【正文】
濃度 mol/L KCl溶液或終濃度 106 mol/L的苯腎上腺素 ( PE) 誘發(fā)血管收縮達(dá)穩(wěn)定后 → 每隔 5 min累積加入 CaCl2( ~ 5 mmol/L) → 觀察血管環(huán)張力的變化 。 ( 見下圖 ) 無鈣 KH液灌流 METHODS KCl對照 KCl+乙醇 PE對照 PE+乙醇 30 min后 待收縮穩(wěn)定 加入 KCl ( mol/L) 再換無鈣 KH液 間隔 5 min累積加入 CaCl2( mmol/L) 觀察血管環(huán)張力變化 無鈣 KH液灌流 無鈣 KH液灌流 無鈣 KH液灌流 再換無鈣 KH液 再換無鈣 KH液 再換無鈣 KH液 加入 KCl ( mol/L) 加入 PE ( 106 mol/L ) 加入 PE ( 106 mol/L ) 加入終濃度 3‰ 乙醇 孵育 30 min 加入終濃度 3‰ 乙醇 30 min后 孵育 30 min 待收縮穩(wěn)定 待收縮穩(wěn)定 待收縮穩(wěn)定 間隔 5 min累積加入 CaCl2( mmol/L) 間隔 5 min累積加入 CaCl2( mmol/L) 間隔 5 min累積加入 CaCl2( mmol/L) 觀察血管環(huán)張力變化 觀察血管環(huán)張力變化 觀察血管環(huán)張力變化 METHODS 三、 維拉帕米( verapamil, Ver)預(yù)處理下乙醇 的血管作用及其機(jī)制研究 1. 胸主動脈環(huán)的制備 使用去內(nèi)皮胸主動脈環(huán),預(yù)張力均設(shè)為 3 g(最適預(yù)張力),其余如前述 2. 標(biāo)本的預(yù)處理 如前述 METHODS 3. 實(shí)驗 分組 ( 見下圖 ) ( 1) Ver組:在去內(nèi)皮的血管實(shí)驗中 , 加入 106 mol/L的 L型鈣通道阻斷劑維拉帕米 ( Ver) , 孵育 30 min后 , 洗脫 , 加入 PE( 106 mol/L) 待收縮穩(wěn)定 后 , 再觀察血管環(huán)張力的變化 20 min。 ( 2) Ver+乙醇組:在去內(nèi)皮的血管實(shí)驗中 , 加入 106 mol/L的 Ver, 孵育 30 min后 , 洗脫 , 加入 PE( 106 mol/L) 待收縮穩(wěn)定后 , 再加入終濃度 3‰ 乙醇 , 共孵育 20 min, 觀察血管環(huán)張力的變化 。 ( 3) Ver+RR+乙醇組:在去內(nèi)皮的血管實(shí)驗中 , 加入 106 mol/L的 Ver, 5 min后 , 加入 105 mol/L的 ryanodine受體阻斷劑釕紅 ( ruthenium red, RR) , 共孵育25 min后 , 洗脫 , 加入 PE( 106 mol/L) 待收縮穩(wěn)定后 , 再加入終濃度 3‰ 乙 醇共孵育 20 min, 觀察血管環(huán)張力的變化 。 ( 4) Ver+HP+乙醇組:在去內(nèi)皮的血管實(shí)驗中 , 加入 106 mol/L的 Ver, 5 min后 ,加入 50 mg/L的 IP3受體阻斷劑肝素 ( heparin, HP) , 共孵 育 25 min后 , 洗脫 ,加入 PE( 106 mol/L) 待收縮穩(wěn)定后 , 再加入終濃度 3‰ 乙醇 共孵育 20 min, 觀察血管環(huán)張力的變化 。 METHODS Ver (106 mol/L) 30 min Ver組 Ver+乙醇組 Ver+RR+乙醇組 Ver+HP+乙醇組 PE (106 mol/L) 30 min 穩(wěn)定 10 min RR 105mol/L 5 min 穩(wěn)定 10 min HP 50mg/L 5 min 穩(wěn)定 10 min 乙醇 ( 3‰ ) 20 min 乙醇 ( 3‰ ) 20 min 乙醇 ( 3‰ ) 20 min RESULTS 一、乙醇對 KCl預(yù)收縮的主動脈環(huán)張力的影響 4 . 0 3 . 5 3 . 0 2 . 5 2 . 0 80100120140160180C o n t r o l 3 gE t h a n o l 1 gE t h a n o l 1 . 5 gE t h a n o l 2 gE t h a n o l 2 . 5 gE t h a n o l 3 gE t h a n o l 3 . 5 gE t h a n o l 4 g***AC o n c e n t r a t i o n o f E t h a n o l ( L o g )Tension (%)Fig. 1A. Concentrationdependent effect of ethanol (‰ 3‰ ) in 6 10?2 M KCl precontracted rat aortic rings with endothelium at differ