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酶的生物合成與發(fā)酵生產(chǎn)(已修改)

2025-01-18 15:54 本頁面
 

【正文】 第二章 酶的生物合成與發(fā)酵生產(chǎn) 提取分離法 微生物細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酶 酶的生產(chǎn)方法 生物合成法 植物細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酶 化學(xué)合成法 動(dòng)物細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酶 第一節(jié) 酶生物合成及調(diào)節(jié) 一、酶的生物合成 遺傳信息傳遞的中心法則 轉(zhuǎn)錄傳遞給RNA,再由RNA 蛋白質(zhì) 翻譯 轉(zhuǎn)錄 逆轉(zhuǎn)錄 復(fù)制 復(fù)制 DNA RNA (一) RNA的生物合成 轉(zhuǎn)錄 (transcription) 定義 以 DNA為模板,以核苷三磷酸為底物,在RNA聚合酶(轉(zhuǎn)錄酶)的作用下,生成 RNA分子的過程。 . 轉(zhuǎn)錄模板 啟動(dòng)子( promotor) 終止子 (terminator) 模板鏈( template strand)反意義鏈 (antisense strand) 編碼鏈 (coding strand) 有意義鏈 (sense strand) DNA 5180。 5180。 3180。 3180。 反意義鏈 :指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄作用的一條 DNA鏈 有意義鏈 :無轉(zhuǎn)錄功能的一條 DNA鏈 . T C G A G T A C A G C T C A T G C G A G U A C RNA聚合酶 有意義鏈 反意義鏈 RNA PPi 5’ 5’ 3’ GTP UTP CTP ATP UTP RNA在 DNA模板上的生物合成 3’ 3’ 5’ RNA的轉(zhuǎn)錄過程 (三步 ) 原核生物的 RNA聚合酶 (DDRP) E. coli的 RNA聚合酶是由四種亞基組成的五聚體( ?2 ? ?? ?) αββ 39。α核 心 酶 ( c o r e e n z y m e )σ全 酶 ( h o l o e n z y m e )αββ 39。ασ起始因子 RNA合成過程 起始 雙鏈 DNA局部解開 磷酸二酯鍵形成 終止階段 解鏈區(qū)到達(dá)基因終點(diǎn) 延長階段 5? 3? ? ? RNA 啟動(dòng)子(promotor) 終止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 離開 RNA鏈的延伸圖解 3180。 5180。 RNADNA雜交螺旋 聚合酶的移動(dòng)方向 新生 RNA 復(fù)鏈 解鏈 有義鏈 模板鏈(反義鏈) 延長部位 定義 以 mRNA為模板,以氨基酸為底物,在核糖體上通過各種 tRNA、酶和輔助因子的作用,合成多肽鏈的過程。 (二)蛋白質(zhì)的生物合成 翻譯 (translation) 酪 5’ 5’ 3’ AUG GUU UAC ACA 酪氨酰 tRNA 反密碼 mRNA 密碼與反密碼的堿基配對(duì) AUG ACA 5’ 蛋 蘇 UGU GUU 3’ 受 位 (A位 ) 給 位 (P位 ) 大亞基 小亞基 蛋白質(zhì)的合成過程 (大腸桿菌) ? 氨基酸的活化 ? 肽鏈合成的起始 ? 肽鏈的延伸 ? 肽鏈合成的終止與釋放 氨基酸的活化與轉(zhuǎn)運(yùn) 反應(yīng)式: AA + tRNA + ATP 氨酰 tRNA合成酶 氨酰 tRNA+AMP+PPi 對(duì)于 ,肽鏈合成時(shí)的第一個(gè)氨基酸都是甲酰甲硫氨酸( fMet)。 在核糖體上合成多肽(三階段) 起始階段 延伸階段 終止階段 肽鏈合成的起始階段 : 形成 30SmRNAIF3復(fù)合物 tRNA結(jié)合: 30SmRNAIF3 fMettRNAIF2GTP fMettRNA正好位于 mRNA的起始密碼子上( AUG)。 IF1 30S起始復(fù)合物 AUG ACA 5’ 3’ AUG ACA 5’ 3’ UAC UAC AUG ACA 5’ 3’ 小亞基 mRNA 蛋氨酰 tRNA GTP 大亞基 GDP+Pi 受位 給位 蛋 蛋 肽鏈合成的起始階段 肽鏈合成的延伸階段 :氨基酰 tRNA進(jìn)入受位 。 :形成肽鍵 ,在轉(zhuǎn)肽酶作用下 ,給位與 受位結(jié)合 。 :核蛋白體向 3’ 端移動(dòng)一個(gè)密碼子的 位置 ,空出受位 ,不斷地進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、 移位 ,使肽鏈延長。 AUG ACA 5’ 3’ UAC 蛋 蘇 UGU AUG ACA 5’ UAC 蛋 蘇 UGU GUU AUG ACA 5’ UAC 蛋 蘇 UGU GUU AUG ACA 5’ 蛋 蘇 UGU GUU 3’ 3’ 3’ GTP GDP+Pi GDP+Pi GTP 起始復(fù)合體 進(jìn)位 轉(zhuǎn)肽 移位 Mg+ K+ 肽鏈合成的終止階段 。 ,多肽釋放 。 ,mRNA,大小亞基解離 . AUG UAA 5’ UAC AUG UAA 5’ UAC 3’ 3’
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