生命科學(xué)研究進(jìn)展復(fù)習(xí)—題目及答案(已修改)
2025-06-19 21:47 本頁面
【正文】 王義權(quán)老師（6題）什么是DNA分子標(biāo)記？DNA是生物遺傳信息的載體，任何生物的遺傳信息都具有種屬特異性。生物體一切具有其種屬特異性的特征，均可作為標(biāo)記。DNA分子標(biāo)記是DNA分子中能夠反映生物種屬特異性的序列特征，這種特征可以用多種方法揭示。DNA分子標(biāo)記的種類有哪些？DNA分子標(biāo)記有：限制性長(zhǎng)度多態(tài)性RFLP、PCRRFLP、CAPS、DNA指紋、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性RAPD、序列特征擴(kuò)增區(qū)SCAR、位點(diǎn)特異性PCR（ASPCR）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性SSCP、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性AFLP、序列分析、單核苷酸多態(tài)性SNP、表達(dá)序列標(biāo)簽EST、序列標(biāo)簽位點(diǎn)STS、簡(jiǎn)單序列重復(fù)SSR、簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性SSLP、微衛(wèi)星序列DNA、VNTR等。DNA分子標(biāo)記有哪些用途？在基因組研究中的作圖；動(dòng)植物遺傳育種中的應(yīng)用；醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和疾病的診斷；傳染病的病原生物檢測(cè)：如SARS，禽流感病毒；生物樣品的檢驗(yàn)如海關(guān)檢疫、法醫(yī)鑒定、中藥材鑒定等；在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用。簡(jiǎn)要說明RFLP的原理并舉例說明其應(yīng)用。RFLP的原理是限制性內(nèi)切酶（II型酶）對(duì)特定序列的識(shí)別，并在識(shí)別位點(diǎn)專一性地將雙鏈DNA切開。多數(shù)限制性內(nèi)切酶識(shí)別的是DNA分子中4~6 bp的特征序列，而基因組DNA分子中散布著多種內(nèi)切酶的識(shí)別序列，故可將不同生物的DNA分子切成長(zhǎng)短不一的DAN片段。每4nbp處有一切點(diǎn)，理論上切點(diǎn)的頻率為基因組總長(zhǎng)/ 4n bp，因此對(duì)某一特定基因組，識(shí)別位點(diǎn)堿基數(shù)多的限制酶，在該基因組中的識(shí)別位點(diǎn)數(shù)就少；反之就多。切點(diǎn)的多少可由酶切后的DNA片段長(zhǎng)度檢驗(yàn)。可以應(yīng)用于物種遺傳多樣性分析。舉例說明DNA分子標(biāo)記在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用。DNA分子標(biāo)記在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用包括估算遺傳距離、重建系統(tǒng)發(fā)生樹、分析種群結(jié)構(gòu)及分子生態(tài)學(xué)、測(cè)定種群遺傳多樣性及應(yīng)用于保護(hù)生物學(xué)、系統(tǒng)地理學(xué)、鑒定物種或種群等。例：廈門海域文昌魚的研究：通過設(shè)計(jì)Cytb和12S rRNA基因擴(kuò)增引物，PCR擴(kuò)增，測(cè)序和序列比對(duì)、MEGA數(shù)據(jù)分析，得出結(jié)論廈門有2種文昌魚，%；其中有一種(來自黃厝)%；詳細(xì)的觀察、測(cè)量與比較，進(jìn)一步確定其作為2個(gè)不同的物種在廈門海域的存在。名詞解釋隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)：根據(jù)在龐大的基因組DNA中存在的許多短的顛倒重復(fù)序列。用單一引物，在較低的復(fù)性溫度下，可以將基因組中兩個(gè)相鄰的顛倒重復(fù)序列間的DNA片段擴(kuò)增出。通過瓊脂糖凝膠電泳等分離手段，可將擴(kuò)增產(chǎn)物按片段大小分離，形成特定的電泳譜帶。單鏈構(gòu)象多態(tài)性SSCP(Single Strand Conformational Polymorphism)：DNA單鏈在變性凝膠電泳中的遷移速率不僅與DNA片斷長(zhǎng)度有關(guān)，還與特定序列形成的特定空間構(gòu)象有關(guān)。擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)：用限制酶切基因組DNA后，裝上適當(dāng)接頭，再用選擇性引物擴(kuò)增，可得到長(zhǎng)度多態(tài)性很好的DNA片段。表達(dá)序列標(biāo)簽EST(Expressed Sequence Tag)：從一個(gè)隨機(jī)選擇的cDNA 克隆進(jìn)行5’端和3’端測(cè)序獲得短的cDNA 部分序列，代表一個(gè)完整基因的一小部分，也能說明該組織中各基因的表達(dá)水平。單核苷酸多態(tài)性SNP(Single Nucleotide Polymorphism)：基于同一位點(diǎn)不同等位基因存在不同單核苷酸的現(xiàn)象發(fā)展出的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，目前已有一些新的檢測(cè)SNP的方法，對(duì)于高通量的SNP檢測(cè)，最有希望的是用DNA芯片技術(shù)。簡(jiǎn)單序列重
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