檢疫性細(xì)菌病害ppt課件(已修改)
2025-01-20 05:03 本頁(yè)面
【正文】 第六章 檢疫性細(xì)菌病害 植物檢疫性病原細(xì)菌的檢驗(yàn)方法 梨火疫病 Fire Blight 玉米細(xì)菌性枯萎病 Stewart’s bacterial wilt of corn 柑橘黃龍病 Citrus Yellow shoot 椰子致死黃化病 Coconut Lethal Yellowing 復(fù)習(xí)思考題 植物病原細(xì)菌檢疫檢驗(yàn)技術(shù) ? 直接檢測(cè)：直觀檢驗(yàn)和生長(zhǎng)檢驗(yàn) ? 間接檢測(cè) 活菌檢測(cè) 免疫吸附分離法 噬菌體檢驗(yàn) 非活菌檢測(cè) 血清學(xué)檢測(cè) 活菌檢測(cè) ? 分離培養(yǎng)法：營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基分離純化得到的細(xì)菌 ? 濃縮接種及離體葉檢測(cè)：提取液濃縮接種感病植物，觀測(cè)發(fā)病情況。 例如：浙江大學(xué)等在 1％滅菌水瓊脂中加75 10－ 6的苯并咪唑，做平板，加感病植物葉片，針刺＋摩擦接種，培養(yǎng)（光、溫、濕度），短期獲得癥狀。主要應(yīng)用于水稻細(xì)菌性條斑病菌和小麥細(xì)菌性黑穎病菌的檢測(cè)。 ? 原理：接合血清學(xué)與平板分離技術(shù)，利用與抗原高度親和性的抗體，來(lái)捕獲目標(biāo)細(xì)菌，樣本中其他細(xì)菌均被沖洗掉，再將目標(biāo)細(xì)菌轉(zhuǎn)移或釋放到培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 ? 方法：平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法和免疫吸附稀釋培養(yǎng)法 平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法簡(jiǎn)略流程如下： 常用溶入丙酮的硝酸纖維素或指甲油作包被 洗滌液使用包被緩沖液 ? 原理：噬菌體侵染細(xì)菌，裂解寄主細(xì)胞，在液體培養(yǎng)時(shí)，會(huì)使渾濁的細(xì)菌懸浮液變清，在固體平板上培養(yǎng)，則出現(xiàn)許多邊緣整齊、透明光亮的噬菌斑。噬菌體具有專化性，利用此特點(diǎn)，可鑒別細(xì)菌的種類。 ? 非活菌檢測(cè)的方法很多，下表是檢測(cè)病原細(xì)菌常用的一些方法，前 9種血清學(xué)方法，均屬非活菌檢測(cè)。它們既能用于病原鑒定，又能直接用于病種或病株，甚至是無(wú)癥感染組織的檢測(cè)。 ? 原理： ? 方法：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ ELISA）、免疫熒光抗體法 ? 免疫熒光抗體法：將熒光染料（異硫氫酸熒光黃或羅丹明）與抗體以化學(xué)方法接合，再與抗體反應(yīng)，形成有熒光標(biāo)記的抗體 — 抗原復(fù)合物，在熒光顯微鏡下，可觀察到黃綠色熒光。 梨火疫病 Fire blight of pear ?分布 ： 1878年首先由 burrill描述，在紐約發(fā)生，后由 Erwin命名，是第一個(gè)被確定的植物細(xì)菌病害。主要分布于北美洲于西北歐，中歐、地中海、東南歐及大洋州和亞洲也有分布。大約 40多個(gè)國(guó)家。 梨火疫病的地理分布 ?寄主： 梨火疫病菌寄主范圍很廣，能為害梨、蘋果、山楂、木旬子、李等４０多個(gè)屬 220多種植物，大部分屬薔薇科 Pomoideae亞科。 ?危害性： 仁果類果樹的一種毀滅性病害。一棵多年生的梨和蘋果樹發(fā)病后可在幾星期內(nèi)死亡 ? 癥狀： 侵害花、果實(shí)、枝條和葉片。 ① 花 :侵染后變深褐色，枯萎。 ② 葉片 :從葉緣沿葉脈擴(kuò)展，先呈水浸狀，后黑褐色。 ③ 嫩稍 :先水浸狀，后褐色至黑色，向下彎曲，呈魚鉤狀。 ④ 果實(shí)：病部褐色凹陷，擴(kuò)展到全果，潮濕時(shí)病部生粘稠的細(xì)菌溢，初乳白色，后紅褐色。 ⑤ 病枝 :葉片凋萎，幼果僵化，但病葉病果不脫落，遠(yuǎn)望似火燒狀，故稱火疫病。 ⑥ 傷口：初期水浸狀，后下陷，呈潰瘍斑，病健交界處產(chǎn)生龜裂紋，韌皮部紅褐色，有黏液狀菌膿。 嚴(yán)重時(shí)，病害從嫩稍很快擴(kuò)展到枝條、主干，直至根部，全株死亡。 Advanced fire blight on fruit note bacterial ooze on fruit. Fireblight in nursery stock ?主要鑒定特征： 梨火疫病最典型的癥狀是花、果實(shí)和葉片受火疫病菌侵害后，很快變黑褐色枯萎，猶如火燒一般，但仍掛在樹上不落，故此得名。目前國(guó)際上將其癥狀據(jù)受侵害的部位，分成５個(gè)階段。 （ 1）花枯萎：侵染開放的花引起花枯萎。一般發(fā)生于早春，病菌直接從花器侵入，初為水漬狀斑，花基部或花柄暗色，不久萎蔫。病菌可擴(kuò)展至花梗及花簇中其它的花；在溫曖潮濕條件下，花梗上有菌膿滲出。隨著枯萎發(fā)展，花梗、花等變褐至黑褐色，條件適宜時(shí)可繼續(xù)侵染殺死小枝并形成小潰瘍斑。 （ 2）潰瘍枯萎：是指前一季越冬潰瘍邊緣的病菌重新復(fù)活的結(jié)果。初癥是在復(fù)活的潰瘍附近的健康樹皮組織上出現(xiàn)窄的水漬狀區(qū)，幾天后，樹皮內(nèi)部組織出現(xiàn)褐色條斑，隨后病菌侵入附近繁殖枝內(nèi)部并引起萎蔫死亡。這些枝條特別是嫩枝與下面談及的枝枯萎有明顯區(qū)別，即在萎蔫之前枝尖芽褪色（黃至桔黃色）。 （ 3）枝枯萎：細(xì)菌直接侵入前 1～ 3葉的枝尖，然后
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