【正文】 制標準曲線。說明：在測量魚粉中鎘含量時，朱老師還試過用微波壓力消解爐處理樣品，然后用石墨爐原子吸收光譜法檢測。兩種方法得出的檢測結(jié)果很相近，證明方法可行。、銅、錳、鋅的測定可采用微波技術(shù)消解飼料樣品,也可采用普通處理法消解樣品，但用微波消解處理法效果較好，該方法快速、靈敏、準確、操作簡便。最后用火焰原子吸收光譜法測定鐵、銅、錳和鋅的含量。樣品處理方法： 0 g 于微波消化罐中, mL , mL ,連接好消解裝置并放入微波消化爐中,按以下程序?qū)悠废馔耆? 420 kPa 保持10 min , 770 kPa 保持10 min ,1 120 kPa 保持10 min。消解程序執(zhí)行完畢后取出旋轉(zhuǎn)托盤,冷卻。開罐,將罐內(nèi)試樣溶液轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶中,用適量水洗滌消化罐,洗液并入容量瓶中,加水至刻度,搖勻。同時做空白試驗。測定方法：儀器條件：原子化器高度7 mm?？諝饬髁? L min1。氘燈校正背景。將標準溶液及消解液導入原子吸收分光光度計,按儀器工作條件繪制工作曲線,并由工作曲線求得消解液中測定元素的濃度,進而計算出試樣中鐵、銅、錳、鋅的含量。高效液相色譜法的定量限為2 mg/kg，檢測方法相對較簡單，成本較液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法和氣相色譜質(zhì)譜法低。原理：試樣用三氯乙酸溶液乙腈提取，經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后，用高效液相色譜測定，外標法定量。樣品處理方法：稱取2 g（ g）試樣于50 mL具塞塑料離心管中，加入15 mL三氯乙酸溶液（）和5 mL乙腈，超聲提取10 min，再振蕩提取10 min后，以不低于4000 r/min離心10 min。上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至25 mL，移取5 mL濾液，加入5 mL水混勻后做待凈化液。HPLC 參考條件：a)色譜柱：C8柱，250 mm mm（.），5 μm，或相當者；C18柱，250 mm mm（.），5 μm，或相當者。b)流動相：C8柱，離子對試劑緩沖液（）乙腈（85+15，體積比），混勻。C18柱，離子對試劑緩沖液（）乙腈（90+10，體積比），混勻。c)流速： mL/min。d)柱溫：40℃e)波長：240 nm。f)進樣量：20 μL。標準曲線的繪制：、80 μg/mL 的標準工作液，濃度由低到高進樣檢測，以峰面積濃度作圖，得到標準曲線回歸方程?；|(zhì)匹配加標三聚氰胺的樣品。定量測定：待測樣液中三聚氰胺的響應值應在標準曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應稀釋后再進樣分析。結(jié)果計算：試樣中三聚氰胺的含量由色譜數(shù)據(jù)處理軟件或按式（1）計算獲得：A c V1000X= f ????????（1）As m1000式中：X —— 試樣中三聚氰胺的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；A —— 樣液中三聚氰胺的峰面積；c —— 標準溶液中三聚氰胺的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；V —— 樣液最終定容體積，單位為毫升（mL）；As —— 標準溶液中三聚氰胺的峰面積；m —— 試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；f —— 稀釋倍數(shù)?？瞻讓嶒灒撼环Q取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。回收率：在添加濃度2 mg/kg～10 mg/kg濃度范圍內(nèi)，回收率在80%～110%之間，相對標準偏差小于10%。允許差：在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。樣品制備：除去豬肉中的脂肪組織并將肌肉組織剁碎、勻漿分裝于保鮮袋中,置于冷藏室保存。樣品提?。喝∈孪确盅b好的試樣(10 g),置于100 ml三角瓶中,加入5 g無水硫酸鈉后,再加入35 ml乙腈,超聲波提取30 min后, 4000 r/min離心5 min,乙腈層過無水硫酸鈉后,轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中。殘渣加入25 ml乙腈,超聲波提取20 min后, 4000 r/min離心5 min,合并兩次提取液。樣品凈化：將合并后的上清液于40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干,加入012 ml正丙醇,蒸發(fā)至近干,用4～5 ml乙腈洗滌旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶。于40℃水浴,用蒸發(fā)儀吹至1 ml左右,用乙腈準確定容至1 ml。用旋渦式混合器回旋1 min,再加入2 ml正己烷回旋1 min, 4000 r/min離心5 min,棄去正己烷層,乙腈層過0145μm尼龍濾膜后,以HPLC測定。儀器條件：色譜柱: DiamonsilC18 5μm, 200 416 mm。柱溫: 35℃。流動相:甲醇、水。梯度洗脫: 0～3 min,甲醇:水(V:V)= 30: 70。3～6 min,甲醇:水(V: V)=30: 70變化為甲醇:水(V:V)= 70: 30。6～12 min,甲醇:水(V:V)= 70: 30。檢測波長: 275 nm。進樣體積: 20μl。流速:1μl/min。色譜測定：取經(jīng)過提取、凈化的乙腈20μl進樣,以保留時間定性,峰面積定量。二、實習內(nèi)容在實習期間，我所負責的工作主要是飼料類樣品前處理，包括玻璃容器洗滌、樣品稱量、樣品消解（碳化、灰化、溶解）、溶液配制（轉(zhuǎn)移、過濾、定容）等。洗滌樣品的要求很高，清洗后要達到玻璃器壁上不掛水珠的效果。玻璃容器的一般清洗步驟是：加洗潔精浸泡→超聲1030分鐘→自來水沖洗干凈→純水沖洗→自然風干或烘干。有時遇到對結(jié)果要求嚴格的檢測項目，如比試，還要再超聲之前用稀硝酸浸泡。如果測某些無機元素，如鎘，就不能用洗潔精洗瓶子，因為洗潔精中含微量鎘。稱量樣品時，稱量紙或稱量瓶要放在天平感重盤正中央，位置放偏會對稱量結(jié)果有一定影響，操作者要帶手套，因為手中汗液有可能會粘到稱量瓶上，對結(jié)果造成影響。另外，在稱量前天平要預熱半小時以上，門窗封閉好，還要注意溫度和濕度。樣品碳化時，要在通風櫥內(nèi)進行，打開電爐，放上石棉網(wǎng)，坩堝放在上面，加蓋半掩，注意控制加熱功率。加熱功率太大時，會造成碳化速度過快，樣品小顆粒隨煙塵飄出；功率過小時，需要加熱很長時間，且碳化不充分。碳化完全后，不能直接把坩堝拿下，先關(guān)電爐，待坩堝降至近常溫時再取下，以免熱坩堝接觸到?jīng)鲔釄邈Q時驟裂。樣品灰化在馬福爐內(nèi)進行，一般設(shè)置溫度為550℃。升溫速率不能太高，以免坩堝斷裂。爐溫不宜過高，550℃即能達到效果。另外，加熱及保溫過程中不能打開爐門觀察樣品灰化情況，要等爐溫降至近常溫時才能打開取出。溶解灰化樣品時，一般要先往坩堝中加少量超純水，再加酸溶解。加酸時，速度不宜過快，以免溶液濺出。加酸后，對難溶樣品還要放到電爐上加熱促溶，這是電爐溫度不宜設(shè)置過高，一般低于100℃，溶液微沸后即停止加熱。轉(zhuǎn)移樣品時，要小心，以防樣品損失，最后用超純水沖凈坩堝，全部轉(zhuǎn)移到容量瓶中，定容。定容時，平視液面最低處。如果定容后溶液渾濁，就用漏斗過濾，過濾時肯定會造成溶液損失，不過因為溶液濃度一定，不會給測定帶來影響。過濾完后即可進行上機測定。因儀器比較貴重，測定都是由朱老師親自操作。對于測定銅鐵錳鋅等含量較高的元素，可以采用火焰吸收分光光度法；測鉛、鎘等含量較低的元素時，可采用石墨爐分光光度法。石墨爐分光光度法檢測限低，需樣量少，且可以自動進樣，能夠測定幾十種無機元素?；鹧嫖辗止夤舛确y定迅速，成本較低。測定樣品時，一般用火焰吸收分光光度法，對于超出火焰法檢測限的檢測量，可采用石墨爐法。三、實習感受通過本次實習，我基本學會了飼料中某些無機元素的一般檢測方法，熟悉了液態(tài)奶制品中三聚氰胺的檢測方法和豬肉中磺胺的測定方法。在實習中，我發(fā)現(xiàn)許多用原子吸收測定無機元素的樣品處理法很類似，用高效液相色譜測定有機化合物的樣品處理方法也很相似。同類監(jiān)測項目的檢測方法基本相似。本次實習給我最深的感受是：分析檢測項目對結(jié)果的準確度要求非常高。一個樣品的檢測結(jié)果是否準確，關(guān)鍵取決于兩方面，一是儀器的性能好，二是樣品處理時操作