20xx年醫(yī)學專題—pcr技術在乙肝方面的應用-文庫吧
2024-11-19 04:22 本頁面
【正文】 陰性結果167。 無法檢測突變株及抗體第十五 頁 ，共五十五 頁 。SymptomsHBeAg antiHBeIgG antiHBcIgM antiHBc antiHBsHBsAg0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100Acute HBV Infection with RecoveryTypical Serologic CourseWeeksafterExposureTitre第十六 頁 ，共五十五 頁 。IgM antiHBcIgG antiHBcHBsAgAcute(6 months)HBeAgChronic(Years)antiHBe0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 YearsWeeksafterExposureTitreProgression to Chronic HBV InfectionTypical Serologic Course第十七 頁 ，共五十五 頁 。第十八 頁 ，共五十五 頁 。PCR技術 (j236。sh249。)檢測 HBV DNA167。 PCR167。 聚合酶鏈式反應 于 1983年由美國 Cetus公司的 立 ，并 和定點突變的發(fā)明者 1993年度諾貝爾化學獎，為生命科學領域 (lǐnɡ y249。)的研究開創(chuàng)了嶄新時代。第十九 頁 ，共五十五 頁 。PCR概 念 PCR（ PolymeraseChainReaction）即聚合酶鏈式反應，是指在 DNA聚合酶催 化 (cuīhu224。)下，以母鏈 DNA為模板，以特定引物為延伸起點，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復制出與母鏈模板 DNA互補的子鏈 DNA的過程。是一 項 DNA體外合成放 大技術，能快速特異地在體外擴增任何目的 DNA。第二十 頁 ，共五十五 頁 。PCR反應反應 (fǎny236。ng)的特點的特點167。 特異性強特異性強 引物與模板結合的特異性及聚合酶的忠實性引物與模板結合的特異性及聚合酶的忠實性 167。 靈敏度高靈敏度高 指數(shù)增長指數(shù)增長 ，從，從 pg (1012)可擴增至可擴增至 mg (106)水平水平 167。 簡便、快速簡便、快速 (ku224。i s249。) 2小時完成擴增小時完成擴增167。 對標本的純度要求低對標本的純度要求低 DNA 粗制品及總粗制品及總 RNA均可作為擴增模板均可作為擴增模板 第二十一 頁 ，共五十五 頁 。PCR反應 (fǎny236。ng)過程DNA的體外復制包括 3個步驟：167。 變性（ denaturation） :94?C30s167。 退火（ annealing） :55?C 30s167。 延伸（ extension） :72?C3060s3個步驟作為 PCR的一個 (yīɡ232。)循環(huán)，每當完成一個 (yīɡ232。)循環(huán)，一個 (yīɡ232。)分子的模板被復制為二個，產(chǎn)物量以指數(shù)形式增長。第二十二 頁 ，共五十五 頁 。第二十三 頁 ，共五十五 頁 。 第二十四 頁 ，共五十五 頁 。普通 (pǔtōng)PCR技術的缺點167。 普通 PCR臨床檢測技術雖然解決了檢出率低、周期長的問題 (w232。nt237。)，但由于假陽性率高，不能正確指導臨床實踐。167。 因此國家衛(wèi)生部曾在 1997年行文禁止將普通 PCR技術用于臨床診斷。 第二十五 頁 ，共五十五 頁 。定量 (d236。ngli224。ng)PCR的特點 167。 采用 (cǎiy242。ng)閉管檢測，不需 PCR后處理，并采用(cǎiy242。ng)dUTPUNG酶的防污染系統(tǒng)，擴增和檢測一次同時完成。不需開蓋，不產(chǎn)生污染。 避免了假陽性。167。 探針與被檢 DNA序列特異雜交， 增強了特異性。第二十六 頁 ，共五十五 頁 。定量 (d236。ngli224。ng)PCR的特點可定量結果，準確靈敏地反應了病原體的感染和治療可定量結果，準確靈敏地反應了病原體的感染和
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