感染性疾病病原的診斷策略講座(已修改)
2025-01-27 04:27 本頁面
【正文】 感染性疾病病原的診斷策略上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室 周與華感染和感染性疾病一直是臨床醫(yī)學(xué)的重要課題，引起人們的廣泛關(guān)注，自動(dòng)化鑒定技術(shù)是怎樣的？ELISA、核酸探針、PCR診斷、16S文庫診斷技術(shù)的基本原理是什么？ELISA實(shí)驗(yàn)的主要實(shí)驗(yàn)策略和應(yīng)用側(cè)重有哪些？基因芯片技術(shù)的原理是什么？下面，我們共同探討一下這些技術(shù)的原理策略以及發(fā)展的趨勢。在我們的日常生活中，小到一個(gè)皮膚創(chuàng)衛(wèi)，大到肺炎，肝炎，性傳播疾病，都有感染聲音的存在。在感染性疾病的診療過程中，對于其感染性病原體的診斷處于一個(gè)非常重要的位置，因?yàn)樗葞椭覀兇_定疾病的病原，又指導(dǎo)我們后期的治療與用藥，可以說是一個(gè)不可或缺的因素。但我們都知道，造成感染性病原體的千差萬別，他們都具有不同的生物學(xué)特性，這就迫使我們用策略和手段去尋找他們。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，微生物學(xué)的鑒定和專斷技術(shù)也有了長足的進(jìn)步一、病原診斷策略的分類如今病原學(xué)的診斷技術(shù)多種多樣，從最簡單的手工平板劃線分離到最常規(guī)的自動(dòng)化細(xì)菌鑒定儀，到最新的DNA測取技術(shù)，病原學(xué)的診斷技術(shù)幾乎覆蓋了醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)的方方面面，具有很長的交叉性，這個(gè)問題看起來似乎復(fù)雜，沒有頭緒，但是我們能夠認(rèn)真梳理還是很容易的理出一條主線，其實(shí)無論什么方法，都能歸入兩個(gè)大類。一類是以病原體表現(xiàn)型為基礎(chǔ)的方法；另一類是以病原體基因型為基礎(chǔ)的方法，所以表現(xiàn)型就是病原體直接表型出的一些性狀，其物理學(xué)性狀、生化反應(yīng)特性、免疫學(xué)特性，特性可以通過平板劃線分離，生化反應(yīng)，血性型實(shí)驗(yàn)的檢測出來。從分子微生物學(xué)的角度講，表現(xiàn)型是病原體基因組，特別是一些活躍的基因經(jīng)過轉(zhuǎn)入翻譯后的外在表現(xiàn)，雖然只能體現(xiàn)病原體基因組的部分特征，但是由于針對其實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟，操作方便，成本相對低廉，因此，仍然是當(dāng)今病原體診斷的常規(guī)技術(shù)，相比之下以基因型為基礎(chǔ)的方法更加接近病原體的本質(zhì)，因?yàn)榛蚪M的存在了病原組的全部遺傳信息，以基因性為基礎(chǔ)的方法大致可以分為基于退性基因的檢測，以及基于測序的兩大手段。前者主要針對退役性基因，這些基因包含了病原體的某些種系特征，該方法快速特異，但鑒于臨床標(biāo)本千差萬別，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)敏感性問題。而后者主要基于病原體ＤＮＡ剪輯系列，可以說做到了觸及病原體的本質(zhì)，是當(dāng)今所有檢測技術(shù)的基因標(biāo)準(zhǔn)，但是由于經(jīng)濟(jì)成本和標(biāo)準(zhǔn)化的問題還很難廣泛推廣，不可否認(rèn)它將是未來診斷技術(shù)的趨勢和發(fā)展方向。二、以表現(xiàn)型為基礎(chǔ)的方法（一）基因物理學(xué)特性和生化反應(yīng)的診斷在整個(gè)微生物的發(fā)展歷史中，人類經(jīng)歷了經(jīng)驗(yàn)時(shí)期、現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期這幾個(gè)重要的歷史階段，在1670年荷蘭人發(fā)明了顯微鏡，第一次揭示了微生物世界的存在，開始人類進(jìn)入了實(shí)驗(yàn)時(shí)期，從那以后至今300多年的時(shí)間里，通過多種多樣的實(shí)驗(yàn)方法來鑒別不同微生物的物種間的不同性質(zhì)；這其中有形態(tài)學(xué)的方法最基本的格蘭染色，鑒定白喉棒狀桿菌的染色。鑒定結(jié)核分枝桿菌的抗酸染色，也有基于生化反應(yīng)的方法，如平板考察腸道細(xì)菌對于乳糖分解能力的不同以確定致病菌株，運(yùn)用了整合了四個(gè)生化反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)鑒定了不同的腸道桿菌的方法雖然這些方法被視作經(jīng)費(fèi)的保留下來再醫(yī)學(xué)上廣泛和大量的應(yīng)用 但是手工操作存在效率偏低的疫病。而隨著工業(yè)化的推進(jìn)和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，其中很多方法被系統(tǒng)化集成化標(biāo)準(zhǔn)化，許多手工作業(yè)被自動(dòng)化儀器所取代，這樣便催生了自動(dòng)化鑒定技術(shù)，手工鑒定和自動(dòng)化鑒定技術(shù)可以說相同原理在不同技術(shù)條件下的不同形式
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1