生命科學研究進展復習—題目及答案(已修改)
2025-06-19 21:47 本頁面
【正文】 王義權老師（6題）什么是DNA分子標記？DNA是生物遺傳信息的載體，任何生物的遺傳信息都具有種屬特異性。生物體一切具有其種屬特異性的特征，均可作為標記。DNA分子標記是DNA分子中能夠反映生物種屬特異性的序列特征，這種特征可以用多種方法揭示。DNA分子標記的種類有哪些？DNA分子標記有：限制性長度多態(tài)性RFLP、PCRRFLP、CAPS、DNA指紋、隨機擴增多態(tài)性RAPD、序列特征擴增區(qū)SCAR、位點特異性PCR（ASPCR）、單鏈構象多態(tài)性SSCP、擴增片段長度多態(tài)性AFLP、序列分析、單核苷酸多態(tài)性SNP、表達序列標簽EST、序列標簽位點STS、簡單序列重復SSR、簡單序列長度多態(tài)性SSLP、微衛(wèi)星序列DNA、VNTR等。DNA分子標記有哪些用途？在基因組研究中的作圖；動植物遺傳育種中的應用；醫(yī)學遺傳學和疾病的診斷；傳染病的病原生物檢測：如SARS，禽流感病毒；生物樣品的檢驗如海關檢疫、法醫(yī)鑒定、中藥材鑒定等；在動物學研究中的應用。簡要說明RFLP的原理并舉例說明其應用。RFLP的原理是限制性內切酶（II型酶）對特定序列的識別，并在識別位點專一性地將雙鏈DNA切開。多數(shù)限制性內切酶識別的是DNA分子中4~6 bp的特征序列，而基因組DNA分子中散布著多種內切酶的識別序列，故可將不同生物的DNA分子切成長短不一的DAN片段。每4nbp處有一切點，理論上切點的頻率為基因組總長/ 4n bp，因此對某一特定基因組，識別位點堿基數(shù)多的限制酶，在該基因組中的識別位點數(shù)就少；反之就多。切點的多少可由酶切后的DNA片段長度檢驗?？梢詰糜谖锓N遺傳多樣性分析。舉例說明DNA分子標記在動物學研究中的應用。DNA分子標記在動物學研究中的應用包括估算遺傳距離、重建系統(tǒng)發(fā)生樹、分析種群結構及分子生態(tài)學、測定種群遺傳多樣性及應用于保護生物學、系統(tǒng)地理學、鑒定物種或種群等。例：廈門海域文昌魚的研究：通過設計Cytb和12S rRNA基因擴增引物，PCR擴增，測序和序列比對、MEGA數(shù)據分析，得出結論廈門有2種文昌魚，%；其中有一種(來自黃厝)%；詳細的觀察、測量與比較，進一步確定其作為2個不同的物種在廈門海域的存在。名詞解釋隨機擴增多態(tài)性RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)：根據在龐大的基因組DNA中存在的許多短的顛倒重復序列。用單一引物，在較低的復性溫度下，可以將基因組中兩個相鄰的顛倒重復序列間的DNA片段擴增出。通過瓊脂糖凝膠電泳等分離手段，可將擴增產物按片段大小分離，形成特定的電泳譜帶。單鏈構象多態(tài)性SSCP(Single Strand Conformational Polymorphism)：DNA單鏈在變性凝膠電泳中的遷移速率不僅與DNA片斷長度有關，還與特定序列形成的特定空間構象有關。擴增片段長度多態(tài)性AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)：用限制酶切基因組DNA后，裝上適當接頭，再用選擇性引物擴增，可得到長度多態(tài)性很好的DNA片段。表達序列標簽EST(Expressed Sequence Tag)：從一個隨機選擇的cDNA 克隆進行5’端和3’端測序獲得短的cDNA 部分序列，代表一個完整基因的一小部分，也能說明該組織中各基因的表達水平。單核苷酸多態(tài)性SNP(Single Nucleotide Polymorphism)：基于同一位點不同等位基因存在不同單核苷酸的現(xiàn)象發(fā)展出的DNA分子標記技術，目前已有一些新的檢測SNP的方法，對于高通量的SNP檢測，最有希望的是用DNA芯片技術。簡單序列重
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