喜樹組織培養(yǎng)體系建立-文庫(kù)吧
2025-06-14 21:38 本頁(yè)面
【正文】 件下，表現(xiàn)出全能性。全能性的實(shí)現(xiàn)除了取決于它在原來(lái)所處的自然部位上已達(dá)到的細(xì)胞分化程度和生理狀態(tài)，還必須滿足將其處于獨(dú)立發(fā)育的離體培養(yǎng)條件下，并且賦予細(xì)胞一定刺激，即營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素等調(diào)控物質(zhì)。實(shí)現(xiàn)植物再生有兩條途徑：體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑和器官發(fā)生途徑。通常器官發(fā)生是組培再生的主要途徑。組培法進(jìn)行無(wú)性繁殖可通過多種方法實(shí)現(xiàn)。主要有腋芽增殖、不定芽增殖、胚狀體增殖。其中腋芽增殖途徑變異小，常用于珍稀優(yōu)良品種的繁殖和保存，但增殖速度慢。胚狀體增殖速度快，多用于人工種子和遺傳轉(zhuǎn)化研究，但易產(chǎn)生畸形胚。不定芽增殖方法多樣，可直接從外植體上分化產(chǎn)生不定芽也可脫分化形成愈傷組織后進(jìn)而器官分化形成不定芽；還可由懸浮細(xì)胞或是原生質(zhì)體分裂、生長(zhǎng)、分化經(jīng)器官發(fā)生和體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑再生植棟。在組織培養(yǎng)研究中影響因素是多方面的，主要是來(lái)自：(1)培養(yǎng)材料的種類、所取外植體的部位與生理狀態(tài)。(2)培養(yǎng)基的種類和激素的配比與濃度。(3)培養(yǎng)條件(包括溫度、濕度、光照與通氣)。組織培養(yǎng)起步于50年代初期，主要用于快繁脫毒、植物育種(單倍體培育、胚胎培育、原生質(zhì)體培養(yǎng)與細(xì)胞雜交)、生產(chǎn)有用次生代謝產(chǎn)物、人工種子、種質(zhì)保存等。目前通過組織培養(yǎng)能再生的植物種類已有130個(gè)科，1500個(gè)種。2. 培養(yǎng)條件的選擇外植體處理外植體處理的方法有很多。種子、幼葉、莖段等外植體，經(jīng)過蒸餾水清洗、酒精消毒、0．1％HgCl，或5％NaCl0，消毒、再次蒸餾水清洗后，將種子剝?nèi)》N胚或切取胚軸，或?qū)⒂兹~和莖段切成合適大小，接種到培養(yǎng)基上，后置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天光照12h，光照強(qiáng)度1500～2000lx。消毒劑對(duì)外植體進(jìn)行消毒時(shí)，消毒時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)影響到接種后的污染情況。使用酒精進(jìn)行消毒，酒精濃度一般為70％～75％，消毒時(shí)間為30s左右；使用0．1％HgCl，消毒，時(shí)間為3。10min為宜；使用5％NaCl0，消毒，時(shí)間為5 min左右。種子的消毒時(shí)間要長(zhǎng)于幼葉和莖段的消毒時(shí)間。葉片和莖段等切塊的大小也會(huì)對(duì)組織培養(yǎng)產(chǎn)生影響。外植體越小，切面與體積的比率越大，傷害和褐變的程度就越大，因此，用完整的葉片作為外植體比切成小塊產(chǎn)生褐變的幾率小。研究員認(rèn)為，葉片剪成1
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