【正文】 ；1933年日本京都大學(xué)和臺灣臺北大學(xué)開始對煎茶和紅茶香氣進行研究，已做了大量工作，因為技術(shù)落后，每次研究必須消耗1 t 茶葉來抽提香氣，且對香氣組成的研究還很膚淺。從此以后，在日本、美國掀起了研究茶葉高潮，特別是日本的山西貞博士和田中協(xié)和博士，他們不但研究鮮茶葉中的青葉醛和青葉酮的形成機制，還研究了其他香氣物質(zhì)及其形成機制和綜合利用等［9］。國外將指紋圖譜技術(shù)運用對普洱茶研究的報道相對較少，主要還是以化學(xué)成分鑒定、特征成分及香氣成分研究等為主，系統(tǒng)全面地對普洱茶生茶氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜研究及建立質(zhì)量評價體系偶見報道。在國內(nèi)，對茶葉方面指紋圖譜研究的報道相對很多。如：宋冠群等［10］利用膠束電動色譜法建立了茶葉的指紋圖譜并用于分析10種中國名茶，實現(xiàn)了圖譜的數(shù)據(jù)化；成浩等人［11］利用多元化學(xué)指紋圖譜和逐步判別技術(shù)對茶葉進行判別，使不同產(chǎn)地屬性的扁形茶得到了有效的分離；寧井銘等人［12］采用高效液相色譜技術(shù)對云南普洱茶曬青毛茶的主要化學(xué)成分的指紋圖譜進行了研究，為普洱毛茶鑒別和質(zhì)量控制提供了實驗依據(jù)；顧睿等人［13］利用氣相色譜質(zhì)譜技術(shù)對普洱茶香氣成分的分析，研究普洱茶香氣成分對普洱茶品質(zhì)的影響。對普洱茶7542而言在運用HSGC/MS法對不同年限、不同批次的氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜研究方面的報道相對較少。GC/MS聯(lián)用充分發(fā)揮氣相色譜法高分離效率和質(zhì)譜法定性專屬性的能力,氣相色譜作為進樣系統(tǒng)，將待測樣品進行分離后直接導(dǎo)入了質(zhì)譜進行檢測，即滿足了質(zhì)譜分析對樣品單一性的要求，還省去了樣品制備、轉(zhuǎn)移的繁瑣過程，不僅避免了樣品受污染，對于質(zhì)譜進樣量還能有效控制，也減少了質(zhì)譜儀器的污染，極大的提高了對混合物的分離、定性、定量分析效率。質(zhì)譜作為檢測器，檢測的是離子質(zhì)量，獲得化合物的質(zhì)譜圖，解決了氣相色譜定性的局限性，質(zhì)譜法的多種電離方式可使各種樣品分子得到有效的電離，所有離子經(jīng)質(zhì)量分析器分離后均可以被檢測，有廣泛適用性。而且質(zhì)譜的多種掃描方式和質(zhì)量分析技術(shù)，可以有選擇的只檢測所需要的目標(biāo)化合物的特征離子，不僅能排除基質(zhì)和雜質(zhì)峰的干擾，還極大地提高了檢測靈敏度。自動化靜態(tài)頂空方法是指在已達平衡的密閉容器中液體或固體的頂部空間取氣態(tài)（或蒸氣）樣品，并與氣相色譜質(zhì)譜結(jié)合對氣態(tài)（或蒸氣）樣品進行分析的一種特殊的分析技術(shù)，針對揮發(fā)性成分，直接采集樣品上方氣體，可以避免基體成分對樣品分析的影響[14]，樣品消耗量少、操作簡單，條件溫和，能杜絕溶劑帶來的污染，并且所得到的香氣成分與人體嗅覺所感覺到的氣味最接近，能夠最大程度的表達出茶葉的香氣特征，已成為指紋圖譜技術(shù)不可缺少的重要部分，本實驗采用自動化靜態(tài)頂空（HS）與氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC/MS）相結(jié)合的方法對不同年限、不同批次的7542普洱茶的提取液的揮發(fā)性成分進行檢測，建立普洱茶7542揮發(fā)性成分、水溶物揮發(fā)性成分、醇溶物揮發(fā)性成分GC/MS指紋圖譜。論文(設(shè)計)主要內(nèi)容（提綱）：1. 樣品的來源：從勐海茶廠購買的實驗所需的不同年限、不同批次的普洱茶7542。2. 樣品預(yù)處理：將普洱茶7542研磨粉碎備用。3. 普洱茶7542提取液制備：采用超聲波提取制備普洱茶7542的水溶物揮發(fā)性成分和醇溶物揮發(fā)性成分。4. 提取液的凈化：將超聲波提取得到的普洱茶7542提取液過中速濾紙過濾處理。5. GC/MS條件選擇：通過普洱茶7542提取液多次進樣找出GC/MS檢測條件。6. 頂空（HS）進樣條件的選擇：通過多次動態(tài)頂空進樣，找到不同揮發(fā)性成分進樣的最佳條件。如：振蕩箱溫度、振蕩時間、進樣量等。7. 檢測：采用HSGCMS檢測各個提取液得出相應(yīng)的GCMS圖譜。8. 結(jié)果：找出檢測分析普洱茶7542揮發(fā)性成分、水溶物揮發(fā)性成分、醇溶物揮發(fā)性成分的HS條件、不同色譜柱對普洱茶7542的揮發(fā)性成分的影響，研究不同年限、不同批次的普洱茶7542的之間的差異性和主要成分的變化規(guī)律，建立不同年限、不同批次的普洱茶7542的GC/MS指紋圖譜，對指紋圖譜進行相似度分析、系統(tǒng)聚類分析、主成分分析。9. 聚類分析：結(jié)合樣品數(shù)據(jù)采用聚類的方法分析不同年限、不同批次的普洱茶7542，建立GC/MS結(jié)合聚類分析方法對不同年限、不同批次的普洱茶7542進行快速、準(zhǔn)確的鑒別。10. 主成分分析：結(jié)合樣品數(shù)據(jù)對不同年限、不同批次的普洱茶7542指紋圖譜特征參數(shù)進行主成分分析，為用計算機解析與評價圖譜、建立標(biāo)準(zhǔn)的指紋圖譜提供理論參考和實踐探索。11. 相似度計算：結(jié)合樣品數(shù)據(jù)對不同年限、不同批次的普洱茶7542指紋圖譜進行相似度計算，從整體上表征其所含化學(xué)成分的變化情況。擬研究的主要問題、重點和難點:研究主要問題：1. 不同年限、不同批次的普洱茶7542的提取液的制備。2. 多次進樣找出GC/MS檢測普洱茶7542揮發(fā)性，水溶性揮發(fā)性、醇溶性揮發(fā)性成分的儀器條件。3. 通過動態(tài)分析找出GC/MS連接的靜態(tài)頂空（HS）的最佳條件，如：振蕩箱溫度、振蕩時間、進樣量等。4. 建立普洱茶7542的揮發(fā)性、水溶性揮發(fā)性、醇溶性揮發(fā)性成分的氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜。5. 結(jié)合相關(guān)軟件研究不同年限、不同批次的普洱茶7542之間的差異和主要成分的變化規(guī)律。重點：1. GC/MS的檢測條件及GC/MS連接的靜態(tài)頂空（HS）的最佳條件的選擇；2. 找出不同年限、不同批次的普洱茶7542的揮發(fā)性、水溶性揮發(fā)性、醇溶性揮發(fā)性成分的GC/MS指紋圖譜的差異和主要成分的變化規(guī)律。3. 建立普洱茶7542的揮發(fā)性、水溶性揮發(fā)性、醇溶性揮發(fā)性成分的GC/MS指紋圖譜。難點：1. GC/MS檢測條件及GC/MS連接的靜態(tài)頂空最佳條件的選擇：振蕩箱溫度、振蕩時間、進樣量等。2. 不同年限、不同批次的普洱茶7542 GC/MS指紋圖譜的建立，研究主要成分變化規(guī)律及相似性和差異性；進行相似度計算、聚類分析和主成分分析，對普洱茶的“越陳越香”變化原因及變化規(guī)律進行初步探究。研究目標(biāo)：本實驗采用HSGCMS法對普洱茶7542的揮發(fā)性、水溶性揮發(fā)性、醇溶性揮發(fā)性成分進行檢測，對所得的氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜進行信息化和知識化處理并進行比較，找出不同提取的不同年限、不同批次的普洱茶7542之間的差異研究其主要成分的變化規(guī)律，建立普洱茶7542氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜，比較不同提取的不同年限、不同批次的普洱茶7542的香氣物質(zhì)，最終完成畢業(yè)論文。研究方法、技術(shù)路線、實驗方案、可行性分析：(一）采用的研究方法：（1） 提取方法：超聲波提取法；（2） 提取溶劑：沸水、乙醇；（3） 檢測方法：靜態(tài)頂空氣相色譜質(zhì)譜法；（4） 數(shù)據(jù)處理方法：相似度計算、主成分分析、聚類分析。（2） 技術(shù)路線和實驗方案（三）可行性分析： （1） 實驗室中已具備超聲波提取器、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀等與本實驗所需相關(guān)儀器和試劑；（2）論文內(nèi)容開展來源于教師科研內(nèi)容，能保證實驗的正常進行。（3）通過查閱大量相關(guān)文獻，對實驗所研究的內(nèi)容有所了解。研究的特色與創(chuàng)新之處：（1）采用動態(tài)分析方法尋找GC/MS連接的靜態(tài)頂空的最佳條件；（2）不同年限、不同批次的普洱茶7542的揮發(fā)性成分的 GC/MS指紋圖譜的建立；（3）結(jié)合應(yīng)用相關(guān)軟件對其GC/MS指紋