hbsag免疫對小鼠t、b細胞功能的影響(已修改)
2025-01-24 08:14 本頁面
【正文】 系 統(tǒng) 實 驗 之 二 T淋巴細胞功能測定 付海英 實 驗 流 程 1W ③ (ELISA) ④ OVA (1mg/ml)+CFA免疫小鼠腹腔內注射 500 181。l OVA+CFA加強免疫小鼠 500 181。l ① 摘眼球取血 無菌取脾和胸腺 ② 分離血清 ② 2W 取脾和胸腺 ② 淋巴細胞轉化試驗 ② 生理鹽水（ 500 181。l )免疫小鼠腹腔內注射 生理鹽水加強免疫小鼠 500 181。l ① 2W After 1W 對照組 實驗組 抗體效價 增殖功能 實驗內容 ?小鼠摘眼球取血 、分離血清 ?淋巴細胞轉化試驗 教學要求 ?掌握小鼠血清的分離 ?掌握淋巴細胞轉化試驗的基本原理及基本操作 淋巴細胞轉化試驗 (Lymphocyte transformation test) ? 原理 ? 檢測方法 ? 操作步驟 ? 應用 原理原理Lymphocytes(B/T)MitogensSpecificity Ag ProliferationTransformationLymphoblastNucleicAcid↑Protein↑檢測方法檢測方法?形態(tài)學方法形態(tài)學方法?3HTdR摻入法摻入法?MTT法法 (本次實驗采用本次實驗采用 )形態(tài)學方法形態(tài)學方法?淋巴母細胞主要表現(xiàn)有體積明顯增大，是成熟淋巴細淋巴母細胞主要表現(xiàn)有體積明顯增大，是成熟淋巴細胞的胞的 34倍；染色質疏松，核仁清晰可見；胞漿豐富并倍；染色質疏松，核仁清晰可見；胞漿豐富并形成空泡。形成空泡。根據(jù)細胞的大小，核與胞漿的比例，胞漿的染色性和根據(jù)細胞的大小，核與胞漿的比例，胞漿的染色性和核結構以及有無核仁等特征，分別計數(shù)淋巴母細胞、核結構以及有無核仁等特征，分別計數(shù)淋巴母細胞、過渡型母細胞和核絲分裂相細胞以及過渡型母細胞和核絲分裂相細胞以及 成熟的小淋巴細成熟的小淋巴細胞胞 ，以前三者為轉化細胞，每份標本計數(shù)，以前三者為轉化細胞，每份標本計數(shù) 200個細胞，個細胞，按下式計算轉化率：按下式計算轉化率： 100%?????????未轉化的淋巴細胞數(shù)轉化的淋巴細胞數(shù) 轉化的淋巴細胞數(shù)轉化率 3HTdR摻入法摻入法G0G1有絲分裂原特異性抗原 SPr,RNA,D前體物質
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