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第五節(jié)培養(yǎng)基medium(已修改)

2025-10-28 12:17 本頁面
 

【正文】 第五節(jié) 培養(yǎng)基 (medium) 定義:應科研或生產(chǎn)的需要,由人工配制的、適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營養(yǎng)基質(zhì)(混合養(yǎng)料)。 特點:任何培養(yǎng)基都應具備微生物所需要的六大營養(yǎng)要素,且應比例適當。所以一旦配成必須立即滅菌。 用途:促進微生物生長;積累代謝產(chǎn)物;分離微生物菌種;鑒定微生物種類;微生物細胞計數(shù);菌種保藏;制備微生物制品。 ? 培養(yǎng)基組分應適合微生物的營養(yǎng)特點(目的明確) ? 營養(yǎng)物的濃度與比例應恰當(營養(yǎng)協(xié)調(diào)) ? 物理化學條件適宜(條件適宜) ? 根據(jù)培養(yǎng)目的選擇原料及其來源(經(jīng)濟節(jié)約) 一、培養(yǎng)基的配制原則 (一)培養(yǎng)基組分應適合微生物的營養(yǎng)特點 即根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基;不同營養(yǎng)類型的微生物,其對營養(yǎng)物的需求差異很大。如 自養(yǎng)型 微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應該)由簡單的無機物質(zhì)組成。異養(yǎng)微 生物的培養(yǎng)基至少需要含有一種有機物質(zhì) ,但有機物的種類需適應所培養(yǎng)菌的特點。 按微生物的主要 類群 來說 , 它們所需要的培養(yǎng)基成分也不同: 細菌: 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基; LB (LuriaBertani) 放線菌: 高氏一號培養(yǎng)基 真菌: 查氏合成培養(yǎng)基; PDA (PotatoDextroseAgar) 酵母菌; 麥芽汁 當對試驗菌營養(yǎng)需求特點不清楚的時候,可以采用“生長譜”法進行測定。 ● 濃度過高 ——微生物的生長起抑制作用, 濃度過小 ——不能滿足微生物生長的需要。 ● 碳氮比( C/N) 直接影響微生物生長與繁殖及代謝物的形成與積累,常作為考察培養(yǎng)基組成時的一個重要指標; ● 速效性氮(或碳)源與遲效性氮(或碳)源的比例 ● 各種金屬離子間的比例 碳源中的碳原子的 mol數(shù) 氮源中所含的氮原子的 mol數(shù) C/N比值 = 例:谷氨酸生產(chǎn)中 C/N = 4/1時 , 菌體大量繁殖 , 谷氨酸積累少; C/N= 3/1 時 , 菌體生長受抑制 , 而谷氨酸大量增加 。 (二)營養(yǎng)物的濃度與比例應恰當 ( 1) pH: 各類微生物的最適生長 pH值各不相同: 細 菌: ~ 放線菌: ~ 酵母菌: ~ 霉 菌: ~ 在微生物的生長和代謝過程中 , 由于營養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累 , 培養(yǎng)基的初始 pH值會發(fā)生改變 , 為了維持培養(yǎng)基 pH值的相對恒定 , 通常采用下列兩種方式: 內(nèi)源調(diào)節(jié) :在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽;調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的碳氮比 。 外源調(diào)節(jié) :按實際需要不斷向發(fā)酵液流加酸或堿液 (三)物理化學條件適宜 ☆ 磷酸緩沖液: pH值從 ~ K2HPO4+HCl KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH K2HPO4+H2O ☆ 加入 CaCO3: CO32 –
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