【正文】 1. 現(xiàn)代生物技術(shù)包括?2. 現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)?3. 新型生物反應(yīng)器?4. 生物技術(shù)藥物分類5. 生物技術(shù)藥物的特點(diǎn)6. 生物技術(shù)在制藥中的應(yīng)用7. 基因的概念與特性8. DNA的復(fù)制與表達(dá)9. 基因工程制藥 醫(yī)用活性蛋白和多肽類10. 基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥品的優(yōu)點(diǎn)11. 基因工程藥物生產(chǎn)的過程12. 目的基因的獲得、克隆真核基因常用方法13. 人工化學(xué)合成基因的限制14. 基因篩選的新方法、對(duì)已發(fā)現(xiàn)基因的改造15. 最佳的基因表達(dá)體系16. 適合目的基因表達(dá)的宿主細(xì)胞應(yīng)滿足哪些要求17. 大腸桿菌中的基因表達(dá)18. 原核細(xì)胞的基因組特點(diǎn)19. 基因克隆載體的定義、特點(diǎn)20. 質(zhì)粒的分類21. 真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)載體必須具備條件22. 影響目的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素23. 基因工程菌生長代謝的特點(diǎn)（菌體的生長與能量、前體供應(yīng)的關(guān)系）24. 基因工程菌的不穩(wěn)定性（質(zhì)粒、分裂、結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定）、其主要機(jī)制25. 常見分裂不穩(wěn)定的兩個(gè)因素、提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法26. 基因工程菌的培養(yǎng)方式27. 影響發(fā)酵的因素有28. 高密度發(fā)酵特點(diǎn)、影響因素29. 實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵的方法30. 基因工程藥物的分離純化31. 分離純化的方法、基本原理32. 分離純化工藝應(yīng)遵循的原則33. 基因工程藥物的質(zhì)量控制、保存34. 動(dòng)物細(xì)胞的形態(tài)、生理特點(diǎn)35. 動(dòng)物細(xì)胞來源的藥物的種類36. 動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基37. 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法、特點(diǎn)、培養(yǎng)方式38. 動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器的類型、理想反應(yīng)器的基本要求39. 動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)品純化方法、動(dòng)物細(xì)胞制藥的前景40. 單克隆抗體及其制備41. 基因工程抗體及其制備42. 噬菌體抗體庫技術(shù)的基本方法、特點(diǎn)43. 基因工程抗體表達(dá)44. 抗體診斷試劑的類型45. 抗體治療藥物的種類46. 植物組織和器官的培養(yǎng)47. 次級(jí)代謝產(chǎn)物特點(diǎn)、作用48. 植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的組成、固定化反應(yīng)器49. 影響植物次級(jí)代謝產(chǎn)物生產(chǎn)和累積的因素50. 植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生物反應(yīng)器的類型、性能比較51. 植物細(xì)胞固定化培養(yǎng)優(yōu)缺點(diǎn)52. 植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)程序53. 植物生物反應(yīng)器選擇標(biāo)準(zhǔn)54. 植物細(xì)胞制藥的進(jìn)展與展望55. 酶的特點(diǎn)、來源56. 酶工程的研究內(nèi)容57. 利用微生物生產(chǎn)酶制劑的優(yōu)點(diǎn)58. 固定化酶的特點(diǎn)59. 酶和細(xì)胞固定化方法與制備技術(shù)60. 固定化細(xì)胞的特點(diǎn)61. 固定化細(xì)胞反應(yīng)器的類型和特點(diǎn)62. 模擬酶的的概念及分類63. 酶的化學(xué)修飾的目的和意義64. 酶化學(xué)修飾的方法65. 修飾酶的特性66. 酶化學(xué)修飾的應(yīng)用及其局限性67. 酶的化學(xué)修飾的前景68. 有機(jī)相酶反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)、有機(jī)溶劑、影響69. 酶工程優(yōu)點(diǎn)70. 發(fā)酵工程的研究內(nèi)容71. 優(yōu)良菌種的選育72. 誘變育種的方法和原理73. 營養(yǎng)缺陷型的作用74. 發(fā)酵類型、特點(diǎn)75. 發(fā)酵工藝控制76. 細(xì)胞破碎的方法及其優(yōu)缺點(diǎn)77. 理想的微生物細(xì)胞生物反應(yīng)器基本要求78. 基因工程在發(fā)酵工程中的應(yīng)用79. 基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的兩種主要表現(xiàn)形式是什么? 主要機(jī)制是什么 ?15 / 1580. 在人胰島素AB鏈分別表達(dá)法中,為何將AB鏈編碼序列與b半乳糖苷酶基因融合？81. 闡述基因工程藥物研制有那些主要過程？82. 對(duì)鼠源性單克隆抗體進(jìn)行改造的目的是什么？鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型？83. 抗體治療藥物有哪些？:⑴重組DNA技術(shù)⑵細(xì)胞和原生質(zhì)體融合技術(shù)⑶酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)⑷植物脫毒和快速繁殖技術(shù)⑸動(dòng)物和植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)技術(shù)⑹動(dòng)物胚胎工程技術(shù)⑺現(xiàn)代微生物發(fā)酵技術(shù)⑻現(xiàn)代生物反應(yīng)工程和分離工程技術(shù)⑼蛋白質(zhì)工程技術(shù)⑽海洋生物技術(shù)2．現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)主要體現(xiàn)在下列幾個(gè)方面：①基因操作技術(shù)日新月異，不斷完善。②新技術(shù)、新方法一經(jīng)產(chǎn)生便迅速地通過商業(yè)渠道出售專項(xiàng)技術(shù)，并在市場(chǎng)上加以應(yīng)用。③基因工程藥物和疫苗的研究和開發(fā)突發(fā)猛進(jìn)。④新的生物治療制劑的產(chǎn)業(yè)化前景十分光明，21世紀(jì)整個(gè)醫(yī)藥工業(yè)將面臨全面的更新改造。⑤轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物取得重大突破⑥現(xiàn)代生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的廣泛應(yīng)用將給農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來新的飛躍。⑦闡明生物體基因組及其編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能是當(dāng)今生命科學(xué)發(fā)展的一個(gè)主流方向，⑧基因治療取得重大進(jìn)展，有可能革新整個(gè)疾病的預(yù)防和治療領(lǐng)域。⑨蛋白質(zhì)工程是基因工程的發(fā)展，它將分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合起來，形成一門高度綜合的學(xué)科。⑩信息技術(shù)的飛躍發(fā)展?jié)B透到生命科學(xué)領(lǐng)域中，形成形成引人注目、用途廣泛的生物信息學(xué)。3新型生物反應(yīng)器有:、包括基因治療藥、基因疫苗、反義藥物、植物、 按照醫(yī)學(xué)用途分類：，治療疾病是生物藥物的主要功能。，具有速度快、靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。，對(duì)于許多傳染性疾病來說，預(yù)防比治療更重要。 ，（1）基因工程藥物品種的開發(fā)；（2）基因工程疫苗；（3）基因工程抗體；（4）基因診斷與基因治療；（5）應(yīng)用基因工程技術(shù)建立新藥的篩選模型；（6）應(yīng)用基因工程技術(shù)改良菌種，產(chǎn)生新的微生物藥物；（7）基因工程技術(shù)在改進(jìn)藥物生產(chǎn)工藝中的應(yīng)用；（8）利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物。 概念:DNA分子中含有特定遺傳信息的一段核苷酸序列,是遺傳物質(zhì)的最小功能單位。特性：①基因可自我復(fù)制，②基因決定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，③基因可突變。 基因按功能分為：①結(jié)構(gòu)基因 ②調(diào)控基因 DNA的結(jié)構(gòu)與性能⒈DNA的結(jié)構(gòu)：四種核苷酸（A T C G）連接一級(jí)結(jié)構(gòu)、DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)（α，β），雙螺旋結(jié)構(gòu)。⒉DNA的性質(zhì)與功能:①吸收光譜260②電場(chǎng)中泳動(dòng)③變性、復(fù)性、雜交 基因表達(dá)⒈轉(zhuǎn)錄：在RNA聚合酶的催化下以DNA為模板合成mRNA的過程。：以mRNA為模板,tRNA作為運(yùn)載工具,將活化的氨基酸在核糖體上合成蛋白質(zhì)的過程。(1)分為三個(gè)階段：①起始②延長③終止(2)翻譯后的肽鏈加工:①羥基化②糖基化③磷酸化④乙?；? 醫(yī)用活性蛋白和多肽類包括：①免役性蛋白，如各種抗原和單克隆抗體。②細(xì)胞因子，如各種干擾素、白細(xì)胞介素、集落刺激生長因子、表皮生長因子及凝血因子。③激素，如胰島素、生長激素、心鈉素。④酶類，如尿激酶、鏈激酶、葡激酶、組織型纖維蛋白溶酶原激活劑及超氧化物岐化酶等。（如胰島素、干擾素、細(xì)胞因子等），為臨床使用建立有效的保障。 ，以便對(duì)其生理、生化和結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入的研究，從而擴(kuò)大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍。 。 ，存在不足之處，可以通過基因工程和蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造。 ，擴(kuò)大藥物篩選來源。（步驟）⒈目的基因的克?、矘?gòu)建DAN重組體⒊DAN重組體轉(zhuǎn)入宿主菌⒋構(gòu)建工程菌⒌工程菌發(fā)酵⒍表達(dá)產(chǎn)物的分離純化⒎產(chǎn)品的檢驗(yàn)等基因工程藥物制藥的主要程序獲得目的基因→組建重組質(zhì)?！鷺?gòu)建工程菌（或細(xì)胞）→培養(yǎng)工程菌 →產(chǎn)物分離純化→除菌過濾→半成品檢定→成品檢定→包裝 克隆真核基因常用方法：逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。①逆轉(zhuǎn)錄法 ：逆轉(zhuǎn)錄法就是先分離純化目的基因的 mRNA，再反轉(zhuǎn)錄成 cDNA，然后進(jìn)行 cDNA 的克隆表達(dá)。⒈ mRNA的純化⒉ cDNA第一鏈的合成⒊ cDNA第二鏈的合成⒋ cDNA的克?、?將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞：⒍ cDNA文庫的鑒定：抗性基因失活法、噬菌斑顏色改變法⒎ 目的cDNA克隆的分離和鑒定：核酸探針雜交法、免疫反應(yīng)鑒定法②化學(xué)合成法 ：較小的蛋白質(zhì)或多肽的編碼基因可以用化學(xué)合成法合成。必須知道目的基因的核苷酸順序或目的蛋白質(zhì)的氨基酸順序。再按相應(yīng)的密碼子推導(dǎo)出DNA的核甘酸序列。用化學(xué)法合成目的基因DNA不同部位的兩條鏈的寡核苷酸短片段，再退火成為兩端形成粘性末端的DNA雙鏈片段，然后將這些雙鏈片段按正確的次序進(jìn)行退火使連接成較長的DNA片段，再用連接酶連接成完整的基因。： ⒈不能合成太長的基因 目前 DNA 合成儀所合成的寡核苷酸片段僅為 50～60 bp，因此只適用于克隆小分子肽的基因。⒉遺傳密碼的簡(jiǎn)并使選擇密碼子困難，用氨基酸順序推測(cè)核苷酸序列，得到的結(jié)果可能與天然基因不完全一致，易造成中性突變。⒊費(fèi)用高。 對(duì)已發(fā)現(xiàn)基因的改造應(yīng)用基因修飾技術(shù)和點(diǎn)突變技術(shù)提高目的基因表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性、t1/提高表達(dá)量，降低毒性或免疫原性。：。目的基因的表達(dá)產(chǎn)量高。表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定。生物活性高和表達(dá)產(chǎn)物容易分離純化 適合目的基因表達(dá)的宿主細(xì)胞應(yīng)滿足以下要求:；；、不產(chǎn)生內(nèi)毒素；、需氧低、適當(dāng)?shù)陌l(fā)酵溫度和細(xì)胞形態(tài)；5容易進(jìn)行代謝調(diào)控；；、產(chǎn)率高，產(chǎn)物容易提取純化。 載體：是基因工程的目的和基本手段，是選用合適的載體把供體DNA（外源基因）運(yùn)載到受體細(xì)胞內(nèi)，從而復(fù)制擴(kuò)增大量的目的DNA分子或轉(zhuǎn)錄表達(dá)為相應(yīng)的產(chǎn)物。 基因工程載體分為：克隆載體,轉(zhuǎn)錄載體,表達(dá)載體。DNA(克隆載體）→DNA(轉(zhuǎn)錄載體）→RNA→蛋白質(zhì)→（表達(dá)載體）：①染色質(zhì)為環(huán)狀雙股DNA分子 ②具有操縱子結(jié)構(gòu) ③結(jié)構(gòu)基因多為單拷貝 ④特定區(qū)域分布特異DNA順序，因此外源DNA分子可以插入原核細(xì)胞DNA復(fù)制體系的特定區(qū)段：基因克隆載體是一類能夠承載外源基因并將其帶入受體細(xì)胞得以穩(wěn)定維持的DNA分子。2）目前經(jīng)常使用的載體，有質(zhì)粒和病毒兩類。各種不同的載體，盡管分子量大小、結(jié)構(gòu)和用途上