體外受精中1pn及-0pn(2pb)胚胎發(fā)育替能及影響因素分析-文庫吧
2025-07-10 23:03 本頁面
【正文】 常。≤3個(gè)治療周期。HBV及 HIV陰性。 排除標(biāo)準(zhǔn):生殖泌尿系統(tǒng)急性感染或性傳播疾病。嚴(yán)重的遺傳、軀體疾病或精神疾患。吸毒等不良嗜好。獲卵數(shù) 1個(gè)。短時(shí)受精聯(lián)合早期補(bǔ)救 ICSI(ReICSI)。 本研究共包括787個(gè) IVF周期和298個(gè) ICSI周期的不孕癥夫婦的臨床資料。二、患者診療方法回顧 1. 促排卵方案及卵母細(xì)胞的采集與處理:接受IVFET治療的不孕癥患者采用本中心常規(guī)方案進(jìn)行控制性促排卵,當(dāng) ≥ 3個(gè)卵泡直徑達(dá)18 mm時(shí),結(jié)合血清雌二醇(E2 )、孕酮(P)值,適時(shí)予以HCG(麗珠制藥)5000~10 000 U肌肉注射。36 h后在陰道超聲引導(dǎo)下,使用18 G取卵針(Cook,瑞典)來集卵冠丘復(fù)合體( OCCC),將其于加有GMOPS緩沖液( Vitrolife,瑞典)的培養(yǎng)皿中洗滌兩次后,轉(zhuǎn)入含GIVFPLUS培養(yǎng)液(Vitrolife,瑞典)的培養(yǎng)皿中,置于37℃、體積分?jǐn)?shù)6% C0體積分?jǐn)?shù)5% 02的飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 2. 精子處理: 精液處理來用密度梯度離心法。處理后的精子沉淀經(jīng)1 m1的GIVFPLUS培養(yǎng)液Vitrolife,瑞典)上游后,取上游液分析精子濃度。 :IVF周期患者于取卵后約3 h后行體外授精,加精濃度為每卵 0 5~1萬條精子。精卵共孵育約,1 h后機(jī)械剝離顆粒細(xì)胞,轉(zhuǎn)入含有G,PLUS培養(yǎng)液(Vitrolife,瑞典)的培養(yǎng)皿中。 ICSI周期患者于取卵后約3 h后將孵育后的卵母細(xì)胞經(jīng)透明質(zhì)酸酶(Vitrolife,瑞典)消化后機(jī)械剝離顆粒細(xì)胞,將卵母細(xì)胞置于含有GIVFPLUS 培養(yǎng)液(Vitrolife,瑞典)的培養(yǎng)皿中預(yù)培養(yǎng)1 h后, 挑選形態(tài)相對(duì)正常的精子對(duì)成熟的卵母細(xì)胞行單精子注射,注射后的卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)入含 G1PLUS培養(yǎng)液(Vitrolife,瑞典)的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。 :授精后18~20 h于倒置顯微鏡下觀察受精情況,記錄原核數(shù)目, 原核和胚胎形態(tài)學(xué)的觀察參照之前的研究。若觀察時(shí)胚胎出現(xiàn)兩個(gè)原核及兩個(gè)極體,則為2PN胚胎。若只有一個(gè)原核,則為1PN 胚胎。若觀察不到原核但有兩個(gè)極體,則為 0PN( 2PB)胚胎。 2PN胚胎于 D2和 D3在倒置顯微鏡下評(píng)估卵裂期胚胎的形態(tài),包括胚胎細(xì)胞數(shù)、碎片比例、細(xì)胞大小是否均勻等情況,參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)?？衫门咛榧?xì)胞數(shù)多于4個(gè)且評(píng)分高于2分的胚胎,可繼續(xù)培養(yǎng)至囊胚。根據(jù)患者的具體情況決定其2PN胚胎的去向:移植、冷凍或是囊胚培養(yǎng)。進(jìn)行囊胚培養(yǎng)的2PN胚胎,于 D5和 D6對(duì)囊胚進(jìn)行評(píng)估,囊胚分級(jí)的方法為 Gardner囊胚分級(jí)法。我中心可利用囊胚標(biāo)準(zhǔn)為:3BB及以上的囊胚。優(yōu)質(zhì)囊胚標(biāo)準(zhǔn)為:評(píng)分為4AA、4AB、4BA和 IBB的囊胚。可利用囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚可進(jìn)行移植或冷凍保存,冷凍的囊胚擇期復(fù)融后進(jìn)行移植。 臨床上常規(guī)將1PN胚胎及 0PN( 2PB)胚胎丟棄。本研究中所有的1PN及 0PN(2PB)胚胎均進(jìn)行序貫培養(yǎng),培養(yǎng)至 D6 ,胚胎及囊胚的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同上。 上述整個(gè)過程均取得患者的知情同意且獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。三、觀察指標(biāo) 2PN胚胎形成率= (2PN胚胎數(shù)/獲卵數(shù))X 100%。2PN胚胎卵裂率= (發(fā)生卵裂的2PN 胚胎數(shù)/2PN胚胎數(shù)) x100% 。 2PN 囊胚
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