【正文】 微生物組標(biāo)本采集手冊(cè) 目錄 第一章 血液及骨髓標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) .................1 第二章 痰標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) .........................5 第三章 上呼吸道標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ...................8 第四章 尿液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ......................10第五章 糞便標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ......................12第六章 化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ................14 第七章 腦脊液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ....................16 第八章 膽汁標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ......................18 第九章 胸水標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ......................20 第十章 腹水標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ......................22 第十一章 心包液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ..................24 第十二章 關(guān)節(jié)液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ..................26 第十三章 鞘膜積液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ................28 第十四章 生殖 道標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ..................30 第十五章 外眼部標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) ..................33 第十六章 感染性疾病相關(guān)檢測(cè) ......................35 第一節(jié) 降鈣素原檢查 .............................35 第二節(jié) 內(nèi)毒素檢查 ...............................37 第三節(jié) 13β D葡聚糖檢查 ........................39 第一章 血液及骨髓標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) 一、檢 查項(xiàng)目 血液、骨髓液的細(xì)菌培養(yǎng) 二、標(biāo)本采集 【 標(biāo)本采集前的注意事項(xiàng) 】 應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集。 【標(biāo)本 送檢指征 】 病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時(shí)具備以下幾種臨床表現(xiàn)時(shí)應(yīng)采集血培養(yǎng)。 1 發(fā)熱（≥ 38℃）或低溫（≤ 36℃） 2 寒戰(zhàn) 3 白細(xì)胞增多（＞ 10 109/L，特別有“核左移”時(shí)） 4 粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞＜ 1 109/L） 5 血小板減少 6 皮膚、粘膜出血 7 昏迷 8 多器官衰竭 9 血壓降低 10 呼吸加快 幾種特殊情 況： 1 可疑新生兒敗血癥時(shí)，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。 2 老年菌血癥病人可能不發(fā)熱或不低溫，如伴有身體不適、肌痛或中風(fēng)，可能是感染性心內(nèi)膜炎，也應(yīng)采取血培養(yǎng)。 骨髓培養(yǎng)與血液培養(yǎng)的送檢指征是基本一致的，臨床常規(guī)血液感染有指征時(shí)以抽取血培養(yǎng)為主。但當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽(yáng)性率會(huì)遠(yuǎn)高于血培養(yǎng)。 【標(biāo)本采集的容器】 美國(guó) BD 公司血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶 (我院 )，各種血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或手工血培養(yǎng)瓶。 【樣本條碼粘貼要求】 同時(shí)打印兩份清晰的條形碼，分別粘貼在兩 個(gè)血培養(yǎng)瓶上，應(yīng)沿血培養(yǎng)瓶的長(zhǎng)軸粘貼，病人的姓名端向上，條碼區(qū)的任何區(qū)域不得被覆蓋，注意不要在條碼上涂寫，保持條碼的完整和清晰。 【標(biāo)本的采集方法】 防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物引起的污染是血培養(yǎng)的關(guān)鍵問(wèn)題，采血前嚴(yán)格執(zhí)行消毒程序是十分重要的。 1 皮膚消毒程序： 嚴(yán)格按以下三步法進(jìn)行： (1) 70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待 30s 以上。 (2) 用一根碘酊或聚維酮碘（碘伏）棉簽消毒皮膚， 1～ 2％碘酊作用 30s 或聚維酮碘作用 60s，從穿刺點(diǎn)向外以 ～ 2cm 直徑畫圈進(jìn)行消毒。 (3) 70％酒精脫碘。 對(duì)碘過(guò) 敏的病人只能用 70%酒精消毒，消毒 60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。 2 培養(yǎng)瓶消毒程序 (1) 用 70％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。 (2) 酒精作用 60s。 (3) 在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無(wú)菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 3 培養(yǎng)瓶接種程序 抽取血液后，不要換針頭，直接注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。如果同時(shí)作需氧和厭氧培養(yǎng)，應(yīng)先將標(biāo)本接種到厭氧瓶中，然后再注入需氧瓶，嚴(yán)格防止將空氣注入?yún)捬跗恐小? 【標(biāo)本采集注意事項(xiàng)】 1 血培養(yǎng)采集的時(shí)間和頻率 (1) 采 血培養(yǎng)應(yīng)盡量在抗菌藥物使用之前，在 24h 內(nèi)采集 2～ 3 份血培養(yǎng)（一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng)），每次 2 瓶。因?yàn)檠芯恳炎C實(shí)， 2～ 3 份血培養(yǎng)足以檢測(cè)所有的菌血癥和真菌血癥。 (2) 入院前 2 周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者，連續(xù) 3 天，每天采集 2 份，可選用能中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)基。 (3) 對(duì)間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱的患者，應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前 ～ 1h采集血液，或于寒戰(zhàn)或發(fā)熱后 1h 采集。因?yàn)榘l(fā)熱時(shí)血液中可能沒(méi)有細(xì)菌。 (4) 可疑為急性原發(fā)性菌血癥、真菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎的患者，應(yīng) 在不同部位采集 2～ 3 份血培養(yǎng)。 (5) 不明原因發(fā)熱，如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱，先采集 2～ 3 份血標(biāo)本，24～ 36h 后估計(jì)體溫升高之前，再采集 2 份以上。 (6) 可疑為菌血癥或真菌血癥，但血培養(yǎng)持續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，選擇其它種類的培養(yǎng)瓶，如高滲培養(yǎng)瓶，中和抗生素培養(yǎng)瓶，結(jié)核菌培養(yǎng)瓶等，以獲得罕見(jiàn)的或苛氧的微生物。 (7) 可疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎，在 1～ 2h 內(nèi)多部位采集 3 份血標(biāo)本，如果 24h陰性，再采取 3 份以上的血標(biāo)本。 2 采血量 成人：推薦每個(gè)血培養(yǎng)瓶應(yīng)加的血量為 10ml，血液和肉湯比為 1： 5～ 10（ 體積：體積）。 兒童：因很難獲得大量的血液，一般靜脈采血 1～ 5ml 用于血培養(yǎng)。 血液量太多或太少都不利于細(xì)菌的檢出，血液的培養(yǎng)量每增加 1ml,陽(yáng)性率增加 3～ 5％。人體血液內(nèi)包含各種抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的因子或抗生素，注入血液太多可能會(huì)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。 骨髓采血量一般為 1～ 2ml。 【標(biāo)本的送檢地點(diǎn)】 檢驗(yàn)科微生物室（ 3 號(hào)樓 4 樓）， 16： 507： 30 送檢驗(yàn)科急診化驗(yàn)室（ 3 號(hào)樓 2 樓） *標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中必須保證其安全，防止溢出，避免細(xì)菌污染。 【標(biāo)本的保存】 含血樣的培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室；如不能及時(shí)送檢，應(yīng)將其放在室 溫，切忌冰箱存放。因?yàn)槟承┛裂蹙稍诒錅囟戎兴劳觯古囵B(yǎng)陽(yáng)性率下降。 在運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室的途中如果天氣寒冷，應(yīng)采取一定的保溫措施。 第二章 痰標(biāo)本的微生物檢驗(yàn) 一、檢查項(xiàng)目 痰液的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)、真菌涂片、結(jié)核菌涂片。 二、標(biāo)本采集 【 標(biāo)本采集前的注意事項(xiàng) 】 應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集。 【標(biāo)本 送檢指征 】 1 咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。 2 咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶 血。 3 呼吸困難 4 發(fā)熱 5 胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時(shí)，會(huì)發(fā)生胸痛。 *肺部感染的患者有 25～ 50％可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時(shí)作血培養(yǎng)。 【標(biāo)本采集容器】 一次性無(wú)菌留痰盒。 【樣本條碼粘貼要求】 打印清晰的條碼盡量沿著容器的長(zhǎng)軸粘貼，病人的姓名端向上，條碼區(qū)的任何區(qū)域不得被覆蓋，注意不要在條碼上涂寫，保持條碼的完整和清晰。 【標(biāo)本采集方法】 1 自然咳痰法：咳痰前，先用清水或漱口液反復(fù)漱口（為減少口腔正常菌群污染標(biāo)本），然后用力自氣管中咳出第一口痰于無(wú)菌容器內(nèi)。 對(duì)于痰量少或無(wú)痰的患者可采 用霧化吸入 45℃ 10％ NaCL 水溶液，使痰液易于排出。 對(duì)咳痰少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，使其咳嗽。 2 氣管鏡采集法：用支氣管鏡在肺內(nèi)病灶附近用導(dǎo)管吸引或用支氣管刷直接取得標(biāo)本。 3 胃內(nèi)采痰法：無(wú)自覺(jué)癥狀的肺結(jié)核病人