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分子診斷策略與常用技術(shù)-文庫吧

2025-01-15 20:09 本頁面


【正文】 子診斷常用技術(shù)n 核酸分子雜交技術(shù)n 等位基因特異寡核苷酸探針 (allele specific oligonucleotide, ASO)n DNA限制性長度多態(tài)性 (restriction fragment length polymorphism, RLFP)分析n PCRSSCPn DNA測序 n DNA芯片技術(shù) 點突變( C to T)5’3’3’ 5’G5’3’引物 1引物 2探針 1探針 2 A等位基因特異寡核苷酸探針( ASO) 216。 原理 指 DNA序列上發(fā)生一個變異后獲得或丟失了一限制性識別位點,使 DNA限制性片段長度發(fā)生變化,在人群中形成兩種或兩種以上的限制性類型 利用特定限制性識別位點進行基因分析限制性片段長度多態(tài)性分析( RFLP)RLFP分析法RFLP分析216。 優(yōu)點? 分辯率高,無需標(biāo)記 ,重復(fù)性好,簡便快速直觀? 主要用于核酸變異分析比較 , 微生物的分群分型,癌基因分析,遺傳病的診斷等。216。 局限 只能應(yīng)用突變引起限制性酶切位點改變篩選,檢測效率低。216。 原理 將經(jīng)擴增的 DNA片段變性形成單鏈,由于序列不同,單鏈構(gòu)象就有差異,在中性聚丙烯酰胺凝膠中電泳的遷移率不同,通過與標(biāo)準(zhǔn)物的對比,即可檢測出有無變異。216。 優(yōu)點? 檢測基因變異,具有操作簡便、快速特點,不需特殊設(shè)備,適用于大樣本篩選。? 己廣泛應(yīng)用于檢測各種病原體基因的點突變及缺失突變,基因的多態(tài)性分析等。PCR/單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析( SSCP)( PCRSSCP)示意圖DNA測序DNA自動測序結(jié)果舉例DNA芯片技術(shù)四、分子診斷的應(yīng)用及舉例n 遺傳疾病n 腫瘤
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