議抗體用量和樹脂體積用量。（AminoLink174。 Plus Coupling Resin）和試劑； 1Coupling Buffer（超純水稀釋20Coupling Buffer）；174。 Plus Coupling Resin的瓶子，使其處于懸浮狀態(tài)。使用大口徑（或剪掉一段槍頭端），添加50μl樹脂懸液到Pierce提供的離心柱中，將離心柱放入微量離心管中，1000g離心1min，棄濾液； 1Coupling Buffer 清洗樹脂2次，離心棄濾液；，輕巧離心柱
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