【正文】 ISO15189 質(zhì)量管理體系范本文件（第 五 冊(cè)） 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： CXZY3SH01~61 第 1 版 編制： 審核： 批準(zhǔn)： 生效日期： 2022 年 1 月 1 日 曹縣中醫(yī) 醫(yī)院 檢驗(yàn)科 曹縣中醫(yī) 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： 版本 /修訂號(hào) ： 1/0 主題內(nèi)容 目 錄 生效日期： 20220221 第 2 頁 共 128 頁 目 錄 序號(hào) 主 題 內(nèi) 容 代 號(hào) 頁 號(hào) 1 血清總膽紅素測(cè)定 CXZY3SH01 6 2 血清直接膽紅素測(cè)定 CXZY3SH02 10 3 血清總蛋白液體雙縮脲法測(cè)定 CXZY 3SH03 13 4 血清白蛋白溴甲酚綠法測(cè)定 CXZY 3SH04 16 5 血清丙氨酸氨基測(cè)定 CXZY 3SH05 19 6 血清天門冬氨酸氨基測(cè)定 CXZY 3SH06 23 7 血清堿性磷酸酶測(cè)定 CXZY 3SH07 27 8 血清α 淀粉酶測(cè)定 CXZY 3SH08 31 9 血清葡萄糖 氧化 酶法測(cè)定 CXZY 3SH09 35 10 血清尿素氮 UreaseGLDH 紫外法 CXZY 3SH10 39 11 血清肌酐苦味酸法測(cè)定 CXZY 3SH11 43 12 血清尿酸 Uricase 法 測(cè)定 CXZY 3SH12 46 13 血清總膽固醇酶試劑法測(cè)定 CXZY 3SH13 50 14 血清甘油三酯酶試劑法測(cè)定 CXZY 3SH14 54 15 血清鎂二甲苯胺藍(lán)法測(cè)定 CXZY 3SH15 58 16 血清無機(jī)磷磷鉬酸法測(cè)定 CXZY 3SH16 61 17 血清鈣偶氮胂Ⅲ法測(cè)定 CXZY 3SH17 65 18 血清載脂蛋白 A1 測(cè)定 CXZY 3SH18 68 19 血清載脂蛋白 B測(cè)定 CXZY 3SH19 72 20 血清高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定 CXZY 3SH20 76 21 血清低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定 CXZY 3SH21 80 22 血清肌酸激酶 (CK) 法測(cè)定 CXZY 3SH22 84 23 血清肌酸激酶 MB 同工酶測(cè)定 CXZY 3SH23 88 24 血清乳酸脫氫酶 DGKC法測(cè)定 CXZY 3SH24 92 曹縣中醫(yī) 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： 版本 /修訂號(hào) ： 1/0 主題內(nèi)容 目 錄 生效日期： 20220221 第 3 頁 共 128 頁 26 血清 a羥丁酸脫氫酶測(cè)定 CXZY 3SH26 99 27 血清總膽汁酸循環(huán)酶法測(cè)定 CXZY 3SH27 103 28 OLYMPUS鈉、鉀、氯離子測(cè)定 CXZY 3SH28 106 29 血清二氧化碳酶試劑法測(cè)定 CXZY 3SH29 112 32 血清 g谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定 CXZY 3SH32 121 34 鈉離子電極電位法測(cè)定 CXZY 3SH34 127 35 氯的電極電位法測(cè)定 CXZY 3SH35 132 36 鈣的比色法測(cè)定 CXZY 3SH36 137 47 正常值、病理值復(fù)合控制品 CXZY 3SH47 188 49 復(fù)合校準(zhǔn)品 CXZY 3SH49 192 54 美的 冰箱操作維護(hù)規(guī)程 CXZY 3SH54 203 55 純水機(jī)操作維護(hù)規(guī)程 CXZY 3SH55 205 57 AU680生化分析儀操作維護(hù)規(guī)程 CXZY 3SH57 209 60 離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程 CXZY 3SH60 222 CXZY 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： 版本 /修訂號(hào) ： A/0 主題內(nèi)容 修 訂 頁 生效日期： 20220221 第 4 頁 共 128 頁 修 訂 頁 序號(hào) 文件編號(hào) 頁碼 需更改的內(nèi)容 更改內(nèi)容 批準(zhǔn)人 批準(zhǔn)日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 CXZY 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： CXZY3SH01 版本 /修訂號(hào) ： A/0 主題內(nèi)容 血清總膽紅素 (TBIL)測(cè)定 生效日期： 20220221 第 5 頁 共 128 頁 血清總膽紅素 (TBIL)測(cè)定 1. 實(shí)驗(yàn)原理 血清中的膽紅素分為直接（結(jié)合）膽紅素和間接（未結(jié)合）膽紅素。大多數(shù)方法是在1883 年 Ehrlich 提出的重氮法膽紅素測(cè)量法 1，一些改良的方法已被用來增進(jìn)反應(yīng)。這些改良的方法 是使直接膽紅素直接和重氮化合物進(jìn)行反應(yīng)，生成一種有顏色的化合物，而間接膽紅素需要一種溶劑，如表面活性劑后才能進(jìn)行反應(yīng)。 華宇 總膽紅素試劑是 釩酸氧化法， PH 接近于 3 時(shí)，在釩酸鹽及表面活性劑的作用下，總膽紅素被氧化成膽綠素。此時(shí)，膽紅素特有的黃色減少，通過測(cè)定釩酸作用前后的吸光度的差可求得樣品中總膽紅素的濃度。 膽紅 素 釩酸 膽綠素 2. 標(biāo)本： 病人準(zhǔn)備：無特殊要求。 最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。 類型：血清、肝素或 EDTA 血漿，應(yīng)避光 保存。 3. 標(biāo)本存放： 15～ 25℃保存可穩(wěn)定 2天； 2～ 8℃保存可穩(wěn)定 7天； 20℃保存可穩(wěn)定 3個(gè)月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！ 。 4. 標(biāo)本運(yùn)輸： 常 溫條件下避光保存運(yùn)輸。 5. 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)： 標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本。 6. 實(shí)驗(yàn)材料 試劑：華宇 總膽紅素試劑盒（ 試劑 1: 3 60ml； 試劑 2： 45ml） 試劑組成 試劑 1： 檸檬酸緩沖液 100mmol/L 表面活性劑 ,穩(wěn)定劑 適量 試劑 2： 磷酸鹽緩沖液 10mmol/L 釩酸鈉 10mmol/L 表面活性劑 適量 試劑準(zhǔn)備：液體試劑，直接使用，無需配制 。 CXZY 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： CXZY3SH01 版本 /修訂號(hào) ： A/0 主題內(nèi)容 血清總膽紅素 (TBIL)測(cè)定 生效日期： 20220221 第 6 頁 共 128 頁 試劑穩(wěn)定性與貯存 試劑避光保存于 2～ 8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為 12 個(gè)月。 試劑2 必需避光保存。試劑不可冰凍 。 變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。 注意事項(xiàng)：此試劑為體外診斷用，不要入口，毒 性還末確定；警告！腐蝕劑！不要入口；避免和眼睛，皮膚或衣服接觸，如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15 分鐘，接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。 校準(zhǔn)品：參見生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品 .SOP 文件 質(zhì)控品：參見生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品 .SOP 文件 7. 儀器 ：奧林巴斯 AU680 生化分析儀 8. 操作步驟 項(xiàng)目基本參數(shù)：參見生化檢驗(yàn)奧林巴斯 AU680 生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù) .SOP 文件。 儀器操作步驟：參見生化檢驗(yàn)奧林巴斯 AU680 生化分析儀操作規(guī)程 .SOP 文件。 9. 檢驗(yàn)結(jié)果 的判斷與分析 10. 質(zhì)量控制： 在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平 I 與 II 質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以 2S 為質(zhì)控警告限， 3S 為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程 .SOP 文件。 11. 計(jì)算方法： 以 貝克曼復(fù)合校準(zhǔn)品 復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果 無需手工計(jì)算 ， 以 μ mol/L 報(bào)告。手工測(cè)定計(jì)算方法為： △ A 標(biāo)本 總膽紅素 (μ mol/L) = 校準(zhǔn)液濃度 △ A 標(biāo)準(zhǔn) 12. 參考值范圍： mol/L 參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。 13. 臨床意義： 膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強(qiáng)，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運(yùn)輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合 ,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。 溶血（肝前黃疸）、實(shí)質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會(huì)導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅 素血癥，稱為 Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多，使 60～ 70%的嬰兒血CXZY 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： CXZY3SH01 版本 /修訂號(hào) ： A/0 主題內(nèi)容 血清總膽紅素 (TBIL)測(cè)定 生效日期： 20220221 第 7 頁 共 128 頁 液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測(cè)方法能檢測(cè)總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測(cè)定主要檢測(cè)水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計(jì)游離膽紅素的含量。 14. 操作性能 線性范圍： 0684μ mol/L 精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù) NCCLS 推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法 5， AU680 批內(nèi)精密度小于 4%或 SD≤ ，總精密度小于 5%或 SD≤ 。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù) 處理符合以上的NCCLS 的規(guī)則。 靈敏度： 本試劑的檢測(cè)限為 0μ mol/L。 病人結(jié)果可報(bào)告范圍： 0～ 684μ mol/L 15. 超出范圍結(jié)果處理： 本法線性上限為 684μ mol/L。如樣品測(cè)定值超過上限時(shí)，應(yīng)將樣品用 ％氯化鈉溶液作 1:1 稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以 2。 16. 病危報(bào)警值的處理 當(dāng)新生兒血清標(biāo)本測(cè)定結(jié)果總膽紅素〉 340μ mol/L 時(shí)，在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。 17. 方法局限性 本法線性上限為 684μ mol/L。如樣品測(cè)定值超過上限時(shí) ，應(yīng)將樣品用 ％氯化鈉溶液作 1:1 稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以 2。 干擾物質(zhì) ： 當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度 ≤ 300μ mol/L，血紅蛋白濃度 ≤ ，甘油三酯濃度 ≤ 20g/L 時(shí)沒有觀察到干擾 。 18. 補(bǔ)救措施： 當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。 19. 參考文獻(xiàn) 1. 《新編 檢驗(yàn)檢查診斷手冊(cè)》， 2022 年 11 月第 1 版。上?？萍冀逃霭嫔纭? 2． 《生物化學(xué)檢驗(yàn)》， 2022 年 2 月第 2 版。人民衛(wèi)生出版社。 3. 《臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)》， 1999 年 10 月第 2 版。人民衛(wèi)生出版社。 4. 《臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》，錢士勻主編，人民衛(wèi)生出版社。 5． 《臨床化學(xué)方法學(xué)評(píng)價(jià)》，羅侃主編，蘭州大學(xué)出版社。 6. 《現(xiàn)代臨床檢驗(yàn)正常值手冊(cè)》 2022 年 1 月第 1 版，安徽科學(xué)技術(shù)出版社。 7. 《診斷試劑產(chǎn)品手冊(cè)》第五版，上?？迫A東菱診斷用品有限公司。 8. 產(chǎn)品說明書，北京利德曼生化科技有限公司，無版號(hào)。 9. 產(chǎn)品說明書，浙江東甌生物工程有限公司，無版號(hào)。 20. 其他： 儀器測(cè)定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗(yàn)科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。 CXZY 醫(yī)院檢驗(yàn)科 生化室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號(hào)： CXZY3SH02 版本 /修訂號(hào) ： A/0 主題內(nèi)容 血清 直接 膽紅素 (DBIL)測(cè)定 生效日期： 20220221 第 8 頁 共 128 頁 血清直接膽紅素（ DBIL）測(cè)定 1. 實(shí)驗(yàn)原理 PH接近于 3時(shí)，在釩酸及表面活性劑的作用下，直接膽紅素被氧化成膽綠素，此時(shí)，膽紅素特有的黃色減少，通過檢測(cè)釩酸作用前后吸光度的差，可求得樣品中直接膽紅素的濃度 。 2. 標(biāo)本： 病人準(zhǔn)備：無特殊要求。 最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。 類型：血清、肝素或 EDTA血漿，應(yīng)避光保存。 3. 標(biāo)本存放： 15～ 25℃保存可穩(wěn)定 2天； 2～ 8℃保